兼容可重复使用计数板的灵活荧光和明场双模式细胞计数

Invitrogen Countess 3 FL全自动细胞计数仪具有荧光功能,可从14种光谱范围选项中选择两种易于更换的荧光立方。与Countess 3细胞计数仪器一样,Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪器也可以在明场下计数细胞和检测活性,使用荧光试剂,还可以在短短30秒内报告荧光蛋白表达、凋亡、转染效率和细胞活性。

 

荧光细胞计数仪还允许使用基于荧光的细胞检测,这些检测通过使用荧光细胞染料或荧光标记细胞,对复杂样品具有更强的特异性。


Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪特点

Countess 3 FL和Countess 3 共同的特色:准确、快速、简单、自动化;它们提供覆盖多种细胞系的活性检测和单细胞数据,兼容可重复使用计数板;并且它们具有支持 21 CFR 第 11 部分电子记录合规性要求的选配软件。此外,Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪的荧光功能开辟了更多的选择和应用。

荧光应用

细胞活性、凋亡、转染效率、荧光蛋白表达等

可更换 LED 光立方

将您的荧光蛋白和染料选择扩展到 GFP 和 RFP 之外

优化过的 ReadyCount 试剂

专为Countess 3 FL全自动细胞计数仪而设计


荧光细胞计数应用

除了细胞计数外,Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪器的荧光能力通常用于评估细胞活性、凋亡、转染效率和荧光蛋白表达。应用范围适用于任何自发荧光或可以使用荧光染料进行标记的细胞参数。您可以在样品数据中找到说明培养细胞质量控制、CAR-T 细胞筛选、CRISPR-Cas9 编辑效率以及其他荧光应用的数据。

 

细胞活性。评估细胞活性是日常细胞培养中的一个关键步骤,是准确高效的下游应用所必需的步骤。Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪的荧光选项提供了一种灵敏并具体的活性检查,可在下游样本分析之前快速轻松地进行。

 

尽管台盼蓝广泛用于明场细胞计数中的活性评估,但在某些情况下它可能会改变细胞形态。例如,当用台盼蓝为死鼠 PBMC 染色时,它们可能会膨胀并下沉到与活细胞不同的焦面,从而使准确检测和计数变得复杂。作为一种荧光替代品,Invitrogen ReadyCount Green/Red 活性染料包含优化过的吖啶橙和碘化丙啶 (AO/PI) 组合。荧光染色可以在不改变细胞形态的情况下,为混合细胞群中的活/死状态提供出色的灵敏度和更高的特异性。

利用荧光细胞计数仪进行活性测定

使用 ReadyCount Green/Red 活性染料对小鼠 PBMC 进行了染色,并用 Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪进行了计数。在荧光模式下,预先优化过的 AO/PI 混合物具有更高的活/死细胞特异性。死细胞 (38%) 被 PI 染为红色,并使用 Texas Red 2.0 光立方进行检测,而所有有核细胞 (99%) 因被 AO 染料染色而发出绿色荧光,并使用 GFP 2.0 光立方进行检测。                                                                        

细胞凋亡检测

使用 4 µM 星孢菌素对 U2OS(人骨肉瘤上皮)细胞进行培养以诱导调往,使用 CellEvent Caspase 3/7 Green 检测试剂和 SYTOX Deep Red 核酸染料进行标示,并在配备了 GFP 2.0 和 Cy5 2.0 光立方的 Countess 3 FL全自动细胞计数仪上进行计数。分析发现了凋亡(绿色,83%)、死亡(红色,32%)和“将死”(青色,16%)细胞。百分比总和超过 100%,因为表达这两种染料的细胞中有 16% 在所有三个类别中都有计数。

细胞凋亡检测。荧光染料可检测细胞凋亡的不同方面和阶段,如质膜改变(Annexin V)、线粒体变化 (JC-1) 或半胱天冬酶激活(Caspase 3/7)。将其中一种与细胞活性染料配对,使用Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪进行检测,可以识别凋亡细胞以及活细胞和死细胞。

转染效率。评估细胞群中成功转染或转导细胞的百分比对于研究至关重要。通常,转染或转导与 GFP 等荧光蛋白报告基因相关。Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪装入选择好的光立方后,可通过一种快速简单的方法轻松获得转染效率数据。

