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提高低丰度靶标的成像质量
Invitrogen SuperBoost 试剂盒的灵敏度是标准ICC/IHC/ISH方法的10-200倍，可为低丰度靶标的高分辨成像提供优质的信号放大、明确性和清晰度。SuperBoost试剂将Invitrogen Alexa Fluor 染料的亮度与值得信赖的poly-HRP酪胺信号放大技术结合，与标准处理方法（包括TSA试剂）相比，使灵敏度提高2-10倍。当对清晰度有一定要求时，SuperBoost信号放大试剂盒可助您的靶标在背景中脱颖而出。
SuperBoost技术
- 用于低丰度、难检测靶标的高度灵敏的荧光成像检测方法
- 易于使用，生成的信号兼容标准滤镜
- 所得图像分辨率高，与荧光蛋白、DAPI、二抗和其他 SuperBoost 试剂盒兼容
图1. SuperBoost试剂盒具有卓越的灵敏度。使用不同浓度的抗prohibitin抗体（生产商建议按1:150稀释或稀释至终浓度5 µg/mL）孵育HeLa细胞，随后使用下列试剂标记：(1)Invitrogen™ Alexa Fluor 488 Tyramide SuperBoost试剂盒 (山羊抗兔IgG和Alexa Fluor 488 Tyramide)；(2)我们的经典Invitrogen™ TSA试剂盒#12 (山羊抗兔IgG和Alexa Fluor 488 Tyramide)；或(3)Invitrogen™ F(ab′)2兔抗山羊IgG (H+L)二抗。使用Invitrogen™ EVOS™ FL自动成像系统采集各种处理方法生成的细胞图像（采用相同的曝光和增益）。这些图像表明，Alexa Fluor 488 Tyramide SuperBoost试剂盒的灵敏度高于经典TSA试剂盒或直接标记二抗。
多重检测能力
SuperBoost试剂盒可兼容多种其他标志物检测和细胞染色技术，可用于多重检测实验和荧光共定位研究。例如，SuperBoost试剂可搭配：
- 荧光标志物复染，如DAPI
- 荧光蛋白（如：GFP&RFP）
- 标准ICC/IHC
- 其他SuperBoost试剂盒
产品手册中包含详细方案。
与GFP和RFP共用
使用Invitrogen™ CellLight™ Peroxisome-GFP, BacMam 2.0处理HeLa细胞，使细胞的过氧化物酶体表达GFP。使用Invitrogen™ Image-iT™固定/透化试剂盒处理细胞后，孵育prohibitin抗体，并使用Alexa Fluor 594 Tyramide SuperBoost试剂盒(山羊抗鼠IgG和Alexa Fluor 594 tyramide)中的试剂进行标记。使用Invitrogen™ NucBlue™ Fixed Cell ReadyProbes™试剂标记细胞核。最后，在共聚焦显微镜上进行成像。
与标准ICC/IHC共用
使用Image-iT固定/透化试剂对HeLa细胞进行固定和透化处理，并孵育抗tubulin一抗和Alexa Fluor 488山羊抗鼠IgG (H+L)二抗。随后，使用抗ATP合成酶亚基IF1抗体 孵育细胞，并使用Alexa Fluor 594 Tyramide SuperBoost试剂盒(山羊抗鼠IgG和Alexa Fluor 594 tyramide)中的试剂进行标记。使用Invitrogen™NucBlue™ Fixed Cell ReadyProbes™试剂标记细胞核。最后，在共聚焦显微镜上进行成像。
与其他SuperBoost试剂盒共用
使用Image-iT固定/透化试剂对HeLa细胞进行固定和透化处理，孵育抗prohibitin抗体，并使用Alexa Fluor 647 Tyramide SuperBoost试剂盒(山羊抗兔IgG和Alexa Fluor 647 tyramide)中的试剂进行标记。此外，使用抗β-catenin抗体孵育细胞，并使用Alexa Fluor 488 Tyramide SuperBoost试剂盒(山羊抗鼠IgG和Alexa Fluor 488 tyramide)中的试剂进行标记。使用NucBlue Fixed Cell ReadyProbes试剂标记细胞核。最后，在共聚焦显微镜上进行成像。
工作流程简单
可兼容ICC、IHC和FISH
