使用粉末和浓缩液制备培养基

1. 向尽可能接近最终体积的混合容器中加入 950 mL 蒸馏水。
2. 将干粉培养基加入室温（15°C 至 30°C）水中并轻轻搅拌。
3. 冲洗包装内侧，以清除所有残留粉末。
4. 完全溶解后，用 1 N HCl 将 pH 值调节至4.1至4.2。
5. 将 95 mL 液体分装到 100 mL 瓶中。请勿盖紧。
6. 在慢排气循环中，于 121°C 下对培养基高压灭菌至少15分钟。但是，由于设备多变，我们建议您对高压灭菌循环进行认证。
7. 将培养基冷却至室温。
8. 在无菌条件下向每个瓶中加入 3 mL 的 7.5% NaHCO₃ 溶液。混匀。
9. 如有需要，在无菌条件下添加 L-谷氨酰胺和抗生素溶液、血清或其他添加剂。混匀。
10. 如有必要，通过在无菌条件下缓慢添加 1 N NaOH 或 1 N HCl 并搅拌，将培养基的最终 pH 值调节至 7.2-7.4。 

程序 B：制备 Leibovitz L-15 干粉培养基（1X；货号 41300*）

1. 向尽可能接近最终体积的混合容器中加入 950 mL 蒸馏水。
2. 将干粉培养基加入室温（15°C 至 30°C）水中并轻轻搅拌。请勿将水加热。
3. 冲洗包装内侧，以清除所有残留粉末。
4. 通过缓慢添加 1 N NaOH 或 1 N HCl 并搅拌，将 pH 值调节至7.6。
5. 使用蒸馏水调节最终体积。
6. 立即使用正压系统，通过 0.2 μm 过滤器的膜过滤功能将培养基处理到无菌容器中。 

程序 C：制备 Iscove 改良杜氏干粉培养基（1X；货号42200*、12200*）

1. 向尽可能接近最终体积的混合容器中加入 950 mL 蒸馏水。
2. 将干粉培养基加入室温（15°C 至 30°C）水中并轻轻搅拌。请勿将水加热。
3. 冲洗包装内侧，以清除所有残留粉末。
4. 加入 3.024 g 碳酸氢钠/L 培养基。
5. 使用蒸馏水调节最终体积，搅拌直至溶解。
6. 不要调节 pH 值。容器保持密闭，直至培养基过滤完成。
7. 立即使用正压系统，通过 0.2 μm 过滤器的膜过滤功能将培养基处理到无菌容器中。

程序 D：制备干粉培养基

1. 向尽可能接近最终体积的混合容器中加入 950 mL 蒸馏水。
2. 将干粉培养基加入室温（15°C 至 30°C）水中并轻轻搅拌。请勿将水加热。
3. 冲洗包装内侧，以清除所有残留粉末。
4. 向培养基中加入碳酸氢钠（用量见表1、2）。
5. 通过缓慢加入并搅拌 1 N NaOH 或
6. 1 N HCl，将 pH 值调节到所需最终工作 pH 以下0.2到0.3个单位。过滤后 pH 值可能升高0.1至0.3个单位。
7. 使用蒸馏水调节最终体积。
8. 立即使用正压系统，通过 0.2 μm 过滤器的膜过滤功能将培养基处理到无菌容器中。

表1：干粉培养基制备（程序 D）