CellROX™ Orange 试剂(用于氧化应激检测)
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CellROX™ Orange 试剂(用于氧化应激检测)
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CellROX™ Orange 试剂(用于氧化应激检测)

CellROX™ Orange 试剂是一种用于测量活细胞氧化应激的新型荧光探针。这种细胞可透过性染料在还原状态时不发出荧光,经活性氧簇 (ROS) 氧化后发出明亮的橙色荧光,最大吸收/发射波长 ∼545/565 nm。虽然本试剂与甲醛固定不兼容,但它可以与其他活细胞兼容的探针联用,如 GFP了解更多信息
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C10443250 μL
货号 C10443
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CellROX™ Orange 试剂是一种用于测量活细胞氧化应激的新型荧光探针。这种细胞可透过性染料在还原状态时不发出荧光,经活性氧簇 (ROS) 氧化后发出明亮的橙色荧光,最大吸收/发射波长 ∼545/565 nm。虽然本试剂与甲醛固定不兼容,但它可以与其他活细胞兼容的探针联用,如 GFP、CellEvent™ Caspase 3/7 Green 试剂、Image-iT™ DEAD Green、Green 和 Deep Red MitoTracker™ 染料以及 NucBlue™ 试剂。

CellROX™ Orange 试剂可与多种平台兼容,如传统的荧光显微镜检查、高内涵筛选 (HCS) 和流式细胞仪。本试剂还可与 Tali™ 成像型多色细胞分析仪兼容。

此外,CellROX™ Orange 试剂:

• 与其他活细胞探针(包括 GFP)兼容,可直接添加到含血清的生长培养基中
• 以稳定的即用型 DMSO 溶液形式提供,具有简单的方案,与荧光显微镜检查的标准工作流程兼容
• 以 5 个一次性使用的样品瓶提供,所含总试剂量足够用于五个 96 孔板或 100 个盖玻片反应

由于活性氧簇 (ROS) 的生成和细胞清除活性氧簇的能力之间的失衡而造成氧化应激。ROS 在多种疾病(包括炎症、动脉粥样硬化、衰老和年龄相关退行性疾病)的进展中发挥重要作用。

仅供科研使用。不得用于任何动物或人类的治疗或诊断。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
颜色橙色
最大浓度2.5 mM stabilized solution in DMSO
适用于(设备)Imaging, HCS, Cytometer
产品规格冰冻
数量250 μL
检测方法Live Cell Imaging
激发/发射545/565 nm
指示器Oxidative stress
产品线CellROX™
Unit SizeEach
内容与储存
Store at ≤–20°C. Protect from light and desiccate.

常见问题解答 (FAQ)

哪些染料可以用来检测细菌内的活性氧(ROS)?

许多对哺乳动物细胞使用的染料也可以用于细菌。例如,CellROX Deep Red试剂经证实可以用于检测B. subtilis的活性氧(见参考文献http://www-brs.ub.ruhr-uni-bochum.de/netahtml/HSS/Diss/RaatschenNadja/diss.pdf)。如果您对某一特定染料有兴趣但不知道它对您的细菌是否有效,最佳途径是通过文献检索的方式查看它是否已经过试验。如果没有,则可能需要您亲自测试。

我试着用活性氧(ROS)指示染料标记我的细胞,但没有观察到信号的明显差异。这是怎么回事?

首先,确保您同时拥有一个阴性(未处理)和一个阳性(ROS诱导)样本进行比较。100 µM甲萘醌1小时或是50 µM奈法唑酮24小时可以作为很好的阳性对照。H2O2 虽然不能很好地与CellROX染料兼容,但也可以用于阳性对照。某些如H2DCFDA的染料需要酯酶切割,所以不能在血清(血清中包含的酯酶可过早切割染料)存在的情况下进行培养。如果您的阳性对照相对于阴性对照没有明显变化,尝试着增加染料浓度和标记时间。我们的实验指南给出了启动建议。进行活细胞成像时尽可能得快。只有两种染料(CellROX Green和CellROX Deep Red)经甲醛固定处理后能保留在样品中。最后,确保您使用的滤光片和仪器设置与染料的激发和发射光谱相匹配。

What dyes can I use to detect reactive oxygen species (ROS) in my bacteria?

Many dyes that are used on mammalian cells have also been shown to be useful in bacterial cells. For example, CellROX Deep Red Reagent has been shown to work in B. subtilis (see Reference: http://www-brs.ub.ruhr-uni-bochum.de/netahtml/HSS/Diss/RaatschenNadja/diss.pdf). If you are interested in a particular dye, but are not sure if it will work on your bacteria, literature searches are the best way to check to see if it has been tested. If not, then it may be worth testing yourself.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

I am trying to label my cells with a reactive oxygen species (ROS) indicator dye, but I am not seeing a significant difference in signal. What could be happening?

First, make sure you have both a negative (untreated) and positive (ROS-induced) sample to compare. A good positive control can be the use of 100 µM menadione for one hour or 50 µM nefazodone for 24 hours. H2O2 can also be used, though it does not work well for CellROX dyes. Some dyes, such as H2DCFDA, require esterase cleavage, so don't incubate in the presence of serum (which contains esterases that can prematurely cleave the dye). If your positive control does not show significant change compared to the negative control, try increasing the concentration and label time for the dye. Our manuals give starting recommendations. Be sure to image your live cells as soon as possible. Only two dyes (CellROX Green and CellROX Deep Red) are retained with formaldehyde fixation. Finally, make sure you are using filters and instrument settings to match the excitation and emission spectra of the dye.

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