Pierce™ IgG 筛选用蛋白 A 离心板
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Pierce™ IgG 筛选用蛋白 A 离心板

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Thermo Scientific Pierce IgG 筛选用蛋白 A Plus 琼脂糖离心板为快速纯化和筛选抗体以及免疫沉淀 (IP) 提供了高通量形式。96 孔离心板的每个孔可以处理 10-100 µl 的血清、细胞培养上清液或腹水样品。

Pierce 蛋白 A Plus 琼脂糖是一种适合抗体纯化的通用、高性能亲和树脂。它包含以高密度共价固定至高质量交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 上的纯化天然蛋白 A。在现有的许多各种形式固定化蛋白 A 亲和树脂中,本产品可提供通用的色谱特点组合,用于从哺乳动物血清样品中获得高得率的全 IgG 和对全 IgG 进行高纯度纯化。琼脂糖微珠的物理和化学特性适用于多种亲和纯化系统。

Pierce 蛋白 A Plus 琼脂糖的特点:

天然蛋白 A – 固定化蛋白 A 适用于从人、兔、猪、犬或猫血清中进行多克隆 IgG 纯化
琼脂糖树脂 – 支持物为交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B),这是蛋白亲和纯化方法较常用的树脂
惰性且稳定 – 优越的生产方法通过不带电荷的抗浸出性共价键固定蛋白 A,因此非特异性结合较低且能够多次使用而不降低得率
高容量 – Pierce 蛋白 A 琼脂糖的这一 “Plus” 类型包含密集上样量的固定化蛋白 A,提供大于 34 mg 人 IgG/mL 树脂(约 16 至 17 mg 小鼠 IgG/mL 树脂)的结合容量

蛋白 A 是由多种金黄色葡萄球菌菌株生成的一种细胞壁组分。蛋白为46.7kDa 的单链多肽,基本上不含碳水化合物。天然蛋白 A 包含四个高亲和力 (Ka= 10^8/mol) 结合位点,能够与选定哺乳动物物种的 IgG 类抗体 Fc 区相互作用。IgG 结合功能在 pH 值 8.2 时最佳,但在中性和生理缓冲液(pH 值 7.0 至 7.6)也可高效结合。

蛋白 A 是一种源自细菌的蛋白,对抗体(尤其是 IgG 类抗体)的 Fc 部分具有高亲和力和特异性。与其替代品(蛋白G)相比,蛋白A对兔、猪、狗和猫的 IgG亚类结合力最强。蛋白A对人IgG也具有较高的结合力,但对IgG3的结合力很弱。蛋白 A 与小鼠 IgG1 的结合作用较弱,因此不推荐用于大多数包含该抗体同种型的应用。

Pierce 蛋白 A Plus 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学法制备,该方法与传统配体固定方法相比具有多项优势。AminoLink 固定后,琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化学基团,从而避免了可能导致的非特异性结合,并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合容量树脂在多轮抗体纯化之后仍然能保留固定化蛋白 A 的结合功能。

交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 的特性:
•支持 pH 值稳定性:2 至 14(短期);3 至 13(长期)
• 平均粒径:45 至 165 微米
• 排阻极限:10,000至4,000,000 道尔顿
•最大体积流速:约1 mL/分钟(对于1 cm 直径柱)
•最大线性速度:30 cm/h
• 最大压力:低于 25psi (1.5 bar);定义为树脂可承受的跨色谱柱最大压降(注:液相色谱装置的指示表压可能测量的是总系统压力,而不是跨色谱柱压降。)

更多产品数据
使用抗体结合蛋白进行抗体纯化

相关产品
Pierce™ 蛋白 A Plus 琼脂糖
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
描述Pierce IgG 筛选用蛋白A离心板
纯化目标IgG 抗体
数量1 块板
色谱柱类型琼脂糖树脂,亲和
产品规格96 孔过滤板
产品线Pierce™
产品类型离心板
固定相蛋白 A
Unit SizeEach
内容与储存
接收后,在 4°C 下储存

常见问题解答 (FAQ)

Can I use the Protein A or Protein G Antibody Screening Spin Plate to purify chicken IgY?

No. Neither Protein A nor Protein G binds IgY. Thermo Scientific Thiophilic Adsorbent (Cat. Nos. 20500 and 44916) purifies IgY from serum. The Thermo Scientific Chicken IgY Purification Kits (Cat. Nos. 44918 and 44922) purify IgY from yolks.

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Can I reuse the Protein A and Protein G Antibody Screening Spin Plates?

Yes. To regenerate the resins, wash wells three times with elution buffer and three times with 0.02% sodium azide in ultrapure water as detailed in the instructions.

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Can I use just a portion of the Antibody Screening Spin Plate to process a few samples?

No. The Protein A or Protein G 96-well Spin Plates have bottom and top seals. Removing the seals will cause the buffers to leak into the wash/collection plate. It is not possible to remove only a portion of the seal and continue with the purification process, and therefore, process 96 samples each time.

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What are the binding capacities of the Antibody Screening Spin Plates?

The Protein A Spin Plate binds 0.6 mg of human or 0.3-0.4 mg of mouse IgG/well (based on > 12 mg of human IgG or 6-8 mg of mouse IgG/mL of settled resin). The Protein G Spin Plate will bind > 0.5 mg human IgG/well (based on 11-15 mg of human IgG/mL of settled resin).

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What is the difference between Protein A and Protein G binding capabilities?

Protein A and Protein G bind almost exclusively with the IgG class of antibodies, but their binding properties differ among species and subclasses of IgG. Protein A is generally preferred for rabbit, pig, dog and cat IgG. Protein G has better binding capacity for a broader range of mouse and human IgG subclasses (IgG1, IgG2, etc.), and it binds rat IgG2a and IgG2b, which do not bind to Protein A. For a comprehensive list of the binding characteristics of Protein A and Protein G, see Tech Tip #34 (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/LSG/Application-Notes/TR0034-Ab-binding-proteins.pdf).

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