SNaPshot™ 多通路检测试剂盒
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Applied Biosystems™

SNaPshot™ 多通路检测试剂盒

SNaPshot 多通路检测试剂盒是 SNaPshot 多通路检测系统的一部分。 SNaPshot 多通路检测系统引物延伸法可对多达10种单核苷酸多态性 (SNP) 进行多通路检测。此系统可用于筛查和确认了解更多信息
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SNaPshot 多通路检测试剂盒是 SNaPshot 多通路检测系统的一部分。 SNaPshot 多通路检测系统引物延伸法可对多达10种单核苷酸多态性 (SNP) 进行多通路检测。此系统可用于筛查和确认 SNP,检测次要序列变异,评估 DNA 甲基化,指纹识别细菌人工染色体 (BAC) 或限制性酶切片段的常规标记。

• 在单碱基延伸反应中可检测多达10个来自不同扩增子的 SNP
• 分离通过单碱基对区分的 SNP 基因座
• 与标准测序相比灵敏度更高,可检测供试样品中的低频变异(例如体细胞突变)
• 使用本款易于使用且性价比高的基因分型系统,可降低实验的复杂性
• 大量科学文献证明了基因分型、突变检测和图谱分析的实用性

SNaPshot 多通路检测试剂盒是 SNaPshot 多通路检测系统的一部分:
1) SNaPshot 多通路检测试剂盒(100、1000、5000次反应)
2) GeneScan-120 LIZ 片段大小标准品
3) 用于染料组 E5 的基质标准品 DS-02 套件适用于您的仪器

运行 SNaPshot 多通路检测试剂盒需要同时使用上述三种组分。但是,仅在一次性初始设置时才需要使用基质标准品套件以针对 SNaPshot 特异性染料组 E5 校准仪器。

4) GeneMapper 软件 v.4.0(或更高版本)是推荐的二级数据分析软件,可设置用户定义的检测组合和 bin 以用于自动数据分析。

此外,还可以使用 PeakScanner 1.0 软件(可从网站免费下载)对 310、3100、3130 和 3730 仪器进行简单的手动峰分析(PeakScanner 不兼容 3500 仪器提供的数据)。对于 3500 仪器,该仪器上的主要数据分析软件可进行片段大小分析和颜色分离,类似于 PeakScanner。

筛选和确认 SNP
SNaPshot 多通路系统是 SNP 筛选和验证的理想工具。该试剂盒提供单管单碱基延伸⁄终止试剂,可用于标记 DNA 片段。使用 GeneScan-120 LIZ 片段大小标准品在任何 Applied Biosystems 毛细管电泳仪上运行 DNA 片段,以指示标记片段的大小。然后使用 GeneMapper 软件分析数据并生成等位基因调用。SNaPshot 多通路检测试剂盒可通过单管单毛细管形式在单碱基延伸过程中对多达10种引物-模板组合进行多通路检测。

评估 DNA 甲基化
甲基化⁄表观遗传学的研究正在成为癌症研究的重要组成部分。在检测甲基化的典型测定试剂盒中,DNA 的亚硫酸氢盐处理可使非甲基化胞嘧啶脱氨基并将其转化为尿嘧啶,而甲基化胞嘧啶保持不反应。PCR 扩增的后续步骤会将尿嘧啶碱基转化为胸腺嘧啶。使用 SNaPshot 检测已处理和未处理样品的碱基差异,以了解您样品的甲基化状态。

指纹识别 BAC
新 BAC 文库需要一种快速、有效的方法来表征(也称为指纹识别图谱),并将克隆体组装成重叠群(连续共有序列),然后排列成染色体的物理图谱。使用 SNaPshot 多通路检测试剂盒,通过限制性核酸内切酶酶切后标记 BAC 片段,对克隆体进行指纹识别。然后可以在任何 Applied Biosystems 毛细管电泳仪上分离并检测标记片段。将来自 GeneMapper 软件 v 4.0 或更高版本的片段大小分析信息导入后续编辑和重叠群组装程序中。

类似于此,任何具有 5' 突出端的限制性酶切片段都可以使用 SNaPshot 试剂进行荧光染料标记。

仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(设备)310 基因分析仪、3100-Avant 基因分析仪、3130xl 基因分析仪、3730xl DNA 分析仪、3730 DNA 分析仪、3500xL 基因分析仪、3500 基因分析仪
产品规格
基因分型靶标SNP(已知)
高通量能力多色标记
热启动
反应次数5000 次反应
聚合酶AmpliTaq DNA 聚合酶
产品线SNaPshot™
产品类型多通路试剂盒
数量5,000 reactions
样品类型DNA
运输条件干冰
软件GeneMapper™ 软件
技术SNP 基因分型(基于片段分析),引物延伸
检测方法引物-探针
Unit SizeEach
内容与储存
包含:
•SNaPshot™ 多通路即用型反应预混液(可进行5000次反应)
• SNaPshot™ 多通路对照引物混合物 (30 µl)
• SNaPshot™ 多通路对照模板 (60 µl)

在 -15°C 至 -25°C 的恒温冷柜中储存。

常见问题解答 (FAQ)

How many SNPs can the SNaPshot Multiplex kit analyze?

The SNaPshot Multiplex Kis is designed to interrogate up to 10 single nucleotide polymorphisms (SNPs) at known locations on 1-10 templates in a single tube.

I am observing unexpected peaks in my SNaPshot data. Why?

The extra peaks could be due to incomplete removal of PCR primers, incomplete removal of dNTPs from the PCR reaction, or incomplete removal of the fluorescently labeled ddNTPS from the SNaPshot reaction. Residual PCR primers and dNTPs will both participate in the SNaPshot reaction. For the PCR purification, please use fresh SAP and Exo1 or use another method of PCR purification. To address incomplete removal of fluorescently labeled ddNTPS, use fresh CIP or SAP.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.

If my product is a single-base extension of my primer, shouldn't my products be primer length +1?

Due to the influence of the dye on the mobility shift of the DNA fragments, the reported sizes will differ by a few bases from the actual sizes. This is particularly true with the shorter fragments as the relative contribution of the dye is greater. It is also recommended that you have a tail on the primer with a 5-7 bp difference between them to further separate the samples so there is no overlap.

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My SNaPshot Multiplex Kit control reaction does not match the sizes given in the protocol. Is this normal?

This is normal as the SNaPshot control shown in the manual is from a 3100 Genetic Analyzer and POP-4 polymer. Dye-labeled DNA fragments can yield different sizes when run with a different instrument, polymer type, capillary array length, or size standard. Although the control sizes may not match that in the protocol, once the size has been established, the precision, or reproducibility will be consistent for a given fragment.

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