Jump In™ T-REx™ HEK 293 试剂盒
Thermo Scientific™

Jump In™ T-REx™ HEK 293 试剂盒

The Jump-In™ T-REx™ HEK293 Kit allows the targeted integration of genetic material into a specific pre-engineered R4 site in the Jump-In™ HEK293 cell line, to create an inducible isogenic stable cell line with less effort and in less time than traditional cell engineering methods.
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货号数量
A150081 个试剂盒
货号 A15008
价格(CNY)
372,818.00
Each
数量:
1 个试剂盒
价格(CNY)
372,818.00
Each
Jump-In™ T-REx™ HEK293 试剂盒允许将遗传物质靶向整合至 Jump-In™ HEK293 细胞系中的特定预先工程化 R4 位点,以比传统细胞工程方法更少的工作量和更短的时间创建可诱导的同基因稳定细胞系。这些细胞稳定表达四环素阻遏蛋白,可在添加多西环素后诱导性表达重定向目的基因。

通过 HEK293 细胞系中的 R4 位点实现的高重定向效率可使用同基因池进行额外实验,无需克隆选择。或者,高重定向效率可易于选择用于表达您的目的基因的阳性稳定克隆。

Jump-In™ T-REx™ HEK293 试剂盒可让您:

• 与传统细胞工程方法相比,仅需大约一半的时间即可快速高效地开发出稳定的工程改造同基因细胞池
• 可使用多西环素诱导性表达您的目标基因
• 利用确定基因组位点的同基因表达作为比较性分析基因家族、亚型或直向同源物的理想解决方案
• 可使用简化的工作流程并行生成多个细胞系
• 轻松获取技术,无需复杂的许可证或解释限制

使用快速高效的工程改造细胞系传代可节省时间
使用 Jump-In™ T-REx™ HEK293 试剂盒,您只需 2 周即可生成功能性细胞池,无需繁琐的克隆分离和分析,简化的方案使同时生成多个细胞系变得更容易。由于阳性克隆的百分比较高,即使生成克隆细胞系,需要的时间和精力也减少。此外,Jump-In™ 技术为您提供自由生成无限数量的细胞系,无限制许可要求。

扩展您的实验能力
Jump-In™ T-REx™ HEK293 试剂盒可诱导性表达您的毒性或不稳定目的基因,是靶标和瞬时工程技术存在问题的检测的理想解决方案。该试剂盒还提供了一种创建基因家族、亚型或直接同源靶标检测组合的方便方法。编码大蛋白或多单元蛋白的基因不是问题,因为 Gateway™ 目的载体可接受较大插入。

试剂盒包括:

Jump-In™ T-REx™ HEK293 细胞(2 小瓶,每瓶 1 mL)
pJTI™ R4 Dest CMV-TO pA 载体 (100 µg)--一种 Gateway™ 目的载体,在强 CMV 载体的控制下,通过包含 Tet-Operon 驱动目的基因的诱导性表达。
pJTI™ R4 Int 载体 (100 µg)--表达 R4 整合酶,便于将目的基因重定向至 R4 位点。

单独出售:

pJTI™ R4 CMV-TO MCS pA 载体--一种多位点克隆载体,在强 CMV 载体的控制下,通过包含 Tet-Operon 驱动目的基因的诱导性表达。
pJTI™ R4 EXP CMV-TO EmGFP pA 载体--一种对照载体,在强 CMV 载体的控制下,通过包含 Tet-Operon 驱动 GFP 的诱导性表达。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
细胞系293 (HEK)
输送类型转染
表达系统哺乳动物
适用于(应用)蛋白表达、测定试剂盒开发
诱导剂四环素
关键功能稳定的细胞系开发,靶向整合,调节表达
产品线Jump-In
产品类型HEK293 试剂盒
数量1 个试剂盒
选择试剂(真核生物)Geneticin™ (G-418),潮霉素,杀稻瘟菌素
产品规格试剂盒
促进剂CMV/TO
矢量pJTI™ R4 DEST CMV TO pA,pJTI™ R4 Int
Unit SizeEach
内容与储存
Jump-In™ T-REx™ HEK293 细胞(2 小瓶,每瓶 1 mL),储存于液氮中
pJTI™ R4 DEST CMV TO pA 载体 (100 µg),储存在 -20°C 下
pJTI™ R4 Int 载体 (100 µg),储存于 -20°C 下

常见问题解答 (FAQ)

为何在T-REx和GeneSwitch系统中推荐使用连续转染而非共转染?

当执行共转染时,用户无法在稳转细胞系中同时完成功能性TetR或GeneSwitch蛋白的双重测试。另一方面,如果执行连续转染,用户就可对所生成的T-REx或GeneSwitch细胞系进行功能性测试,他们可将LacZ对照表达质粒瞬转进入细胞,并挑取那些在诱导剂缺乏条件下表达LacZ的本底水平最低,而在含诱导剂条件下LacZ表达水平最高的克隆。之后可对这一克隆进行扩增,并按需用于T-REx或GeneSwitch表达载体的转染实验。

GeneSwitch系统超越T-REx系统的主要优势有哪些?其主要劣势有哪些?

使用GeneSwitch系统能够确保目的基因处于极低的基础表达水平,而T-REx系统可能会有少量渗漏表达,因为FBS中不可避免的存在着一些四环素。GeneSwitch系统的诱导表达水平可能甚至高于CMV启动子。GeneSwitch系统的劣势在于,尽管该系统能够在转基因条件下以优异的性能工作,但在培养系统中关闭表达的操作不是很容易实现。而另一方面,T-REx系统可通过加入和去除诱导剂来切换开关状态。

Flp-In T-REx系统超越T-REx系统的优势有哪些?

Flp-In T-REx系统将Flp-In系统的靶向整合与T-REx系统的强大诱导表达能力整合在一起。该系统能够生成同基因,可诱导的稳定表达细胞系,并能够针对这些细胞系实行多克隆筛选。一旦建立了包含整合FRT位点的Flp-In T-REx宿主细胞系,后续建立表达目的基因的Flp-In T-REx细胞系就变得迅速高效了。

我能否使用强力霉素代替四环素,来作为T-REx系统中的诱导剂?

强力霉素可作为T-REx系统中诱导剂的代替品。它的作用机理与四环素相近,并在T-REx系统中表现出与四环素相似的剂量效应和诱导性质。强力霉素显示出比四环素更长的半衰期(分别为48小时和24小时)。我们未提供强力霉素,但用户可从Sigma(货号D9891)进行购买。

我对能够调控目的基因表达的哺乳动物表达系统很感兴趣。我看到你们为此类应用准备了多种系统。你们能描述一下每一系统的主要特性么?

我们提供三类独特的哺乳动物表达系统来帮助用户实现目的基因可诱导/调控性的表达。

•T-REx系统
•Flp-In T-REx系统
•GeneSwitch系统

请参见下表中的比较结果:

系统 --基础表达水平--诱导表达水平--表达最大化的响应时间--转基因应用
T-REx系统--低--最高--高--合适
Flp-In T-REx系统--较低--高--24-48小时--合适
GeneSwitch系统--最低--高--24-48小时--合适