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Anza 限制性内切酶克隆系统
Invitrogen™ Anza™限制性内切酶克隆系统闪亮登场，其包含一系列限制性内切酶和多种DNA修饰酶，是一个使用统一缓冲液的完整克隆系统——极致简约、完美克隆。
- 所有限制性内切酶均使用一种统一缓冲液
- 所有类型的DNA均使用一种统一酶切方案
- 15分钟内完成酶切
- 即使过夜酶切也不会出现星号活性
Anza 限制性内切酶搜索工具
欢迎使用我们的内切酶搜索工具来查找最适合您研究需求的限制性内切酶。您可以按产品名称、同裂酶名称、识别序列或者货号进行搜索。
演绎酶切华丽乐章
Anza限制性内切酶克隆完整系统由以下部分组成：
128种限制性内切酶
5种DNA修饰酶
- T4 DNA 连接酶预混液
- 热敏碱性磷酸酶
- T4多聚核苷酸激酶试剂盒
- DNA平端化试剂盒
- DNA末端修复试剂盒
所有的Anza限制性内切酶可以同时进行酶切，并且只需一种统一Anza缓冲液便能充分发挥出全部功能。
简单易用的 Anza 限制性内切酶
Anza限制性内切酶只需简易的两步方案即可使用，不管内切酶有几种，不管所使用的是哪种DNA类型——只需配置反应混合液，然后在37°C孵化15分钟。
简单的酶切方案
- 按照表1所示依序添加试剂来配置反应混合液。
- 在37°C孵化15分钟。
表1：
| 试剂 | 单酶切 | 双酶切 | 三重酶切 |
|---|---|---|---|
| 不含核酸酶的水 | 根据最终反应体积加入所需的量 | ||
| Anza™ 10X缓冲液或者Anza™ 10X 红色缓冲液 | 2 µL | 2 µL | 3 µL |
| DNA | 0.2–1 µg | 0.2–1 µg | 0.2–1 µg |
| Anza™限制内切酶1 | 1 µL | 1 µL | 1 µL |
| Anza™限制内切酶2 | — | 1 µL | 1 µL |
| Anza™限制内切酶3 | — | — | 1 µL |
| 最终反应体积 | 20 µL | 20 µL | 30 µL |
体积可按比例放大至5倍。
方便的缓冲液配方
所有 Anza 限制性内切酶均提供 Anza™ 10X 透明缓冲液和 Anza™ 10X 红色缓冲液，可以根据您的实验需求灵活选择。红色缓冲液包括一种密度试剂，其含有红色或黄色示踪染料，在 1% 琼脂糖凝胶上两种染料分别与 800 bp DNA 片段和 10 bp DNA 片段一同迁移。这省去了凝胶上样前繁琐的染料添加步骤，且与下游的各种实验应用兼容。*
*对于需要通过荧光激发来分析的实验应用，我们推荐使用 Anza 10X 缓冲液，因为 Anza 10X 红色缓冲液中的黄色染料可能会影响一些荧光的检测。
Anza DNA 修饰酶
特点
Anza™ 限制性内切酶仅需 15 分钟即可酶切完全，且一个统一酶切方案适用于所有 DNA 类型。
在 15 分钟内完成质粒 DNA 和 PCR 产物的酶切
性能卓越
质粒DNA预期酶切DNA片段：
Anza 11 EcoRI, Anza 12 XbaI, Anza 1 NotI - 6,215 bp
纯化后的PCR产物预期酶切DNA 片段：
Anza 11 EcoRI - 1,133 & 506 bp
Anza 12 XbaI - 1,077 & 562 bp
Anza 1 NotI - 1,258 & 381 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图1. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 11 EcoRI、Anza 12 XbaI和Anza 1 NotI对质粒DNA(6,215 bp)和纯化的PCR产物(1.6 kb)进行酶切。按照推荐的方案配置反应混合液，在20µL最终体积内含有1 µg DNA和1 µL的限制性内切酶。在37°C孵化15分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C1 – 未酶切的质粒DNA
- 1 – Anza™ 11 EcoRI
- 2 – Anza™ 12 XbaI
- 3 – Anza™ 1 NotI
- C2 – 未酶切的PCR片段
- 4 – Anza™ 11 EcoRI
- 5 – Anza™ 12 XbaI
- 6 – Anza™ 1 NotI
质粒 DNA 的酶切
图2. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 3 BcuI和 Anza 47 Eco521对质粒DNA(6,215bp)进行酶切，同时使用竞争对手N 的SpeI-HF（BcuI的同裂酶）和EagI-HF（Eco52I的同裂酶）。按照推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL Anza限制内切酶，总反应体积为20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL竞争对手N的限制性内切酶，总体积50 µL。按照推荐的实验方案，Anza限制性内切酶和竞争对手N 的EagI –HF都在37°C条件下孵化15分钟。按照竞争对手N的推荐方案， SpeI-HF在37°C条件下孵化5分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C – 未酶切的质粒DNA
