Imject™ mcKLH(在 PBS 中)
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Thermo Scientific™

Imject™ mcKLH(在 PBS 中)

Thermo Scientific Imject 海水养殖 KLH 是一种纯化的钥孔帽贝血蓝载体蛋白,能够轻松地制备含有肽抗原的高效免疫原。Imject 海水养殖 KLH 的特性:•高得率偶联—CCH了解更多信息
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Thermo Scientific Imject 海水养殖 KLH 是一种纯化的钥孔帽贝血蓝载体蛋白,能够轻松地制备含有肽抗原的高效免疫原。

Imject 海水养殖 KLH 的特性:

高得率偶联—CCH 的每个分子包含数百个通过 EDC 或 NHS 酯交联剂进行半抗原偶联的伯胺
质量经验证—与传统的载体蛋白源不同的是,纯化和稳定的海水养殖 KLH 维持了在水溶液中的溶解度
可持续来源—KLH 是从在海水养殖中生长的软体动物大锁孔帽贝(钥孔帽贝)的精选种群中分离得到的,而不是从野生种群中提取的
高免疫原性—KLH 具有高分子质量(4.5 x 105至1.3 x 107道尔顿;350和390 kDa 亚基聚集体),可引发比 BSA 或卵清蛋白更强的免疫应答

KLH 是较常用的具有免疫原性的载体蛋白,用于制备免疫和抗体生产所需的肽抗原。在磷酸盐缓冲液中的 KLH 制备可随时用于通过胺反应性 NHS-酯或戊二醛交联反应实现的半抗原-载体偶联。MES 缓冲液中的制剂经过优化,可用于通过羧基反应性碳化二亚胺交联剂 EDC(又称 EDAC)实现的肽-载体偶联。

载体蛋白是大而复杂的分子,能够在进样后刺激免疫应答。成功的生产特异针对小抗原的抗体(例如:肽段或药物化合物)要求这些半抗原被共价交联于更大、更复杂的分子(通常为某种蛋白质)上,以使其具有免疫原性。基于免疫原性、溶解度以及是否能够达到足够的载体偶联,选择载体蛋白。

出于抗体生产的目的,钥孔帽贝血蓝蛋白 (KLH) 广泛用作与半抗原和其他抗原偶联的载体蛋白,使其更具免疫原性。由于其质量大、复杂性高,与其他载体蛋白相比,KLH 能够引发更强的免疫应答。由于该蛋白分离自软体动物,因此与哺乳动物物种在系统发育上相距较远,并且不太可能产生会与测定中的典型靶点样品发生交叉反应的抗体。

Imject 海水养殖 KLH (mcKLH) 是从海水养殖而非野生生长的帽贝中分离得到的。Imject mcKLH 具有较高的免疫原性;它在缓冲液中纯化和冻干以优化其稳定性和溶解性,可进行半抗原偶联。KLH 是一种蛋白大分子,拥有数百个伯胺和羧基基团,可以成为与 N-羟基琥珀酰亚胺酯、EDC 以及其他交联试剂偶联的靶点。

碳二亚胺交联剂 EDC 可将含羧基的半抗原(例如,肽抗原的 C 末端)偶联到高度免疫原性 KLH 载体蛋白上,用于免疫接种和抗体生产。这种免疫原制备的方法最适用于主序列中央区域含有较少或不含天门冬氨酸残基、谷氨酸残基(羧酸盐)和赖氨酸残基(伯胺)的肽抗原。由于肽含有羧酸盐和胺,EDC 偶联可使其形成各种聚合物,并在交联的载体蛋白上呈随机取向。通常情况下,这样可令载体蛋白上呈现高水平的抗原装载量,并且各个方向上均可诱导抗体产生。不过,抗原肽序列内的重要(所需的)抗原表位区域如果含有伯胺(赖氨酸残基)或羧酸盐(天冬氨酸和谷氨酸残基),该表位可能被 EDC 介导的偶联所阻断。在这种情况下,可以使用同源双官能团胺-反应性交联剂与磷酸盐缓冲液中的纯化 mcKLH,或用独特的末端半胱氨酸合成肽以及马来酰亚胺活化 mcKLH 试剂盒来制备载体蛋白偶联物。

更多产品数据
免疫原制剂的载体蛋白活化和偶联数据

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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
描述
  • Imject mcKLH(在 PBS 中)
  • 溶解性含 10 mg/mL 样品的 Milli-Q 水溶液为澄清至混浊的蓝色溶液
数量5 x 20 mg
产品线Imject™
Unit SizeEach

常见问题解答 (FAQ)

在设计用于抗体制备的肽段时,我需要考虑什么?

我们建议疏水残基占序列中所有残基的50%或更少。确保每五个氨基酸至少有一个带电残基:这通常被认为可以增强肽段的溶解度。肽段(与折叠和掩盖疏水性氨基酸的多肽相比)太小而不能折叠,因此只有少数疏水性氨基酸可使它们不溶解。

其他指南包括:
•含有多个半胱氨酸、甲硫氨酸和色氨酸的肽段可能难以合成。
•一些序列在固相肽段合成或切割中存在问题,最好避免;这些序列包括天冬氨酸-脯氨酸(Asp-Pro)序列或在合成期间在其侧链上需要庞大保护基团的氨基酸片段。
•甘氨酸通常具有良好的抗原性,因为它只有一个氢侧链;这使其可以完全旋转。

请注意,我们提供定制抗体制备服务(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production.html),包括使用我们专有的抗原分析仪和抗原制备工具(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production/antigen-profiler-antigen-preparation.html)。

抗体制备的最合适的肽段长度是多少?

大多数多肽抗原的长度范围为12至16个残基,并且相对容易合成。9个残基或更短的肽段已经成为抗体制备的有效抗原,但是长于16个氨基酸的多肽可能含有多个表位并形成二级结构。超过18个残基的多肽开始出现更多的合成挑战。在合成您的多肽之前,我们建议您使用多肽序列进行BLASTP搜索。这是为了确保多肽与宿主动物中完全不相关的蛋白质中的序列不同源或相同。

请注意,我们提供定制抗体制备服务(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production.html),包括使用我们专有的抗原分析仪和抗原制备工具(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production/antigen-profiler-antigen-preparation.html)。

抗体对试剂盒包含什么?我可以处理多少样品,以及如何寻找按靶标提供的抗体对试剂盒列表?

抗体对试剂盒包含捕获抗体、检测抗体、重组标准品和HRP偶联物。每个套组都含有足够的试剂来处理四十个96孔板。可查看按靶标提供的抗体对试剂盒列表(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/antibody-pair-kits.html)。

试剂套组包含什么?我可以处理多少样品,以及如何检查试剂套组是否适用于我的靶标?

试剂套组包含捕获抗体、检测抗体、重组标准品、HRP偶联物、TMB底物和终止液。每个套组都含有足够的试剂来处理五个96孔板。试剂套组包含在ELISA试剂盒(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/antibody-pair-kits.html)的主列表中(通过“试剂套组”搜索)。

有多少种ELISA试剂盒?我应该如何按靶标查找ELISA试剂盒?

我们提供超过1000种不同的ELISA试剂盒,靶向> 800种不同的分子。您可以查看按靶标查找 ELISA 试剂盒页面(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/elisa-kits/target-specific-elisa-kits.html)。