L-光反应-甲硫氨酸

Thermo Scientific Pierce L-光反应-蛋氨酸是 L-蛋氨酸的类似物，可在合成过程中掺入蛋白，然后光活化即可与细胞中的相互作用蛋白共价交联。

L-光反应-蛋氨酸的特点：

•体内标记—利用活细胞的正常细胞机制将光反应性基团掺入蛋白
•体内交联—发现自然细胞环境中的相互作用蛋白
•特异性提高—将相互作用蛋白质间的交联正确定位于它们蛋白质相互作用结构域的界面
•高效回收—交联后细胞裂解物中的蛋白回收率达到 90%
•兼容—可交联在多种细胞系（包括 HeLa、293T、COS7、U2OS、A549、A431、HepG2、NIH 3T3 和 C6）中表达的蛋白
•易于使用—试剂在正常实验室光照下具有光稳定性，无需在暗处工作

Thermo Scientific L-光反应-蛋氨酸是 L-蛋氨酸的类似物，可在合成过程中内源性掺入蛋白的一级序列，然后紫外光 (UV) 活化即可与细胞自然环境中蛋白-蛋白相互作用结构域内的蛋白共价交联。该有力的方法能够在研究和表征的细胞中进行稳定和瞬时蛋白相互作用，无需在相互作用实验中使用完全外源的化学交联剂和相关试剂溶剂，这些试剂可能对所研究的细胞生物学产生不利影响。

当与不含蛋氨酸的特殊配方限制培养基联合使用时，光活化衍生物被细胞中的蛋白合成机制视为自然存在的氨基酸。因此，它可以在分解代谢和生长过程中取代蛋白一级序列中的蛋氨酸。光-蛋氨酸衍生物含有双吖丙啶环，当暴露于紫外光时激活，成为反应性中间体，可与邻近蛋白侧链和骨架形成共价键。培养细胞中含双吖丙啶的蛋白光活化可即时捕获细胞内自然相关的结合配偶体。在 SDS-PAGE 上，利用较低的迁移率检测交联蛋白复合物，然后进行 Western 印迹检测、体积排阻色谱、蔗糖密度梯度沉降或质谱分析。

资源：

光反应性氨基酸 FAQ

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