- 1 – Anza™ 3 BcuI
- 2 – SpeI-HF (Competitor N)
- 3 – Anza™ 47 Eco52I
- 4 – EagI-HF (Competitor N)
PCR 产物 DNA 的酶切
预期的DNA片段
Anza 3 BcuI - 938, 346, 322, & 33 bp
Anza 9 NdeI - 1,486 & 153 bp
Anza 47 Eco52I - 899, 381, 197, & 162 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图3. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 3 BcuI、Anza 9 NdeI和Anza 47 Eco521对纯化的PCR产物(6,215bp)进行酶切，同时使用竞争对手N的SpeI-HF（BcuI的同裂酶）、NdeI和EagI-HF（Eco52I的同裂酶）。按照推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µLAnza™限制内切酶，总反应体积20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL 竞争对手N的限制性内切酶，总体积50 µL。37°C条件下孵化15分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C – 未酶切的DNA
- 1 – Anza 3 BcuI
- 2 – SpeI-HF (Competitor N)
- 3 – Anza 9 NdeI
- 4 – NdeI (Competitor N)
- 5 – Anza 47 Eco52I
- 6 – EagI-HF (Competitor N)
一些限制性内切酶可能出现星号活性，或者表现出限制酶与DNA识别位点的识别特异性降低。当反应条件不是最佳，如甘油浓度过高或Mg2+存在时，可能出现星号活性，其可导致DNA的非特异性剪切。Anza限制性内切酶经优化具有灵活的酶切时间-从15分钟到过夜酶切均可进行完全酶切-无需担心星号活性。
将质粒DNA和PCR产物酶切16小时
质粒DNA预期酶切片段
Anza 11 EcoRI, Anza 12 XbaI, Anza 1 NotI - 6,215 bp
纯化的PCR产物预期酶切片段
Anza 11 EcoRI - 1,133 & 506 bp
Anza 12 XbaI - 1,077 & 562 bp
Anza 1 NotI - 1,258 & 381 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图4.使用 Anza限制性内切酶即使过夜酶切后也无星号活性。 使用Anza 11 EcoRI、Anza 12 XbaI和Anza 1 NotI对质粒DNA (6,215 bp)和纯化的PCR产物(1.6 kb)进行酶切。反应混合物中包括1 酶切。反应混和1 酶切限制性内切酶，总体积为20 μL，按照推荐的实验方案进行酶切。在37照推孵育16小时。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C1 – 未酶切质粒 DNA
- 1 – Anza™ 11 EcoRI
- 2 – Anza™ 12 XbaI
- 3 – Anza™ 1 NotI
- C2 – 未酶切PCR片段
- 4 – Anza™ 11 EcoRI
- 5 – Anza™ 12 XbaI
- 6 – Anza™ 1 NotI
使用Anza统一缓冲液，Anza限制性内切酶可在同一反应中进行完全的多重酶切。无需再费力查找与您所使用的酶兼容的缓冲液，同时只需一种酶切实验方案即可完成所有酶切反应，从而节省了时间。
双酶切
预期酶切DNA片段
Anza 47 Eco52I - 4,575, 1,191, & 449 bp
Anza 14 SalI - 4,030 & 2,185 bp
Anza™ 47 Eco52I + Anza™ 14 SalI - 2,185, 1,319, 1,191, 1,071, & 449 bp
限制性内切酶酶切位点图谱
图5. 使用 Anza限制性内切酶在统一缓冲液中进行完全的酶切反应。 使用Anza 47 Eco52I和 Anza 14 SalI对质粒DNA(6,215bp)进行酶切，同时使用竞争对手N 的EagI-HF（Eco52I的同裂酶）和SalI-HF。按照推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL 每种Anza限制内切酶，总反应体积为20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和每种1 µL竞争对手N的限制性内切酶，总体积50 µL。在37°C条件下孵化15分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C – 未酶切质粒 DNA
- 1 – Anza™ 47 Eco52I
- 2 – Anza™ 14 SalI
- 3 – Anza™ 47 Eco52I + Anza™ 14 SalI
- 4 – EagI-HF (Competitor N)
- 5 – SalI-HF (Competitor N)
