快速 ELISA 小鼠单克隆抗体分型试剂盒

ProcartaPlex 多重检测基于 Luminex xMAP 技术，提供了一个多功能平台，为用户提供了更大的灵活性和更多的分析物检测选项。无论您是测试单一分析物还是多种分析物，ProcartaPlex 多重分析都使用高效、易于遵循的方案提供准确的分析性能。这些检测中的每一个都经历了我们为 ELISA 进行的相同的开发、验证、制造和质量控制标准化。每批 ProcartaPlex 多重检测和 ELISA 检测都经过适当的样本类型（即物种特异性血清、血浆和细胞培养上清液）的完全验证，并且每批都根据以下性能特征进行评估：
o特异性 - 筛选每个分析物以确保在多重测试中与其他分析物没有明显的交叉反应
o灵敏度 - 对每个分析物的功能灵敏度（与背景的区别）和检测下限 (LLOD) 进行评估
o精密/准确度多重检测具有良好的检测内精密度 (<10% CV)、检测间精密度 (<10% CV) 和批次间一致性 (<20% CV)；这些值与大多数 ELISA 测试相当或更好

ProcartaPlex 多重检测定期针对匹配的 ELISA 进行测试。因此，您可以轻松地从 ProcartaPlex 检测切换到 ELISA，反之亦然，结果可靠。我们的大多数 ProcartaPlex 检测使用与我们传统的基于平板的 ELISA 相同的抗体对，从而导致两种检测之间的高度相关性 (R2 > 0.9)。

ELISA是一种可以在复杂样品中特异性定量单个蛋白质的简单而有效的方法。通过使用高质量的单抗体或双抗体夹心技术实现ELISA的选择性，并通过使用经校准的标准品实现精确定量。ELISAs可以检测低丰度的蛋白质，可以在96孔板中进行，并且仅需60分钟的手动操作时间。此外，ELISA获得的结果通常具有高度可重复性。

虽然ELISA已被作为蛋白质分析的标准方法，但是能够在单个样品中同时测量多种分析物的多重检测方法解决了许多缺陷：

•ELISA检测给定样品时，一次仅测量一种分析物，限制了研究人员日益增加的在研究中测量多种靶标的需求。
•所研究的许多样品可用体积较少可能限制可以进行分析的次数。在提供有限样品体积的小动物研究、儿科测试和微孔板分析中尤其如此。能在单个小体积样品中分析多种分析物可以更有效地使用每种样品。
•当对多次ELISA对分析物的检测结果进行比较时数据解读可能会遇到困难。因为每次检测使用的是不同的分装样本，而且每次检测都可能会有系统误差，这些会导致准确性和精度下降。
•许多分析物需要具有较宽动态范围的检测试剂盒，以避免重复测试或出现超出检测范围的情况。多重检测可以设计为具有针对所有分析物的宽动态范围，或根据各种预期分析物浓度专门定制的范围。

以下是一些可能的原因和解决方案：

标准品或样品移液或后续步骤中出错。始终以相同的顺序将溶液快速分配到孔中。分配时，请勿触摸每个微孔上的移液器吸头。使用经过校准的移液器和与该移液器匹配的吸头。检查移液器吸头是否泄漏。

重复使用吸头进行多种样品或不同试剂的移液。在每一种样品或试剂转移时，使用新的吸头。

孔被移液器吸头或洗涤吸头刮擦。将溶液分配到微孔中和吸出微孔时要小心。

在孵育期间，液体从一个孔转移到另一个孔。调整轨道摇床或检查摇床转速是否正确。小心地撕下粘性封板膜。

分配到微孔中的材料体积不正确。按照方案分配试剂。检查移液器的校准。

用血清、培养基或其他缓冲液稀释标准品。在试剂盒提供的标准品稀释缓冲液中稀释标准品。

样品中存在颗粒或沉淀物。在将溶液用于检测之前，通过离心除去任何颗粒/沉淀物。

微孔脏：微孔内部或底部可见碎屑。 检查微孔并翻转微孔板以除去碎屑。每次洗涤后，用吸水薄纸擦拭板底部。切勿将薄纸插入微孔内。

由于外边缘孔和板中心的孔之间的温度不均匀而产生“边缘效应”。在孵育期间平板密封要严，并且当要在37℃下孵育时，将平板放置在培养箱的中心。

以下是一些可能的原因和解决方案：

标准品原液制备不当。按照小瓶标签上的指示稀释冻干标准品，仅使用标准稀释缓冲液或与您的样品基质最匹配的稀释液。

使用了来自具有不同的分析物或不同批号的不同试剂盒的试剂（冻干标准品、标准稀释液缓冲液等）。切勿使用其他试剂盒中的任何组分。

标准品移液或后续步骤中出错。始终以相同的顺序将溶液快速分配到孔中。分配时，请勿触摸每个微孔上的移液器吸头。使用经过校准的移液器和与该移液器匹配的吸头。

以下是一些可能的原因和解决方案：

检测开始时，试剂不在室温（~25 ± 2°C）条件下。在开始检测之前，使试剂回温至室温。

组分储存不当，例如，未在2-8°C下储存。完全按照方案和标签上的指示储存所有组分。

抗兔IgG HRP或链霉亲和素-HRP工作溶液在用于检测前，已制备超过15分钟。在稀释后15分钟内使用稀释的抗兔IgG HRP或链霉亲和素-HRP。

试剂过期。收到试剂盒后立即查看有效日期，并在有效期前使用该试剂盒。

在不正确的波长上读板。使用TMB底物读取ELISA的正确波长为450nm。

TMB溶液失去活性。确保TMB溶液在分配到板孔中之前是透明的。蓝色和/或存在颗粒物质表明产品被污染。如果发现此问题，请联系技术支持。为避免污染，我们建议将检测所需的量分配到以前未使用过的一次性槽中以便移液。丢弃留在槽中的任何TMB溶液，不要将其放回瓶中。避免TMB溶液接触含有金属离子的物品。 不要用铝箔或铝涂层的Mylar纸封板，因为这可能会在没有HRP的情况下导致显色。

尝试使用ELISA检测未优化过的基质中的分析物。使用其他样品类型时，请联系技术支持。

孔被移液器吸头或洗涤吸头刮擦。将溶液分配到微孔中和吸出微孔时要小心。

显色液或终止液使用不当。仅使用试剂盒中提供的显色液和终止液。