SuperBoost试剂盒适用于标准ICC、IHC和FISH法常用的细胞类型和荧光成像系统。我们使用甲醛固定的2D 和 3D 培养的细胞系、FFPE 组织和冷冻切片组织，测试了 SuperBoost 试剂盒的性能。
免疫细胞化学（ICC）
经固定和透化处理的HeLa细胞，孵育抗ATP合成酶抗体和Alexa Fluor 594结合型二抗。此外，使用抗β-catenin抗体 孵育细胞，并使用Alexa Fluor 488 Tyramide SuperBoost试剂盒(山羊抗鼠IgG和Alexa Fluor 488 tyramide)中的试剂进行标记。使用NucBlue Fixed Cell ReadyProbes试剂标记细胞核。最后，在共聚焦显微镜上进行成像。
免疫组织化学（IHC）
使用抗组蛋白2B抗体孵育福尔马林固定石蜡包埋（FFPE）的大鼠小肠组织。随后，使用Alexa Fluor 594 Tyramide SuperBoost试剂盒（山羊抗兔IgG和Alexa Fluor 594 tyramide）中的试剂检测该抗体。使用 NucBlue Fixed Cell ReadyProbes试剂标记细胞核，并使用ProLong™ Diamond抗淬灭试剂处理样品。使用EVOS FL自动成像系统进行成像和分析。
荧光原位杂交（FISH）
使用标准方法对U2OS细胞进行固定和透化处理。为实现荧光原位杂交（FISH），使用hprt基因探针孵育细胞，并使用Alexa Fluor 488 Tyramide SuperBoost试剂盒(山羊抗鼠IgG和Alexa Fluor 488 tyramide)中的试剂进行检测。使用NucBlue Fixed Cell ReadyProbes试剂标记细胞核。使用EVOS FL自动成像系统进行成像和分析。
工作流程与标准ICC/IHC/FISH相似
SuperBoost试剂盒基于酪胺信号放大，使用辣根过氧化物酶（HRP）的催化活性，生成高密度的靶蛋白或核酸序列原位标记。SuperBoost试剂盒的工作流程与标准ICC、IHC和FISH相似。在该工作流程中，荧光基团结合的二抗被poly-HRP结合的二抗取代。增加的步骤仅有：结合型酪胺孵育2-10分钟，并在检测到特异性信号后加入终止液终止HRP活性。此外，终止液也有助于维持荧光信号的特异性和分辨率。
图2. SuperBoost试剂盒的工作流程。该试剂盒的工作流程与标准ICC/IHC/FISH相似，只需几步即可灵敏检测到目标蛋白。
何时使用酪胺信号放大技术？
我们提供全套的荧光成像检测技术，您可针对靶标丰度从中选择最佳的检测技术，使用最合适的检测波长匹配您的多色标记实验。
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| 酪胺标记（Ex/Em） |
Tyramide SuperBoost试剂盒*
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|---|---|---|---|
抗鼠IgG（宿主：山羊）
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抗兔IgG（宿主：山羊）
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链霉亲和素
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| Alexa Fluor 488 (495/519 nm) | B40912 B40941 （50 个盖玻片） | B40922 B40943 （50 个盖玻片） | B40932 |
| Alexa Fluor 555 (555/565 nm) | B40913 | B40923 | B40933 |
| Alexa Fluor 594 (591/617 nm) | B40915 B40942（50 个盖玻片） | B40925 B40944（50 个盖玻片） | B40935 |
| Alexa Fluor 647 (650/668 nm) | B40916 | B40926 | B40936 |
| 生物素-XX偶联物 | B40911 | B40921 | B40931 |
| *除非另有说明，最多可用于150片18 mm x 18 mm玻片（假设关键孵育步骤使用150 µL）。可根据样品大小调整使用体积。 | |||
资源
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