- 6 – EagI-HF + SalI-HF (Competitor N)
三重酶切
预期DNA酶切片段
Anza 1 NotI - 6,215 bp
Anza 16 HindIII - 6,215 bp
Anza 15 XmaJI - 6,215 bp
Anza 1 NotI + Anza 16 HindIII + Anza 15 XmaJI - 4,285, 1,075, & 855 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图6. Anza限制性内切酶可在统一缓冲液中实现三种酶的完全酶切。 使用Anza 1 NotI、Anza 16 HindIII和Anza 15 XmaJI对质粒DNA (6215 bp)进行酶切。单酶切反应的反应混合物包括1 酶切。单酶切和1 酶切限制性内切酶，总体积为20 内切。三重酶切反应混合物中包括1 重酶切反应混和各种限制性内切酶各1 种限，总体积为30 积为，按照推荐的实验方案进行酶切。37照推孵育15分钟。
- C – 未酶切质粒 DNA
- 1 – Anza™ 1 NotI
- 2 – Anza™ 16 HindIII
- 3 – Anza™ 15 XmaJI
- 4 – Anza™ 1 NotI + Anza™ 16 HindIII + Anza™ 15 XmaJI
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
Anza™ 限制性内切酶仅需 15 分钟即可酶切完全，且一个统一酶切方案适用于所有 DNA 类型。
在 15 分钟内完成质粒 DNA 和 PCR 产物的酶切
性能卓越
质粒DNA预期酶切DNA片段：
Anza 11 EcoRI, Anza 12 XbaI, Anza 1 NotI - 6,215 bp
纯化后的PCR产物预期酶切DNA 片段：
Anza 11 EcoRI - 1,133 & 506 bp
Anza 12 XbaI - 1,077 & 562 bp
Anza 1 NotI - 1,258 & 381 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图1. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 11 EcoRI、Anza 12 XbaI和Anza 1 NotI对质粒DNA(6,215 bp)和纯化的PCR产物(1.6 kb)进行酶切。按照推荐的方案配置反应混合液，在20µL最终体积内含有1 µg DNA和1 µL的限制性内切酶。在37°C孵化15分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C1 – 未酶切的质粒DNA
- 1 – Anza™ 11 EcoRI
- 2 – Anza™ 12 XbaI
- 3 – Anza™ 1 NotI
- C2 – 未酶切的PCR片段
- 4 – Anza™ 11 EcoRI
- 5 – Anza™ 12 XbaI
- 6 – Anza™ 1 NotI
质粒 DNA 的酶切
图2. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 3 BcuI和 Anza 47 Eco521对质粒DNA(6,215bp)进行酶切，同时使用竞争对手N 的SpeI-HF（BcuI的同裂酶）和EagI-HF（Eco52I的同裂酶）。按照推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL Anza限制内切酶，总反应体积为20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL竞争对手N的限制性内切酶，总体积50 µL。按照推荐的实验方案，Anza限制性内切酶和竞争对手N 的EagI –HF都在37°C条件下孵化15分钟。按照竞争对手N的推荐方案， SpeI-HF在37°C条件下孵化5分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C – 未酶切的质粒DNA
- 1 – Anza™ 3 BcuI
- 2 – SpeI-HF (Competitor N)
- 3 – Anza™ 47 Eco52I
- 4 – EagI-HF (Competitor N)
PCR 产物 DNA 的酶切
预期的DNA片段
Anza 3 BcuI - 938, 346, 322, & 33 bp
Anza 9 NdeI - 1,486 & 153 bp
Anza 47 Eco52I - 899, 381, 197, & 162 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图3. Anza限制性内切酶在15分钟内完成酶切反应。 使用Anza 3 BcuI、Anza 9 NdeI和Anza 47 Eco521对纯化的PCR产物(6,215bp)进行酶切，同时使用竞争对手N的SpeI-HF（BcuI的同裂酶）、NdeI和EagI-HF（Eco52I的同裂酶）。按照推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µLAnza™限制内切酶，总反应体积20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL 竞争对手N的限制性内切酶，总体积50 µL。37°C条件下孵化15分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C – 未酶切的DNA
