Cell Tracking

细胞运动和定位研究需要专门的细胞示踪(细胞追踪)荧光探针,首先必须要对活细胞无毒性,同时还要有多种荧光染料颜色可供选择,以便匹配仪器的激光器和滤光片,并能与抗体或其他细胞分析探针共染。您可选择用于短时程细胞追踪或长时程细胞追踪的被动扩散染料,或能追踪5天甚至更久的荧光融合蛋白标记法。赛默飞Invitrogen细胞示踪荧光探针是在复杂环境中追踪细胞的重要工具,广泛应用于细胞迁移、创伤愈合及干细胞分化研究。这些探针稳定无毒、可在细胞内稳定保留,并发出明亮荧光。多种颜色选择,方便与其他荧光探针共同使用。

荧光光谱查看器   选择细胞追踪/细胞示踪相关产品

短期细胞追踪

  • 可快速加载标记(通常 15 分钟至 1 小时)
  • 短期追踪(一般 3-6 代)
  • 可适当耐光漂白/抗光淬灭
  • 荧光信号亮度适中
  • 信号分布于整个细胞

检测细胞运动和定位的最简单方法就是使用具有膜通透性的探针染料进入细胞并在加载后转变为膜非通透性物质。理想的细胞追踪染料需要可存留于分裂多代后的子细胞中,但不会通过接触转移到相邻细胞中。Invitrogen CellTracker 示踪染料就具有这样理想的特性——在工作浓度下保持稳定且无细胞毒性,可稳定存留在细胞中,且在生理 pH 条件下可发出明亮的荧光。CellTracker 示踪荧光染料还具有多种发射光谱,可轻松与抗体标记结合使用。

长时程细胞追踪

  • 细胞加载标记一般需要 1 小时
  • 可长时间追踪(通常 可追踪6-10 代)
  • 具有较强的耐光漂白/抗光淬灭特性
  • 荧光信号亮度高
  • 在整个细胞中呈点状分布

细胞运动和定位的长时程追踪需要示踪荧光染料对光淬灭具有更强的抵抗性,并且能够在细胞中存留更多代。Invitrogen Qtracker 标记荧光探针可为长时程(可达6-10 代)细胞追踪提供强烈且稳定的荧光信号。可选8 种不同荧光颜色,且可耐光漂白/抗光淬灭,在细胞内发出强烈的点状荧光信号,并且仅适用单一种激光激发就能产生不同的发射光信号,特别容易于与抗体标记染色一起多色分析使用。Qtracker 探针具有广泛的发射光谱,也很容易与抗体标记染色一起使用。

采用Qtracker示踪探针、、荧光染料和CellLight荧光蛋白进行多色分析
采用Qtracker示踪探针、、荧光染料和CellLight荧光蛋白进行多色分析。先使用 CellLight Plasma Membrane-GFP(绿色)转导 U2-OS 细胞,然后使用Qtracker 655 细胞标记试剂盒(洋红色)和 HCS NuclearMask Blue(蓝色)。

利用荧光蛋白进行细胞追踪/细胞示踪

  • 荧光蛋白转导实验步骤简单,直接加入即可
  • 放置过夜孵育
  • 可长时程追踪细胞长达 2 周或超过 10 代
  • 可选择红色或绿色两种荧光蛋白
  • 可与其他荧光染料或蛋白标记同时多色分析

瞬时转导细胞可在细胞内的不同的特定位置表达荧光融合蛋白,在生长缓慢的细胞群中可表达至少 5 天或长达 2 周。标记后的细胞非常容易进行追踪检测,但并不是细胞群中的所有的细胞都能表达荧光蛋白。Invitrogen CellLight 荧光蛋白可以在多种细胞类型中表达,包括各种细胞系、原代细胞、干细胞和神经元等等。

荧光蛋白标记法:用CellLight Nucleus-GFP 荧光蛋白转导的猪原代骨骼肌细胞
CellLight Nucleus-GFP 荧光蛋白转导的猪原代骨骼肌细胞。

细胞形态学和图像分割

  • 可标记细胞核和细胞质
  • 无需洗涤步骤
  • 可选择多种波长颜色
  • 均经过自动成像实验验证

识别细胞边界是高内涵筛选 (HCS) 分析中自动图像采集和分析的关键步骤。图像分割需要将目标对象(如细胞)与背景分离或与分析无关的其他特征区分开。从而能够对细胞环境中的形态变化和目标事件进行定量,如不同细胞器之间的生物标记物迁移。我们可提供一系列 Invitrogen HCS CellMasks 荧光染料可用于各种波长下的全细胞边界划分,并且能够与其他细胞结构和细胞功能探针一起使用。

细胞膜-蓝色
HeLa细胞用Alexa Fluor 488 Click-iT Plus EdU 标记新 DNA 的合成,使用 β-连环蛋白抗体对 β-连环蛋白进行染色,然后用 Alexa Fluor 647 山羊抗小鼠 IgG 二抗染色。使用 HCS CellMask Blue 染料区分细胞边界,并使用 Thermo Scientific CellInsight HCS 仪器采集图像。

