LanthaScreen™ GFP 细胞检测能够在活细胞背景下针对多种靶蛋白分析翻译后修饰。PI3K⁄AKT 通路介导细胞生长、细胞存活、转录、翻译和葡萄糖摄取的信号。由于该信号级联的复杂性，特别是用于调节雷帕霉素 (mTOR) 的哺乳动物靶标时，基于细胞的方法对于正确鉴别该通路的小分子介质至关重要。最近通过鉴别细胞内部两种不同的多聚复合物强调了 mTOR 作为激酶的意义：mTORC1（包括 Raptor，且具有雷帕霉素敏感性）和 mTORC2（包括 Rictor，且对急性雷帕霉素暴露敏感）。已证明 mTORC2 可使残基 Ser473 处的 AKT 发生磷酸化，以完全激活该促存活激酶。LanthaScreenTM AKT HEK293E 是一种组成性表达 GFP-AKT 融合蛋白的人细胞系。使用脂质转染引入该激酶靶标，这些细胞是使用 GFP 荧光（作为分选标志物）和杀稻瘟菌素（在选择下维持细胞）通过 FACS 分离的克隆群体。使用该细胞系，通过时间分辨 FRET (TR-FRET) 读数开发了一种均相免疫检测，在该读数中，使用铽标记的磷光体特异性抗体在细胞裂解物中检测到 GFP-AKT 上胰岛素诱导的 Ser473 磷酸化。该细胞系已使用不同刺激物⁄抑制剂进行了验证，并显示正确的 EC50 ⁄ IC50 值。此外，该测定已针对可变实验条件（包括细胞平板接种密度、激动剂刺激时间、DMSO 耐受性和测定开发时间）下的性能进行了优化，并显示出色的统计数据 (Z' > 0.6) 和良好的信背比。