pBR322 质粒 DNA

Thermo Scientific pBR322 是较常用的大肠杆菌克隆载体之一。

产品优势

• 从大肠杆菌 (dam+, dcm+) 中分离得到
• 超螺旋形式超过 90%
• 采用专有专利技术通过色谱法进行纯化

应用

• 克隆
• 制备 DNA 分子量标准品

pBR322 的长度为 4361 bp，其包含：
• 负责质粒复制的复制子 rep（来源 – 质粒 pMB1）
• 编码 Rop 蛋白的 rop 基因，可促进不稳定 RNA I – RNA II 复合物转化为稳定复合物并用于减少拷贝数（来源 – 质粒 pMB1）
• 编码 β-内酰胺酶的 bla 基因，对氨苄青霉素产生耐药性（来源 – 转座子 Tn3）
• 编码四环素耐药蛋白的 tet 基因（来源 – 质粒 pSC101）
• 环状序列的编号方式如下：1 为特有 EcoRI 位点 GAATTC 的第一个 T，在通过 tet 基因和 pMB1 材料并最后通过 Tn3 区时编号增加。

该图谱显示了对 pBR322 DNA 进行一次切割的酶。由 Thermo Scientific 生产的酶用橙色表示。坐标指的是每个识别序列中第一个核苷酸的位置。
图谱中显示了遗传元件的确切位置（包括终止密码子）。bla 基因核苷酸 4153-4085（互补链）编码一种信号肽。指示的 rep 区足以促进复制。DNA 复制在 2533 (± 1) 位置启动，并按所示方向进行。携带 pMB1 和 ColE1 复制子的质粒不相容，但它们与携带 p15A 复制子的质粒 (pACYC177, pACYC184) 完全相容。pMB1 衍生质粒可使用氯霉素进行扩增。