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Invitrogen™

pGlow TOPO™ TA 表达试剂盒

The pGlow TOPO® TA Expression Kit uses the Cycle 3 GFP mutant (1) as a reporter protein for transcriptional activity.了解更多信息
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货号数量
K48300120 reactions
货号 K483001
价格(CNY)
16,127.00
Each
数量:
20 reactions
价格(CNY)
16,127.00
Each
The pGlow TOPO® TA Expression Kit uses the Cycle 3 GFP mutant (1) as a reporter protein for transcriptional activity. Cycle 3 GFP is ideal for non-invasive analysis of promoter elements within intact, living cells. The fluorescent property of Cycle 3 GFP allows in vivo detection in virtually any cell type or species using microscopy with wild-type GFP filter sets or by fluorescence-activated cell sorting methods.
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
输送类型转染
适用于(应用)报告基因测定,克隆您自己的启动子
产品类型TOPO TA 表达试剂盒
数量20 reactions
报告基因GFP(第 3 次循环)
选择试剂(真核生物)Geneticin™ (G-418)
载体pGlow、TOPO-TA 载体
克隆方法TOPO™-TA
产品线TOPO
促进剂无(无启动子)
蛋白标记未标记
Unit SizeEach
内容与储存
pGlow TOPO™ TA 表达试剂盒包含两盒。TOPO™ TA Cloning 盒包含线性化和拓扑异构酶 I-活化的 pGlow-TOPO™ 载体、dNTP、测序引物、盐溶液以及对照 PCR 模板和引物;在 -20°C 下储存。该 One Shot™ 盒含有 One Shot™ TOP10 大肠杆菌细胞、S.O.C.培养基和超螺旋对照质粒;在 -80°C 下储存。妥善储存时,可保证试剂盒稳定储存 6 个月。

常见问题解答 (FAQ)

我可将感受态细胞存储在液氮中吗?

我们不建议将感受态细胞保存在液氮中,因为极端温度会损害细胞。另外,装感受态细胞的塑料管子可能承受不了如此低的温度,从而发生破裂。

我应该如何存储我的感受态E. Coli?

我们推荐将感受态细胞存储在-80摄氏度。高于这个温度,即使存储时间很短,也会显著降低其转化效率。

我能否使用pBlue-或pGlow-TOPO报告载体来评估大肠杆菌中的启动子功能?

pBlue-TOPO中的lacZ报告基因上游隐含了一个原核启动子,通过X-Gal平板进行筛选时,大肠杆菌的转化子会呈现浅蓝色。因此,我们不推荐用户使用pBlue-TOPO来评估大肠杆菌中的启动子功能。不过,pGlow-TOPO适用于此类研究。请注意pBlue-TOPO载体中β-半乳糖苷酶的背景表达不会出现于哺乳动物细胞中。

你们是否提供适用于启动子分析研究的载体?

是的,我们提供pBlue-TOPO和pGlow-TOPO载体,目的基因的DNA序列能够轻松插入到β-半乳糖苷酶或Cycle 3 GFP基因上游。

pBlue-TOPO是进行低转录活性启动子功能分析的理想载体,,因为β-半乳糖苷酶检测实验易于操作,且可以在非常低的表达水平下进行定量。pGlow-TOPO是在天然活体细胞中针对启动子元件开展非侵入性分析的理想之选。在使用带有野生型GFP滤光片组的显微镜,或荧光激活的细胞分选法的过程中,Cycle 3 GFP的荧光性质能够满足几乎任何细胞类型或物种的体内检测需求。

经β-半乳糖苷酶染色后,还能检测到细胞中的GFP荧光么?

我们推荐在进行β-半乳糖苷酶染色前观察GFP荧光。这是因为β-半乳糖苷酶染色过程会产生非常高的自发荧光,从而干扰GFP荧光的检测。