Thermo Scientific Pierce 磁性 HA 标签 IP/Co-IP 试剂盒含有进行 HA 融合蛋白免疫沉淀测定或 HA 标签诱饵蛋白 co-IP 实验所需的特异性免疫亲和磁珠和试剂。

HA 标签磁性 IP/Co-IP 试剂盒的特点：

•特异性磁珠—共价固定化高质量抗 HA 单克隆抗体可实现免疫沉淀产物的高得率
•低非特异性结合— 稳定、预封闭的微珠和特异性抗体可尽可能减少脱靶结合
•可靠洗脱—低 pH 值洗脱缓冲液可确保 HA 标签蛋白相互作用复合物的回收，无抗体浸出污染
•便利快速—全套试剂盒和易于遵循的说明提供了优化方案，可在约 1 小时内进行 IP 或 Co-IP 实验
•通用—磁珠与手动和自动磁性分离工作流程（如 Thermo Scientific KingFisher 仪器）兼容

与基于蛋白 A/G 微珠捕获的传统 IP 程序不同，该试剂盒使用含有预固定化抗 HA 抗体的磁珠。这些 Pierce 抗 HA 磁珠可确保与生物样品中的 HA 标签蛋白复合物发生特异性结合。因为抗体共价连接到微珠上，可以轻松地对 IP 靶标进行洗脱和回收，无抗体污染。全套 IP 试剂盒包括磁珠、裂解/洗涤缓冲液、低 pH 值洗脱缓冲液、中和缓冲液、HA 标签阳性对照裂解物和用于 SDS-PAGE 的非还原样品缓冲液。提供手动和自动磁性分离工作流程的方案。提供足以进行 40 次 IP 或 co-IP 检测的组分。

源于人流感病毒 HA 蛋白的血凝素 (HA) 肽 (YPYDVPDYA) 是几种用于重组蛋白表达的融合蛋白标签之一。Pierce 磁性 HA 标签 IP/Co-IP 试剂盒使用特异性高亲和力固定化抗体（克隆 2-2.2.14）从细菌和哺乳动物细胞裂解物以及使用 Pierce 人体外翻译试剂盒制备的裂解物中快速纯化 HA 标签融合蛋白。将微珠与含有 HA 标签蛋白的细胞裂解物一起孵育，捕获融合蛋白，随后对微珠进行洗涤，然后使用低 pH 值洗脱缓冲液或非还原样品缓冲液进行洗脱。方案和缓冲液均经优化处理，提高 IP 和 co-IP 反应效率，可在洗脱样品中富集特定的蛋白相互作用复合体。抗 HA 抗体可用于通过 Western 印迹分析检测 HA 标签蛋白。

有关该试剂盒中所用磁珠结合容量和其他特性的信息，请参见 Pierce 抗 HA 磁珠（产品编号 88836）。

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