- 1 – Anza 3 BcuI
- 2 – SpeI-HF (Competitor N)
- 3 – Anza 9 NdeI
- 4 – NdeI (Competitor N)
- 5 – Anza 47 Eco52I
- 6 – EagI-HF (Competitor N)
一些限制性内切酶可能出现星号活性，或者表现出限制酶与DNA识别位点的识别特异性降低。当反应条件不是最佳，如甘油浓度过高或Mg2+存在时，可能出现星号活性，其可导致DNA的非特异性剪切。Anza限制性内切酶经优化具有灵活的酶切时间-从15分钟到过夜酶切均可进行完全酶切-无需担心星号活性。
将质粒DNA和PCR产物酶切16小时
质粒DNA预期酶切片段
Anza 11 EcoRI, Anza 12 XbaI, Anza 1 NotI - 6,215 bp
纯化的PCR产物预期酶切片段
Anza 11 EcoRI - 1,133 & 506 bp
Anza 12 XbaI - 1,077 & 562 bp
Anza 1 NotI - 1,258 & 381 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图4.使用 Anza限制性内切酶即使过夜酶切后也无星号活性。 使用Anza 11 EcoRI、Anza 12 XbaI和Anza 1 NotI对质粒DNA (6,215 bp)和纯化的PCR产物(1.6 kb)进行酶切。反应混合物中包括1 酶切。反应混和1 酶切限制性内切酶，总体积为20 μL，按照推荐的实验方案进行酶切。在37照推孵育16小时。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C1 – 未酶切质粒 DNA
- 1 – Anza™ 11 EcoRI
- 2 – Anza™ 12 XbaI
- 3 – Anza™ 1 NotI
- C2 – 未酶切PCR片段
- 4 – Anza™ 11 EcoRI
- 5 – Anza™ 12 XbaI
- 6 – Anza™ 1 NotI
使用Anza统一缓冲液，Anza限制性内切酶可在同一反应中进行完全的多重酶切。无需再费力查找与您所使用的酶兼容的缓冲液，同时只需一种酶切实验方案即可完成所有酶切反应，从而节省了时间。
双酶切
预期酶切DNA片段
Anza 47 Eco52I - 4,575, 1,191, & 449 bp
Anza 14 SalI - 4,030 & 2,185 bp
Anza™ 47 Eco52I + Anza™ 14 SalI - 2,185, 1,319, 1,191, 1,071, & 449 bp
限制性内切酶酶切位点图谱
图5. 使用 Anza限制性内切酶在统一缓冲液中进行完全的酶切反应。 使用Anza 47 Eco52I和 Anza 14 SalI对质粒DNA(6,215bp)进行酶切，同时使用竞争对手N 的EagI-HF（Eco52I的同裂酶）和SalI-HF。按照推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和1 µL 每种Anza限制内切酶，总反应体积为20µL。按照竞争对手N推荐的实验方案，反应混合物包括1 µg DNA 和每种1 µL竞争对手N的限制性内切酶，总体积50 µL。在37°C条件下孵化15分钟。
- L - 1 Kb Plus DNA Ladder
- C – 未酶切质粒 DNA
- 1 – Anza™ 47 Eco52I
- 2 – Anza™ 14 SalI
- 3 – Anza™ 47 Eco52I + Anza™ 14 SalI
- 4 – EagI-HF (Competitor N)
- 5 – SalI-HF (Competitor N)
- 6 – EagI-HF + SalI-HF (Competitor N)
三重酶切
预期DNA酶切片段
Anza 1 NotI - 6,215 bp
Anza 16 HindIII - 6,215 bp
Anza 15 XmaJI - 6,215 bp
Anza 1 NotI + Anza 16 HindIII + Anza 15 XmaJI - 4,285, 1,075, & 855 bp
限制性内切酶切割位点图谱
图6. Anza限制性内切酶可在统一缓冲液中实现三种酶的完全酶切。 使用Anza 1 NotI、Anza 16 HindIII和Anza 15 XmaJI对质粒DNA (6215 bp)进行酶切。单酶切反应的反应混合物包括1 酶切。单酶切和1 酶切限制性内切酶，总体积为20 内切。三重酶切反应混合物中包括1 重酶切反应混和各种限制性内切酶各1 种限，总体积为30 积为，按照推荐的实验方案进行酶切。37照推孵育15分钟。
- C – 未酶切质粒 DNA
- 1 – Anza™ 1 NotI
- 2 – Anza™ 16 HindIII
- 3 – Anza™ 15 XmaJI
- 4 – Anza™ 1 NotI + Anza™ 16 HindIII + Anza™ 15 XmaJI
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