硫醇荧光检测试剂盒

仅供研究用蛋白硫醇检测试剂盒是一种荧光测定试剂盒，设计用于定量和检测包括 Tris、磷酸盐和柠檬酸盐缓冲液在内的常见生物缓冲液中的蛋白硫醇。

这种完整的即用型试剂盒包括黑色96孔板、N-乙酰半胱氨酸标准品、检测试剂、测定缓冲液和用于进行测定的其他组分。使用本试剂盒时需要使用能够读取 510 nm 处荧光发射（在 390 nm 处激发）的96孔微孔板读数仪。

性能特性
•测定类型：荧光检测试剂盒
•样品类型：包括 Tris、磷酸盐和柠檬酸盐缓冲液在内的常见生物缓冲液
•灵敏度：4.62 nM
• 标准曲线范围：78–10,000 nM
• 反应性：与物种无关

背景
游离硫醇在生物系统中具有重要作用。已知氧化修饰的半胱氨酸残基硫醇基可调节越来越多的蛋白的活性。该方法最紧迫的问题之一是准确测定复杂蛋白样品中特异性氨基酸（如半胱氨酸残基）的修饰程度，尤其是存在离液试剂（如盐酸胍）时。

该硫醇荧光检测试剂盒允许用户使用具有专利技术的非荧光检测试剂准确测定样品中的游离硫醇含量，该试剂在与样品中的硫醇发生反应后转化为明亮的荧光产物。样品中的硫醇可以是通过反应产生的硫醇，例如谷胱甘肽等酶促反应的最终产物，也可以是待测蛋白的半胱氨酸含量。已使用溶于试剂盒提供的测定缓冲液中浓度高达 2M 的盐酸胍样品对该测定进行了检测。这可准确测定未折叠蛋白的硫醇含量。虽然已提供半胱氨酸衍生物作为可用于定量肽和蛋白上游离半胱氨酸的标准品，但该测定应校准为尽可能接近待测硫醇的化学标准。例如，如果终端用户使用试剂盒测量谷胱甘肽，则应将测定校准为已知、经验证的谷胱甘肽标准品制剂。

检测原理
蛋白硫醇荧光检测试剂盒设计用于定量测定生物样品中生成或存在的硫醇基。提供标准品，以生成测定的标准曲线，所有样品均应从生成的标准曲线中读取。将样品和标准品移取到黑色微量滴定板中。将样品或标准品与检测试剂混合并在室温下孵育30分钟后，在荧光酶标仪中于 510 nm 处读取荧光产物，激发波长为 390 nm。由于生物学生成的游离硫醇（如谷胱甘肽和蛋白硫醇基）存在于不同的环境中，应使用适当的标准品校准存在或生成的巯基量。

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