pENTR™ 5'-TOPO™ TA Cloning™试剂盒，含 One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌
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Invitrogen™

pENTR™ 5'-TOPO™ TA Cloning™试剂盒，含 One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌

pENTR™ 5’-TOPO™ TA Cloning™试剂盒结合了 Invitrogen’s TOPO™ 克隆和 MultiSite Gateway™ 技术，有助于将了解更多信息
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K5912020 reactions
货号 K59120
价格（CNY)
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20 reactions
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pENTR™ 5’-TOPO™ TA Cloning™试剂盒结合了 Invitrogen’s TOPO™ 克隆和 MultiSite Gateway™ 技术，有助于将 Taq 聚合酶扩增 PCR 产物编码的目标真核启动子在 5 分钟内一步克隆到 MultiSite Gateway™ 入门载体上，效率高达≥ 85%。克隆后，在与其他合适的入门克隆（群）的 MultiSite Gateway™ LR 重组以生成表达构建体的反应中，您的真核启动子可能从 pENTR™ 5'-TOPO™ 载体转移至合适的 MultiSite Gateway™ 目的载体上。

该试剂盒可与 ViraPower™ HiPerform 无启动子 Gateway™ 载体试剂盒或 MultiSite Gateway™ 三片段载体构建试剂盒搭配使用。

产品优势
•为您的实验和细胞系选择较佳启动子，以便从多启动子结构高效表达您的目的基因
•当与 ViraPower™ HiPerform™ 无启动子慢病毒载体结合使用时，您可以通过分裂和非分裂哺乳动物细胞中的首选启动子驱动，高效转导并表达您的目的基因


主要特点
•通过 TOPO™ 克隆技术进行快速 PCR 克隆，以克隆 5’ 元件
•attL4 和 attR1 位点与 MultiSite Gateway™ LR 反应兼容以提高灵活性

试剂盒包含
•pENTR™ 5´-TOPO™ TA Cloning™试剂盒
•One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌 (C4040-03)

相关 SKU
• ViraPower™ HiPerform™ 无启动子慢病毒 Gateway™ 表达系统 (A111451)
•ViraPower™ HiPerform™ 无启动子 Gateway™ 载体试剂盒 (A11146)
•MultiSite Gateway™ 三片段载体构建试剂盒 (12537-023)

仅供研究使用。不得用于治疗或诊断用途。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
产品类型TA 克隆试剂盒
数量20 reactions
载体pENTR、TOPO TA Cloning 载体
克隆方法TOPO™-TA
产品线One Shot
Unit SizeEach
内容与储存
含有 One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌的 pENTR™ 5´-TOPO™ TA Cloning™试剂盒含有两盒。

TOPO™ Cloning 盒包含足够用于 20 次克隆反应的线性化和拓扑异构酶 I-活化的 pENTR™ 5´-TOPO™ 载体、dNTP、盐溶液、对照模板和引物以及测序引物。在 -20°C 下储存。

One Shot™ TOP10 盒包括转化试剂，包括 20 份单次使用 50 µL One Shot™ 感受态细胞、S.O.C. 培养基和 pUC19 超螺旋质粒对照品的等份试液。储存在 -80°C 下。

常见问题解答 (FAQ)

我可将感受态细胞存储在液氮中吗？

我们不建议将感受态细胞保存在液氮中，因为极端温度会损害细胞。另外，装感受态细胞的塑料管子可能承受不了如此低的温度，从而发生破裂。

我应该如何存储我的感受态E. Coli？

我们推荐将感受态细胞存储在-80摄氏度。高于这个温度，即使存储时间很短，也会显著降低其转化效率。

Gateway兼容的TOPO载体同时提供一个对照模板和对照引物。可否提供对照模板的序列吗？

对照模板的序列是受专利保护的。

对TOPO TA克隆来说最佳的插入片段：载体比例是多少？是否有公式来计算用量？

我们建议起始摩尔比为1:1(插入片段：载体)，范围为0.5：1到2：1(插入片段：载体)。对TOPO克隆来说，2kb大小的 PCR产物的ng值应在5- 10ng之间。

计算公式：< br / > 插入片段长度（bp）/ 载体长度（bp）x 载体用量（ng）= 插入片段：载体比为1：1时所需的插入片段的用量（ng）。

插入片段：载体的最佳比例是多少？是否有公式可以进行计算？

您可能需要尝试不同的插入片段:载体比例，范围从1:1至15:1。

公式：
length of insert (bp)/length of vector (bp) x ng of vector = ng of insert needed for 1:1 insert:vector ratio (插入片段长度 (bp) X 载体重量(ng) ) / 载体长度 (bp) = 插入片段:载体比例为1:1时所需的插入片段重量(ng)

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