HEK293和HEK293T细胞的形态

HEK293 在蛋白表达中的应用

该 HEK293 细胞系是从原代胚胎人肾建立的永久细胞系，该细胞系用剪切的人腺病毒 5 型 DNA 转化。该细胞系中表达的腺病毒基因使细胞能够产生非常高水平的重组蛋白。我们提供HEK293T在内的多种 HEK293 细胞系变体，包括适用于在无血清培养基中高密度悬浮培养的变体。

HEK293和HEK293T细胞的形态

HEK293细胞的形态

下面的相差图像显示了贴壁培养的健康 HEK293 细胞在 80% 融合时的形态（图 1 ）和悬浮培养（图 2 ）。请注意，贴壁哺乳动物培养物应在对数生长期达到融合之前进行传代。

 

图 1.静态培养中健康悬浮适应型 HEK293 细胞的相差图像。细胞接种密度为 5 × 10 4活细胞/cm 2 293 SFM II 培养基中，并在 37℃ 含 5% CO 加湿空气的培养箱中以独立培养物的形式生长2 。在铺板后 4 天，使用 10X 和 20X 物镜获得图像（分别为小图 A 和 B）。

图 2.在悬浮液中生长的健康 HEK293F 细胞的相差图像。在摇瓶中开始培养，接种密度为 2 × 10 5 293 SFM II 培养基中的活细胞/mL，并在 37°C 培养箱和 5% CO 加湿环境下生长2 。接种后 4 天，将细胞按 1:3 稀释，使用 10X 和 20X 物镜获得图像（分别为图 A 和图 B）。

HEK293T细胞的形态

HEK293T 细胞是一种常用的人胚肾上皮细胞系，其来源于 HEK293 细胞，通过转入 SV40 大 T 抗原基因而构建。该细胞系具有易培养、转染效率高的特点，广泛应用于基因表达研究、重组蛋白生产、病毒包装（如慢病毒、腺病毒）等生物医学领域，因能稳定表达 SV40 大 T 抗原，可促进含 SV40 复制起点的质粒高效复制，从而提高外源基因的表达水平。

 

HEK293T 细胞在形态上属于上皮样细胞，在贴壁培养时呈现出多角形或不规则的多边形，细胞边界清晰，胞质丰富且透明，细胞核较大且呈圆形或椭圆形，常位于细胞中央。在生长状态良好时，细胞排列紧密，呈现出典型的 “铺路石” 样单层生长，边缘较为整齐；当细胞密度过高或生长状态不佳时，可能会出现形态拉伸、轮廓模糊或部分细胞脱落悬浮的情况。

 

资源和支持

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HEK293常见问题解答

HEK293 和 HEK293T 有什么区别？

HEK293T 是 HEK293 的一个衍生株，通过稳定表达SV40大T抗原（Simian Virus 40 Large T Antigen）而获得。这一修饰使得含有SV40复制起点的质粒在HEK293T细胞中能够高效复制，从而提高外源基因的表达水平。因此，HEK293T 常用于病毒包装（如慢病毒、逆转录病毒）和高水平蛋白表达。相比之下，普通HEK293细胞不表达SV40大T抗原，转染效率略低，但仍适用于一般基因表达实验。

 

 

HEK293 细胞可以用于CRISPR基因编辑吗？

可以，HEK293 细胞因其高转染效率和稳定生长特性，是CRISPR-Cas9基因编辑的常用模型。实验时需设计特异性sgRNA，并通过质粒、病毒或RNP（核糖核蛋白复合物）递送Cas9蛋白。编辑后可通过测序、T7E1酶切或流式细胞术验证敲除效率。此外，HEK293 细胞也适用于碱基编辑（Base Editing）和Prime Editing等新型基因编辑技术。由于该细胞系为近二倍体，相比多倍体细胞更易于获得纯合突变株。