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O que é preciso saber ao analisar amostras de clorofila usando espectrometria UV-Vis

By 06.05.2025

Por Jennifer Empey-Kohl, especialista em aplicações de produtos

Em algumas indústrias alimentícias, pode ser importante determinar as concentrações de clorofila presentes nos produtos alimentícios. A clorofila é o pigmento responsável pela cor verde nas plantas e é um componente essencial da fotossíntese.21 Existem vários compostos diferentes de clorofila encontrados na natureza e, por extensão, em produtos alimentícios, com estruturas químicas variadas.

A análise do teor de clorofila em produtos alimentícios pode ajudar a avaliar seu valor nutricional e detectar adulterações, além de servir como um indicador de qualidade e métodos de processamento. Por exemplo, no óleo de canola, a clorofila é um contaminante indesejável, pois não apenas altera a cor do óleo, mas também pode participar de reações indesejadas, reduzindo a qualidade geral5-7. Nessas circunstâncias, a determinação do teor de clorofila pode ser vital.

Um método de análise comum é a Espectroscopia de Absorção UV-Visível.

A espectroscopia UV-Vis é uma técnica usada para medir a quantidade de luz ultravioleta (UV) e visível (Vis) que uma substância absorve. Nesse método, um feixe de luz UV ou visível é direcionado a uma amostra, que pode ser líquida ou sólida. A luz é absorvida ou passa através da amostra. Medindo a intensidade da luz que consegue passar pela amostra e a intensidade da luz sem a presença da amostra, é possível determinar a absorbância, que é registrada como uma função do comprimento de onda. Diferentes substâncias absorvem luz em diferentes comprimentos de onda, criando um espectro de absorção único. Ao analisar esse espectro, é possível identificar a substância e, através da lei de Beer, determinar sua concentração na amostra.

Realizamos um estudo sobre a clorofila utilizando a técnica UV-Vis.

O estudo sobre a clorofila

A clorofila existe em duas formas principais, clorofila a e clorofila b, cada uma absorvendo luz em diferentes comprimentos de onda. Essa propriedade única torna possível analisar e quantificar o teor de clorofila em produtos alimentícios, fornecendo informações sobre a qualidade, o frescor e o histórico de processamento do produto.

Usamos um espectrofotômetro UV-Visível para analisar a clorofila extraída de amostras de espinafre disponíveis comercialmente, bem como para analisar o teor de clorofila presente em amostras de azeite e óleo de canola. Os espectros UV-Visíveis resultantes foram comparados aos padrões de clorofila medidos no instrumento e análises matemáticas adicionais foram realizadas para determinar as concentrações de clorofila a e b. Para o óleo de canola, a concentração de clorofila foi quantificada seguindo os procedimentos descritos pela American Oil Chemists Society (AOCS).

Espectroscopia de absorção UV-Visível, preparação de amostras, processos e desafios

A espectroscopia de absorção UV-Visível é uma técnica analítica poderosa usada para medir a absorção da luz pela clorofila em comprimentos de onda específicos. Este método é preferido devido à sua precisão, simplicidade e natureza não destrutiva. Medindo a absorbância a 665 nm e 645 nm, os cientistas podem determinar as concentrações de clorofila a e b, respectivamente.

A precisão da análise da clorofila depende em grande parte da preparação adequada da amostra. As amostras de alimentos são normalmente homogeneizadas e extraídas usando solventes como acetona ou etanol. O extrato é então filtrado para remover partículas, garantindo uma solução clara para a análise espectroscópica.

O procedimento de espectroscopia UV-Visível envolve a calibração do espectrofotômetro com soluções padrão de clorofila para estabelecer uma linha de base. A absorbância da amostra de alimento preparada é então medida e a concentração de clorofila é calculada utilizando equações estabelecidas. A calibração é crucial para levar em conta qualquer variabilidade potencial do instrumento e garantir resultados precisos.

Como essa técnica não é destrutiva, ou seja, ela não altera a amostra, permite análises adicionais, se necessário. Ela tem alta sensibilidade e pode detectar baixas concentrações de clorofila, tornando-a adequada para uma ampla gama de produtos alimentícios. Além disso, o procedimento é relativamente rápido, permitindo análises de alto rendimento em ambientes industriais.

Embora a espectroscopia de absorção UV-Visível seja um método robusto, alguns desafios precisam ser considerados:

  • Interferências: Outros compostos nas amostras de alimentos podem absorver luz em comprimentos de onda semelhantes, interferindo potencialmente na medição da clorofila. A preparação adequada da amostra e a otimização do método podem mitigar essas interferências.
  • Seleção do solvente: A escolha do solvente para extração pode afetar a eficiência e a precisão da análise da clorofila. Selecionar o solvente apropriado e garantir procedimentos de extração consistentes é vital para obter resultados confiáveis.

Conclusão

Você pode ler os resultados e a discussão do estudo de amostras de espinafre e óleo em nossa nota de aplicação, (Análise do teor de clorofila em produtos alimentícios por meio de medições de absorção UV-Visível). Ela descreve em detalhes a preparação, a instrumentação, os espectros de absorbância, as tabelas de máximos de comprimento de onda, os resultados e as referências. Concluímos a partir desses resultados que a espectroscopia de absorção UV-Visível fornece informações valiosas sobre a qualidade do produto, métodos de processamento e desenvolvimento, ajudando a garantir que os produtos alimentícios que contêm clorofila atendam aos mais altos padrões de qualidade.

À medida que a tecnologia avança, esse método analítico continuará a desempenhar um papel significativo na garantia da qualidade e inovação dos alimentos.

Recursos adicionais e referências

Referências utilizadas acima e na nota de aplicação:

  1. Björn, L.O.; Papageorgiou, G.C.; Blankship, R.E.; Govindjee, A Viewpoint: Why Chlorophyll a?, Photosynth. Res., 2009, 99, 85 – 98.
  2. Chen, M.; Blankenship, R.E., Expandindo o espectro solar usado pela fotossíntese, Trends Plant Sci., 2011, 16, 427 – 431.
  3. Miazek, K.; Ledakowicz, S., Extração de clorofila de folhas, agulhas e microalgas: uma abordagem cinética, Int. J. Agric. Biol., 2013, 6, 107 – 115.
  4. Daun, J.K, Spectrophotometric Analysis of Chlorophyll Pigments in Canola and Rapeseed Oils, Lipid Technol., 2012, 24, 134 – 136.
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