细胞追踪/细胞示踪荧光探针选择指南

短时程追踪需要快速标记加载,通常需要在细胞内留存 3-6 代或 72 小时。

特性

 CellTracker 示踪染料
使用方法需要15 分钟至 1 小时细胞标记加载
读值内化后的探针染料可在整个细胞内发出明亮的荧光信号
检测范围可追踪细胞至3-6 代或 72 小时
兼容性固定之后,可结合抗体标记轻松进行多重分析
信噪比3 星
光稳定性3 星
荧光显微镜检测
HCS检测
参考文献已发表文献

选择指南

 CellTracker 染料常用检测通道Ex/Em (nm)规格货号
CellTracker Blue CMAC (7-amino-4-Chloromethylcoumarin)CMACDAPI353/4665 mgC2110
CellTracker Blue CMF2HC (4-chloromethyl-6,8-difluoro-7-hydroxycoumarin)Blue CMF2HCDAPI371/4645 mgC12881
CellTracker Violet BMQC (2,3,6,7-tetrahydro-9- bromomethyl-1H,5H-quinolizino( 9,1-gh)coumarin) Violet BMQCDAPI415/5165 x 0.1 mgC10094
CellTracker Green CMFDA (5-氯甲基荧光素二乙酸酯)Green CMFDAFITC492/517A66434 (50 μg)
A66461 (5 x 50 μg)
C7025 (20 x 50 μg)
CellTracker Orange CMRAOrange CMRATRITC548/57620 x 50 µgC34551
CellTracker CM-DiICM-DiITRITC553/570A66432 (50 μg)
A66459 (5 x 50 μg)
C7000 (20 x 50 μg)
CellTracker Red CMTPXCMTPX罗丹明Rhodamine577/602A66435 (50 μg)
A66462 (5 x 50 μg)
C34552 (20 x 50 μg)
CellTracker Deep RedDeep RedCy5630/650A66433 (50 μg)
A66460 (5 x 50 μg)
C34565 (20 x 50 μg)

 长时程追踪需要更久的光稳定性,通常需要保留 6-10 代;染料标记加载时间在实验方案中不是特别的重要。 

特性

 Qtracker 525 细胞标记试剂盒
使用方法采用靶向多肽进行 1 小时细胞标记加载
读值内化后的探针染料在细胞内可发出明亮的点状荧光信号
检测范围可追踪细胞长达 6-10 代或 5-14 小时
灵活性可对活细胞或固定后的细胞成像
兼容性可结合抗体标记轻松进行多重分析
信噪比5 星
光稳定性5 星
激光激发最好使用 UV到488 nm波长的激光激发(也可采用低于发射波长的任一种波长)
荧光显微镜检测
HCS检测
可体内示踪
参考文献已发表文献

 

选择指南

 
常用检测通道
最大发射波长 (nm)
规格
货号
Qtracker 525 Cell Labeling KitGFP 或 FITC5251 个试剂盒Q25041MP
Qtracker 565 Cell Labeling Kit5651 个试剂盒Q25031MP
Qtracker 585 Cell Labeling KitTRITC-A5851 个试剂盒Q25011MP
Qtracker 605 Cell Labeling Kit6051 个试剂盒Q25001MP
Qtracker 625 Cell Labeling KitTexas Red6251 个试剂盒A10198
Qtracker 655 Cell Labeling Kit6551 个试剂盒Q25021MP
Qtracker 705 Cell Labeling KitCy57051 个试剂盒Q25061MP
Qtracker 800 Cell Labeling KitCy78001 个试剂盒Q25071MP

采用荧光融合蛋白转导法追踪细胞可提供长时程追踪,但由于并非所有细胞都能转导,故可能不支持部分自动化检测技术。

 
使用方法使用荧光融合蛋白转导细胞系,需要过夜孵育
读值可在高达 90% 的细胞内成功表达荧光融合蛋白
检测范围表达的细胞可传代示踪 ≥10 代;追踪时间长达 5 天至 2 周
标记染料
RFP
GFP
GFP
Ex/Em (nm)
555/584
488/510
488/510
稳定性
5 星
多重分析兼容性
5 星
信噪比
5 星
光稳定性
5 星
可靶向的细胞位置
细胞质
荧光显微镜检测
可体内示踪
参考文献
已发表文献
规格
1 mL
1 mL
1 mL
货号
C10603
C10602
B10383
 HCS CellMask RedHCS CellMask Deep Red
读取
染色标记细胞核和细胞质以区分完整单个细胞
常用检测通道
DAPI
FITC
RFP
Texas Red
Cy5
Ex/Em (nm)
346⁄442
493/516
556/572
588⁄612
650⁄665
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
检测平台
HCS
HCS
HCS
HCS
HCS
实验方案高内涵分析
产品规格
250 µg/10 板
250 µg/10 板
250 µg/10 板
250 µg/10 板
250 µg/10 板
货号