转染效率

用 GFP 表达载体转染 Jurkat 细胞。(左)在 EVOS M5000 成像系统上采集的这幅图像中,可用看到细胞附着在血管上。(右)在配备 EVOS GFP 光立方的 Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪上对胰酶消化后的细胞进行计数。分析表明,50% 的细胞转染成功。

“我们比较了血球计数板和Countess II,结果总是很接近。荧光检测功能让我们可以测定转染和转导效率。当需要检测超过两种荧光时,荧光检测所需的光立方很容易更换。自动对焦非常有效和准确,同时可以手动对焦。”

David Waynar,

Santa Cruz Biotechnology


EVOS LED光立方

Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪器有两个可选荧光通道,可检测插入的光立方测定的荧光颜色。Countess 3 FL全自动荧光细胞计数仪器可搭配14种不同且可更换的光立方,不限于只能检测表达GFP和RFP的细胞。

假设您对测量细胞群中细胞的凋亡和活性都感兴趣。您可以测量半胱天冬酶激活情况(如 CellEvent Caspase-3/7 Green 检测试剂)以及配合 EVOS GFP 2.0 光立方。此外,还可使用活性染料(如 SYTOX Red 死细胞染料)配合 EVOS Cy5 2.0 光立方 测量已经过凋亡阶段的死细胞。这种染色组合,连同两种 EVOS 光立方,提供了一种快速简单的多重通道方法来获得细胞凋亡和活性数据。


优化过的 ReadyCount 试剂

即使是混合样本,荧光染色也可以提供丰富的细胞数据,问题是可能很难优化。Invitrogen ReadyCount试剂是经过与Countess 3全自动荧光细胞计数仪配合使用,并预先优化的批间稳定的荧光染料。

ReadyCount Red 死细胞染料

ReadyCount Red死细胞染料试剂为死细胞染色,可搭配 EVOS RFP 2.0 或 Texas Red 2.0 光立方进行检测。

ReadyCount Blue 细胞核染料

ReadyCount Blue细胞核染料试剂为核酸染色,可搭配 EVOS DAPI 2.0 光立方进行检测。 

要查看 ReadyCount Green/Red 活性染料的说明,请参阅上面的荧光计数应用


视频和演示


性能数据

 

技术规格处理时间:<30 秒
样本浓度范围:1 x 10⁴–1 x 10⁷ 个细胞/mL
颗粒直径范围:约 4–60 µm
细胞直径范围:约 4–60 µm
规定的样本体积:10 μL
USB 驱动器:32 GB(兼容 FAT32 、exFAT 或 NTSF)
光学器件:500 万像素摄像头、2.5 倍光学放大倍率
物理特性仪器尺寸:
9 in. 宽 x 5½ in. 深 x 9 in. 高;228.6 mm 宽 X 139.7 mm 深 x 228.6 mm 高
重量:8 lb;17.6 kg
计数区域

面积:2.26 mm x 1.69 mm (3.82 mm²)

Graphic image depicting the area of a typical standard hemocytometer and the area counted by the Countess 3 Cell counter which is significantly larger

仪器附带配件用于存储和向计算机传送数据的 USB 驱动器
Countess 一次性玻片架
Countess 可重复使用玻片架
Countess 细胞计数板(50 片)
电源线和 4 个适用于大多数国家的电源插头适配器
快速使用参考卡(QRC)
另售配件Countess 可重复使用计数板
高功率 USB Wi-Fi 模块(适配器)
Countess 一次性细胞计数板
台盼蓝染料
Countess SAE 软件解决方案
Countess 3 细胞计数标准玻片

订购信息

* 由于区域所限,中国区域提供ABRC式延保

从以下项目中选择后,将提供自定义报价:
  • Countess 3 FL 全自动细胞计数仪
  • Countess 3 FL 可重复使用计数板
  • Countess 一次性细胞计数板(50 片)
  • Countess 一次性细胞计数板(500 片)
  • Invitrogen 台酚蓝染料 (0.4%)
  • EVOS 光立方,GFP 2.0
  • EVOS 光立方,RFP 2.0
  • EVOS 光立方,DAPI 2.0
  • ReadyCount Green/Red 活性染料
  • 3 年快速换机延保

仅供研究使用。不可用于诊断。