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封片剂和抗淬灭试剂 |
封片剂是显微镜成像中必不可少的工具,用于保存和保护样品,同时提高图像清晰度和信号持久度。封片剂分为软性(非固化型)和硬性(固化型),具体取决于封片剂是否含有胶凝剂。软性封片剂含有缓冲甘油溶液,应在需要立即对载玻片进行成像时使用。软性封片剂可以冲洗掉,样品可以重新染色或用于单细胞RNA测序或PCR等下游实验。硬性封片剂含有一种聚合物,可将盖玻片永久固定在载玻片上,用于延长样品的保存时间。
封片剂有多种类型,每种类型都针对特定的应用和成像技术而定制:水性封片剂、非水性(有机)封片剂和抗淬灭封片剂。抗淬灭封片剂在防止光漂白和稳定荧光信号方面非常有效。
为尽量减少实验样品的光漂白,我们开发了一系列抗荧光淬灭封片剂,以提高活细胞和固定细胞样品中荧光染料的光稳定性。我们为抗荧光淬灭封片剂提供了多款选择,有封片后可即时成像的,也有可长期储存的,同时还提供可包含核染料的配方,以将封片和复染一步完成。减少光漂白意味着能够追踪更长久的时间进程实验、获得更高的灵敏度以及对荧光信号实现更好的定量。查看下列封片剂选项,挑选满足您研究和成像需求的理想解决方案。
| ProLong 抗淬灭封片剂 | SlowFade抗淬灭封片剂 | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 常规版 | ProLong Glass | 新品ProLong RapidSet | ProLong Diamond | ProLong Gold | ProLong Live | SlowFade Glass | SlowFade Diamond | SlowFade Gold | ||
| 带复染剂的版本 | ProLong Glass with NucBlue | 无 | ProLong Diamond with DAPI | ProLong Gold with DAPI | 无 | SlowFade with DAPI | SlowFade with DAPI | SlowFade with DAPI | ||
| 样品类型 | 固定细胞/组织 | 活细胞 | 固定细胞/组织 | |||||||
| 是否固化 | 是(硬性) | N/A | 否 (软性) | |||||||
| 固化时间 | 18–60 小时 | 1 小时 | 24 小时s | N/A | N/A | |||||
| 成像类型 | 固定细胞/组织,长时间成像 | 固定细胞/组织,即刻长时间成像 | 固定细胞/组织,长时间成像 | 活细胞成像 | 固定细胞/组织,即刻成像 | |||||
| 样品厚度 | 厚至150 µm | 厚至80 µm | 厚至10 µm | N/A | 厚至500 µm | 厚至15 µm | ||||
| 折射率 | 1.51 (固化24h后) | 1.49 (固化1h后) | 1.47 (固化24h后) | 1.3 | 1.52 | 1.42 | ||||
| 最佳显微镜物镜* | 油镜 | 油镜 | 甘油物镜 | 甘油物镜 水或空气物镜 | 甘油物镜 | |||||
| 兼容荧光基团 | 大多数染料和荧光蛋白 | Alexa Fluor 染料 | 大多数染料和荧光蛋白 | 大多数染料和荧光蛋白 | Alexa Fluor 染料 | |||||
| 形式 | 即用型 | 100x 浓缩液 | 即用型 | |||||||
| 查看所有 ProLong 抗淬灭封片剂 | 查看所有 SlowFade 抗淬灭试剂 | |||||||||
*上表封片剂与所有物镜类型兼容
不可逆的光漂白会造成荧光信号的损失,从而导致灵敏度大大降低,尤其在靶标分子丰度较低、激发光较强或激发持续时间长时,表现得非常显著。此外,光漂白相关机制还与光毒性有关,可对细胞活性和数据质量产生不利影响。抗淬灭封片剂可通过减弱光漂白效应,以获得更持久、更稳定的信号。
步骤 1. 将样品置于载玻片或盖玻片上。所有染色操作可在此步骤之前或之后完成。
步骤 2. 将抗淬灭封片剂涂抹于样品上。对于硬性封片剂,请置于空气中过夜固化。
步骤 3. 仅限使用硬性封片剂:在封好的样品上滴一滴 100% 甘油,然后盖上盖玻片。甘油有助于盖玻片的粘附。ProLong Glass 抗淬灭封片剂在 24 小时后完全固化,最终折射率约为 1.52。
文献
BioProbes 73 期刊文章:ProLong Live 抗淬灭试剂:活细胞成像实验中的光漂白防护
BioProbes 72 期刊文章:适用于固定细胞成像的ProLong Diamond和SlowFade Diamond抗淬灭封片剂
海报
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