NeutrAvidin 蛋白，AP

Thermo Scientific™ 碱性磷酸酶偶联 NeutrAvidin 蛋白是亲和素的一种特殊制备形式，可降低生物素结合的背景。

特点包括：
•近中性等电点—pI = 6.3，比天然亲和素更偏中性
• 几乎无糖基化—与天然亲和素相比，凝集素结合的可能性降低
• 无 RYD 识别序列—无已知的脱靶结合域，与链霉素亲和素一样
• 经济实惠—价格显著低于链霉素亲和素

NeutrAvidin 蛋白是来自蛋清的去糖基化天然亲和素。通过专有工艺去除过量碳水化合物，从而产生一种具有更偏中性的等电点和较少非特异性结合特性的蛋白。偶联 NeutrAvidin 蛋白在需要生物素结合探针的蛋白质免疫印迹、ELISA 和 IHC 应用中具有出色的性能。NeutrAvidin 蛋白的测定特异性、灵敏度和信噪比通常与昂贵得多的链霉素亲和素相当或更好。

亲和素是一种糖蛋白，存在于鸟类、爬行动物和两栖动物的蛋清和组织中。该生物素结合蛋白包含四个相同的亚单元，其质量合计为 67,000-68,000 道尔顿。亲和素去糖基化得到质量为 60,000 道尔顿的 NeutrAvidin 蛋白。基于碳水化合物的凝集素结合可降低至无法检测到的水平，但是仍保留生物素结合亲和性。NeutrAvidin 蛋白具有中性 pI 的优势，可较大程度地减少非特异性吸附，同时赖氨酸残基仍可用于衍生化或其他定制偶联。在已知的生物素结合蛋白中，NeutrAvidin 蛋白的非特异性结合率最低。生物素结合的比活性约为 14µg/mg 蛋白质，接近理论活性上限。

应用：
• 原位杂交—艾伦脑科学研究所目前正在使用 NeutrAvidin-AP 偶联物创建艾伦脑图谱。
•蛋白质免疫印迹—在蛋白质免疫印迹中，使用 NeutrAvidin 蛋白偶联物（HRP 或 AP）代替链霉素亲和素偶联物检测生物素化靶蛋白或生物素化一抗或二抗。
•ELISA—NeutrAvidin 蛋白偶联物（HRP 或 AP）取代相应的链霉素亲和素偶联物，用于涉及生物素标记蛋白和抗体的直接或间接夹心 ELISA 检测方案。根据特定测定组分（例如，封闭缓冲液等），NeutrAvidin 蛋白偶联物可提供相似或更好的测定性能（以信噪比衡量）。

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