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蛋白 A 色谱填料
一种高通量，低成本的蛋白 A色谱层析捕获方法
Thermo Scientific 为单克隆抗体纯化提供了蛋白 A 亲和填料，这类填料被证明在流速较低时具有较高的动态结合性能，并且在其他色谱介质产品无法操作的高线性速度下仍能保持出色的结合能力。
POROS 蛋白 A 色谱层析具有多种优势：
特点：
- 专为单克隆抗体纯化设计的 50 μm 硬质聚合物填料
- 填料基架由包被多羟基聚合物的交联聚苯乙烯二乙烯苯组成。
- 涂层通过共价固定重组蛋白 A 到表面从而进一步衍生化。
优势：
- 经过优化可进行极快速传质
- 硬质聚合物载体的物理和化学稳定性良好，具有出色的载量和流速性能
- 无需增加色谱柱体积即可提高通量
POROS MabCapture A Select (MCAS)
- 蛋白 A 高通量色谱填料系列的最新产品
- 将现有的MabCapture A 产品之前作出的多项改进，同时偶联上我们自己现有的蛋白A 配体
- 价格更低，有助于降低临床生产的成本
图 A：
图 B：
图 1. 性能不受流速和保留时间影响 (A) 随着线性流速在 3 倍递增，POROS MabCapture A 仍能保持较高的动态结合载量。 与琼脂糖填料相比，只有 6 mg/mL 或 12% 载量的衰减；在本例中，GE MabSelect™ 基质在更有限的流速范围内则出现21 mg/mL 或 45% 的 DBC 衰减。
(B) POROS 蛋白 A 填料被证明具有更高的动态载量，通常和保留时间没有太大关系。 工作流速和柱床高度不需要通过优化来实现 IgG 向rPA 包被表面的色谱基球扩散。 能高效、稳健地进行捕获。 这样就能更加快速地进行处理，从而提高小色谱柱上的循环次数，更好地利用色谱柱寿命，并且节约成本或缩短常规处理时间。
图 2. pH 稳定性高，色谱柱寿命长。 在每次循环以 500 cm/hr 的速度暴露于 0.1 N NaOH 30 分钟后（总计 50 个循环处理），填料的容量仅有轻微下降。 数据表明填料的重复使用能力相当稳健。 由于该研究所用的蛋白制备品中含有蛋白酶，所以很难确定到底是氢氧化物还是上样液中的蛋白酶导致稳定性下降。 作为最坏研究，这组数据包含了两种降解模式。 这也可以被视为一项保守性研究，因为大多数工艺不会在每个循环后都采用氢氧化物处理。
图 3. 根据循环数的rPA 脱落。 重要的是要了解高结合载量对 rPA 脱落水平可能造成的影响。 rPA 与 POROS 基球共价偶联。 此图表明 rPA 脱落水平仍处于低 ppm 范围内，并且在下降后趋于平稳，和常见的rPA 填料类似。 按预期使用时，POROS 蛋白 A 填料会导致较低的溶出蛋白 A 浓度，然后达到平稳状态。 经过 5 个循环后，MCA Select 和 MCA 的配基脱落水平 ≤10 ppm (10 ng/mg IgG) 或更低。
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应用资料
Pharmaceutical Grade Reagent. For Manufacturing and Laboratory Use Only.
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