pAd/BLOCK-iT™-DEST RNAi Gateway™ 载体可用于腺病毒载体体内短发夹 RNA (shRNA) 的高效递送和瞬时表达。一种新型克隆方法使 ∼50-bp DNA 寡核苷酸紧接着 U6 pol III 启动子进入 BLOCK-iT™ U6 入门载体。将入门载体高效重组至 pAd/BLOCK-iT™-DEST 载体，随后进行病毒生产和转导后，U6 启动子驱动的 shRNA 可在大多数分裂或非分裂哺乳动物细胞类型中瞬时表达。产生的 shRNA 可避免宿主防御机制，并将有效地产生 RNAi 基因敲低反应。

pAd/BLOCK-iT™-DEST 载体（图1）提供：

•attR 位点环绕的无启动子区域，用于与含有 RNAi 盒的两侧具有 attL 的 U6 Gateway™ 入门载体或任何两侧具有 attL 的启动子和基因序列进行高效重组
• 高效腺病毒包装和目标 shRNA 递送所需的所有组分。利用该载体，可实现分裂和非分裂哺乳动物细胞类型和动物模型中基因敲低的瞬时分析。