血浆蛋白结合平衡透析 | Thermo Fisher Scientific

平衡透析是测定化合物 - 血浆蛋白结合的常用技术。Thermo Scientific 快速平衡透析 (RED) 装置被视为是进行此分析的金标准装置，因为它可以更短的时间进行制备和透析，并提供准确一致的数据。

由于只有化合物的未结合 (游离) 组分可引起所需的响应/反应，其与血浆蛋白的结合对其药代动力学和药效学有显著影响。因此，未结合组分是与其他实验室分析方法一起使用时进行优化化合物有效性的关键参数。

Thermo Scientific RED 装置采用新设计，由 Teflon 或一次性聚丙烯底板和一次性透析插管组成。这些插件具有圆柱形透析膜，可分为两个隔室，均可插至底板中。

RED 装置使用尺寸明确的透析膜来定量平衡状态下不与血浆蛋白结合的活性药物分子。此装置经验证可用于血浆结合试验，生成的结果与文献中报告的结果一致。

RED 装置具有以下优点：

RED 装置的工作原理为何？

图 1.RED 装置的作用机制。RED 装置使用平衡透析评估化合物 - 蛋白结合量。此装置的插件腔室用半透膜分离，填充样品时，可将游离化合物组分与与血浆蛋白结合的化合物组分分离。

RED 装置易于使用 - 只需将加标样品和缓冲液加载到其各自的腔室中即可。将内容物在振荡器上孵育长达 4 小时，然后转移样品用于终点测定实验。

装置	达到平衡的时间	泄漏	一次性	劳动强度	自动化访问	转移体积
多重平衡透析器 (Dianorm, Harvard, Spectrum)	3–4小时	一些	否	++++	否	最低限度
96孔平衡透析器†† （哈佛仪器）	16 小时	一些	是	+++	可能	是
96孔微平衡透析 (HTDialysis, LLC)	6 小时	一些	否	+++	可能	是
RED 装置 (赛默飞世尔科技)	4–6小时（2小时）	无	是	+	是	无

使用 Thermo RED 装置 100 分钟方案对七种化合物的血浆蛋白结合结果与使用文献中的经典设备获得的结果相当。 使用 750 pm 和 37°C 的涡流搅拌的时间过程研究来确定平衡时的游离分数。

大鼠体内紫杉醇的体外和体内组织/血浆结合比的比较。体内脑组织中紫杉醇含量低表明血脑屏障抑制紫杉醇向大脑的运动。

装置	达到平衡的时间	泄漏	一次性	劳动强度	自动化访问	转移体积
多重平衡透析器 (Dianorm, Harvard, Spectrum)	3–4小时	一些	否	++++	否	最低限度
96孔平衡透析器†† （哈佛仪器）	16 小时	一些	是	+++	可能	是
96孔微平衡透析 (HTDialysis, LLC)	6 小时	一些	否	+++	可能	是
RED 装置 (赛默飞世尔科技)	4–6小时（2小时）	无	是	+	是	无

大鼠体内紫杉醇的体外和体内组织/血浆结合比的比较。体内脑组织中紫杉醇含量低表明血脑屏障抑制紫杉醇向大脑的运动。

筛查吸附，处理，代谢和消除 (ADME) 包括了在检测化合物时血浆蛋白结合的测量。了解与血浆蛋白的结合量可为药代动力学分布提供了指导。结合的化合物可能会影响功效，这归因于靶结合的游离化合物量以及组织分布。RED 装置以其半自动即用型的设计和快速净化放射性物质来加速临床前过程的血浆蛋白结合测试。