Pierce™ Ni-NTA 琼脂糖磁珠

Thermo Scientific™ Pierce™ 镍-NTA 磁性琼脂糖微珠可为 His 标记重组蛋白纯化提供快速、便捷的方法。将微珠与含有 His 标记蛋白的细胞裂解物一起孵育，然后手动或使用仪器（如 Thermo Scientific™ KingFisher™ Flex 磁珠纯化仪）通过自动化操作从上清液中磁性分离。可以洗去非特异性结合蛋白，然后用洗脱缓冲液分离结合的 His 标记蛋白。自动仪器对于更高通量的纯化和筛选纯化条件特别有用。

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Pierce Ni-NTA 琼脂糖磁珠由内嵌磁石的高度交联琼脂糖磁珠和带有二价镍离子电荷的共价连接的四价氨三乙酸 (NTA) 螯合物组成。琼脂糖磁珠上配基的密度使得其结合能力类似于或优于传统琼脂糖树脂，并具有磁性处理的额外功能。琼脂糖磁珠是一种有价值的工具，适用于小规模 (∼1 mg) 纯化多种 His 标记蛋白，也适用于搜寻表达和纯化条件以便通过琼脂糖色谱载体进行更大规模纯化。

Ni-NTA 琼脂糖磁珠的特点：
•高能力 — 足以满足常规和苛刻纯化程序的要求；每 mL 沉淀树脂结合 >70 mg 6xHis 标记蛋白
• 高性能和可重复的磁珠 — 非聚集、磁石 (Fe₃O₄) 超顺磁珠为手动和自动 HTS 纯化应用提供出色的均匀性
• 低非特异性结合 — 优化的纯化方案可获得更好的标记蛋白纯化
• 多功能 — 可在变性或未变性条件下纯化蛋白质
• 兼容 — 与 Thermo Scientific 细胞裂解试剂和各种缓冲液添加剂配合使用

高性能、带磁石的超顺磁琼脂糖树脂经过验证和优化，可用于高通量磁性平台，例如 KingFisher 96 和 KingFisher Flex 磁珠纯化仪，但是，磁珠还可以利用适当的磁力架为简单的台式纯化应用实现优异的性能。

Ni-NTA 琼脂糖磁珠用于重组 His-标记蛋白的小规模亲和纯化和高通量筛选。聚组氨酸标签是较为流行的亲和标签，通常由六个连续组氨酸残基 (6xHis) 组成。标记蛋白在许多不同系统（较常见于细菌）中过表达，纯化自细胞裂解物（如使用 Thermo Scientific B-PER 细菌蛋白质提取试剂所制备的细胞裂解物）。采用带有镍离子的 NTA 螯合物（与组氨酸侧链相匹配）对 His-标记蛋白进行纯化。NTA 螯合物含有四个金属结合位点，可提供低金属离子浸出率和高结合能力。镍-NTA 琼脂糖磁珠的方案已经过优化，以提供高纯度分离的 His-标记蛋白。