短时程追踪需要快速标记加载,通常需要在细胞内留存 3-6 代或 72 小时。

特性

 CellTracker 示踪染料
使用方法需要15 分钟至 1 小时细胞标记加载
读值内化后的探针染料可在整个细胞内发出明亮的荧光信号
检测范围可追踪细胞至3-6 代或 72 小时
兼容性固定之后,可结合抗体标记轻松进行多重分析
信噪比3 星
光稳定性3 星
荧光显微镜检测
HCS检测
参考文献已发表文献

选择指南

 CellTracker 染料常用检测通道Ex/Em (nm)规格货号
CellTracker Blue CMAC (7-amino-4-Chloromethylcoumarin)CMACDAPI353/4665 mgC2110
CellTracker Blue CMF2HC (4-chloromethyl-6,8-difluoro-7-hydroxycoumarin)Blue CMF2HCDAPI371/4645 mgC12881
CellTracker Violet BMQC (2,3,6,7-tetrahydro-9- bromomethyl-1H,5H-quinolizino( 9,1-gh)coumarin) Violet BMQCDAPI415/5165 x 0.1 mgC10094
CellTracker Green CMFDA (5-氯甲基荧光素二乙酸酯)Green CMFDAFITC492/517A66434 (50 μg)
A66461 (5 x 50 μg)
C7025 (20 x 50 μg)
CellTracker Orange CMRAOrange CMRATRITC548/57620 x 50 µgC34551
CellTracker CM-DiICM-DiITRITC553/570A66432 (50 μg)
A66459 (5 x 50 μg)
C7000 (20 x 50 μg)
CellTracker Red CMTPXCMTPX罗丹明Rhodamine577/602A66435 (50 μg)
A66462 (5 x 50 μg)
C34552 (20 x 50 μg)
CellTracker Deep RedDeep RedCy5630/650A66433 (50 μg)
A66460 (5 x 50 μg)
C34565 (20 x 50 μg)

 长时程追踪需要更久的光稳定性,通常需要保留 6-10 代;染料标记加载时间在实验方案中不是特别的重要。 

特性

 Qtracker 525 细胞标记试剂盒
使用方法采用靶向多肽进行 1 小时细胞标记加载
读值内化后的探针染料在细胞内可发出明亮的点状荧光信号
检测范围可追踪细胞长达 6-10 代或 5-14 小时
灵活性可对活细胞或固定后的细胞成像
兼容性可结合抗体标记轻松进行多重分析
信噪比5 星
光稳定性5 星
激光激发最好使用 UV到488 nm波长的激光激发(也可采用低于发射波长的任一种波长)
荧光显微镜检测
HCS检测
可体内示踪
参考文献已发表文献

 

选择指南

 
常用检测通道
最大发射波长 (nm)
规格
货号
Qtracker 525 Cell Labeling KitGFP 或 FITC5251 个试剂盒Q25041MP
Qtracker 565 Cell Labeling Kit5651 个试剂盒Q25031MP
Qtracker 585 Cell Labeling KitTRITC-A5851 个试剂盒Q25011MP
Qtracker 605 Cell Labeling Kit6051 个试剂盒Q25001MP
Qtracker 625 Cell Labeling KitTexas Red6251 个试剂盒A10198
Qtracker 655 Cell Labeling Kit6551 个试剂盒Q25021MP
Qtracker 705 Cell Labeling KitCy57051 个试剂盒Q25061MP
Qtracker 800 Cell Labeling KitCy78001 个试剂盒Q25071MP

采用荧光融合蛋白转导法追踪细胞可提供长时程追踪,但由于并非所有细胞都能转导,故可能不支持部分自动化检测技术。

 
使用方法使用荧光融合蛋白转导细胞系,需要过夜孵育
读值可在高达 90% 的细胞内成功表达荧光融合蛋白
检测范围表达的细胞可传代示踪 ≥10 代;追踪时间长达 5 天至 2 周
标记染料
RFP
GFP
GFP
Ex/Em (nm)
555/584
488/510
488/510
稳定性
5 星
多重分析兼容性
5 星
信噪比
5 星
光稳定性
5 星
可靶向的细胞位置
细胞质
荧光显微镜检测
可体内示踪
参考文献
已发表文献
规格
1 mL
1 mL
1 mL
货号
C10603
C10602
B10383
 HCS CellMask RedHCS CellMask Deep Red
读取
染色标记细胞核和细胞质以区分完整单个细胞
常用检测通道
DAPI
FITC
RFP
Texas Red
Cy5
Ex/Em (nm)
346⁄442
493/516
556/572
588⁄612
650⁄665
Signal-To-Noise Ratio(信噪比)
光稳定性
多重分析兼容性
活细胞
固定细胞
检测平台
HCS
HCS
HCS
HCS
HCS
实验方案高内涵分析
产品规格
250 µg/10 板
250 µg/10 板
250 µg/10 板
250 µg/10 板
250 µg/10 板
货号