pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒,含 One Shot™ Mach1™-T1R 大肠杆菌
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Invitrogen™

pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒,含 One Shot™ Mach1™-T1R 大肠杆菌

pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒可提供快速、高效和可靠的克隆。此外,该载体适用于 Gateway™ 重组克隆至多种目的载体,用于多种应用。该 pCR™8了解更多信息
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货号 K252020
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pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒可提供快速、高效和可靠的克隆。此外,该载体适用于 Gateway™ 重组克隆至多种目的载体,用于多种应用。

该 pCR™8 克隆试剂盒具有以下特点:
•快速、5 分钟 TOPO™ TA Cloning 可获得 95% 的重组体
• 3´-T 突出端可简化 Taq 扩增 PCR 产物的克隆
•快速生长的 MachI 细胞可缩短克隆时间
•与 Gateway™ 重组克隆兼容,可使用大量目的载体
•测序引物位点位于克隆插入位点附近,因此对更多插入片段进行测序、第一次使用的载体更少
•壮观霉素抗性基因可用于在大肠杆菌中进行稳健选择
•位于 PCR 产物插入位点旁侧的 EcoR I 位点,可方便地切除插入片段

该试剂盒包括 One Shot™ Mach1™-T1R 化学感受态大肠杆菌
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
克隆方法带 Gateway™ 的 TOPO™
反应次数20 reactions
产品线One Shot™
产品类型TA 克隆试剂盒
数量20 Reactions
载体pCR
Unit SizeEach
内容与储存
pCR™8/GW/TOPO™ TA Cloning 试剂盒含有 TOPO™-适应性即用型 pCR™8/GW/TOPO™ 载体、dNTP、盐溶液、无菌水、Gateway 正向和反向测序引物、对照模板和 PCR 引物、One Shot™ Mach1™-T1R 化学感受态大肠杆菌、S.O.C.培养基以及 pUC19 对照质粒。One Shot™ 大肠杆菌储存于 -80°C 下。所有其他组分储存在 -20°C 下。妥善储存时,保证所有试剂稳定储存 6 个月

常见问题解答 (FAQ)

我可将感受态细胞存储在液氮中吗?

我们不建议将感受态细胞保存在液氮中,因为极端温度会损害细胞。另外,装感受态细胞的塑料管子可能承受不了如此低的温度,从而发生破裂。

我应该如何存储我的感受态E. Coli?

我们推荐将感受态细胞存储在-80摄氏度。高于这个温度,即使存储时间很短,也会显著降低其转化效率。

Gateway兼容的TOPO载体同时提供一个对照模板和对照引物。可否提供对照模板的序列吗?

对照模板的序列是受专利保护的。

插入片段:载体的最佳比例是多少?是否有公式可以进行计算?

您可能需要尝试不同的插入片段:载体比例,范围从1:1至15:1。

公式:
length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio (插入片段长度 (bp) X 载体重量(ng) ) / 载体长度 (bp) = 插入片段:载体比例为1:1时所需的插入片段重量(ng)

Platinum Taq DNA高保真聚合酶混合物是否会在PCR产物中留下3′ A尾,从而可用于之后的TOPO TA 或普通TA 载体克隆?

是的,该酶混合物会使一部分PCR产物留下3′端 A尾。然而相对于单独采用Taq聚合酶,克隆效率会大幅度下降。建议在PCR产物添加3′端 A尾后再进行TA克隆。