采用 Gateway™ 技术的 PCR 克隆系统（含 pDONR™221 & OmniMAX™2 感受态细胞）
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引用和文献 (2)
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采用 Gateway™ 技术的 PCR 克隆系统（含 pDONR™221 & OmniMAX™2 感受态细胞）

Gateway™ 技术可实现一个或多个基因向几乎任何蛋白表达系统的快速克隆。一旦您拥有入门克隆，您就可以将感兴趣的基因重组成适用于 Gateway™ 技术的多种表达载体。采用 Gateway™ 技术的 PCR 克隆系统设计使用了解更多信息
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Gateway™ 技术可实现一个或多个基因向几乎任何蛋白表达系统的快速克隆。一旦您拥有入门克隆，您就可以将感兴趣的基因重组成适用于 Gateway™ 技术的多种表达载体。采用 Gateway™ 技术的 PCR 克隆系统设计使用 attB 改良定制引物完成 PCR 后的入门克隆构建（图 1）。PCR 产物以通常 >99% 的效率定向克隆。采用 Gateway™ 技术的 PCR 克隆系统提供：

•快速、高效、定向克隆 PCR 产物
• 适用于任何扩增酶多功能性
• 无需限制性核酸内切酶或连接酶即可进行克隆
• 使用卡那霉素或 Zeocin 选择入门克隆™

此外，pDONR™221 和 pDONR™/Zeo 载体具有较高质粒得率的 pUC 起始点，并提供了通用 M13 测序位点以方便使用
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
克隆方法Gateway™
反应次数20 reactions
产品线One Shot
产品类型PCR 克隆系统
数量20 Reactions
载体pDONR
Unit SizeEach
内容与储存
采用 Gateway™ 技术的 PCR 克隆试剂盒包括 Gateway™ BP Clonase™ II 酶混合物和试剂、Gateway™ pDONR™221 或 pDONR™/Zeo 载体、M13 测序引物、PEG/Mg2+ 溶液、蛋白酶 K、pEXP7-tet 阳性对照品和 One Shot™ OmniMAX™2 感受态细胞。感受态细胞和酶混合物在 -80°C 下储存。将所有其他组分储存在 -20°C 下。

常见问题解答 (FAQ)

可以使用BP Clonase酶和LR Clonase酶替代BP Clonase II 酶LR Clonase II酶进行BP/LR Clonase反应的一步法实验方案吗？

在BP/LR Clonase反应的一步法实验方案中，不建议用BP Clonase酶和LR Clonase酶替代BP Clonase II 酶/LR Clonase II酶，因为这样的重组效率非常低。

有推荐的一步式BP/LR重组实验方案吗？

有的，我们能提供针对BP/LR Clonase反应的一步式实验方案DNA可以在一步反应后被克隆到目的载体中，从而节省了您的时间和金钱。

如果丢失了入门克隆，如何将目的基因从一个Gateway兼容的表达克隆转移到一个新的目的载体？

建议使用一个供体载体进行一次BP反应以获得一个入门克隆。然后将这一入门克隆和目的载体进行一次LR反应以获得新的表达克隆。

我可以单独购买5X LR Clonase缓冲液或5X BP Clonase缓冲液吗？

5X LR Clonase缓冲液或5X BP Clonase缓冲液不作为单独产品出售。它们作为酶试剂盒的一部分进行销售。

是否提供用于在植物内表达的Gateway载体吗？

我们不提供任何用于在植物内表达的Gateway载体。

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引用和文献 (2)

引用和文献
Abstract
Participation of an Endomembrane Cation/H+ Exchanger AtCHX20 in Osmoregulation of Guard Cells.
Authors:Padmanaban S, Chanroj S, Kwak JM, Li X, Ward JM, Sze H,
Journal:Plant Physiol
PubMed ID:17337534
'Guard cell movement is induced by environmental and hormonal signals that cause changes in turgor through changes in uptake or release of solutes and water. Several transporters mediating these fluxes at the plasma membrane have been characterized, however less is known about transport at endomembranes. CHX20, a member of a ... More
Cytosolic Hydroxymethyldihydropterin Pyrophosphokinase/Dihydropteroate Synthase from Arabidopsis thaliana: A SPECIFIC ROLE IN EARLY DEVELOPMENT AND STRESS RESPONSE.
Authors:Storozhenko S, Navarrete O, Ravanel S, De Brouwer V, Chaerle P, Zhang GF, Bastien O, Lambert W, Rébeillé F, Van Der Straeten D,
Journal:J Biol Chem
PubMed ID:17289662
In plants, 6-hydroxymethyl-7,8-dihydropterin pyrophosphokinase/7,8-dihydropteroate synthase (mitHPPK/DHPS) is a bifunctional mitochondrial enzyme, which catalyzes the first two consecutive steps of tetrahydrofolate biosynthesis. Mining the Arabidopsis genome data base has revealed a second gene encoding a protein that lacks a potential transit peptide, suggesting a cytosolic localization of the isoenzyme (cytHPPK/DHPS). When ... More