Olink Explore触碰蛋白组学检测边界，为何"看不见"的蛋白更有价值？

在精准医疗的探索中，蛋白组学正以前所未有的深度，重塑我们对多种疾病机制的认知。与基因组相比，蛋白质作为生命活动的直接执行者，更能反映机体在“后天”环境中的动态变化，揭示那些基因组层面难以捕捉的病理机制。

近年来，随着高深度质谱、邻位延伸技术（PEA）等突破性方法的涌现，蛋白质组学已实现对数以千计蛋白的高通量检测。然而，技术能力的提升也带来了新的挑战：研究人员开始面临“如何在数千种蛋白质中，精准识别出真正具有临床价值的标志物”这一关键问题。尽管新技术能够产生海量数据，但若缺乏有效的聚焦方向，宝贵的生物学信号仍可能淹没在数据噪音的海洋中，难以转化为临床可用的可靠标志物。

今天，借助Olink Explore HT平台近期对6,800例样本的系统性分析结果，我们将和大家一同探讨：高通量蛋白质组学如何从“追求数量”转向“聚焦价值”。并直面一个核心问题：当技术已能覆盖近万种蛋白时，我们究竟需要多少数据，才能穿透噪音，触达真实的生物学真相？

打破误区

每份血样都应检出所有蛋白？

对6,800份泛人群血浆样本（包含随机选择的健康和疾病人群样本）的Olink Explore HT分析数据，绘制出了一幅清晰的蛋白质分布图谱。其核心规律在于：蛋白质的检出并非简单的“全或无”，而是存在“常见性观测蛋白”与“条件性存在蛋白”的不同类别。

常见性观测蛋白（Commonly observed proteins）：在大多数情况下为大部份个体所共有。
条件性观测蛋白（Conditionally observed proteins）：针对特定个体在特定的时间被观察到.

Olink Explore HT在6800份多维样本中的蛋白质检出率
（横坐标为1-5400号蛋白质，纵坐标为超出检出限的样本比例）

以SPINT3蛋白为例，它是一种具有组织特异性与生理特异性的蛋白质，主要由男性生殖组织产生，为典型的“条件性观测蛋白”。在6,800份血浆样本中，其54.7%的检出率精准匹配了研究群体的性别比例，充分验证了Olink Explore平台检测的生物学合理性。

样本类型与蛋白“可见性”的关系

组织与血浆的惊人差异

一个更有趣的发现是，蛋白质的表达分布具有高度的组织特异性和功能依赖性。同一蛋白在不同样本类型中的”可见度”可能截然不同。这或许解释了为何许多组织中的明星标志物，到了血液中却难以检测。我们对同一组人群的部分细胞和组织样本进行了对比分析，并观察到了几组鲜明的案例。血液中“常见”，组织中“罕见”

某些蛋白质在血液中为常见性观测蛋白，但在细胞和组织中则为条件性观测蛋白。例如，SERPINC1（凝血调节蛋白，由肝脏分泌）、GC（维生素D运输蛋白，由肝脏分泌）以及GUCA2A（食欲调节蛋白，由结肠与回肠分泌）在血浆样本中普遍可被检测（检出率99.9%），反映出其在循环系统中的稳定存在。然而，由于这些蛋白的组织来源具有特异性，SERPINC1 和 GC 仅由肝脏表达，而 GUCA2A 仅由结肠和回肠表达。当对164份不同细胞和组织的裂解液样本进行检测，这些蛋白质仅在其来源组织中被检测到（数据见下图）。这也表明了，采用Olink Explore平台所获得的检测结果符合样本的生物学特性。

5,400种蛋白质在血液和细胞组织裂解液中的检出范围
（SERPINC1, GC和CUCA2A；请注意，下图与上图的横坐标蛋白编号并非一一对应）

组织中“常见”，血液中“罕见”

与分泌至血液中广泛分布的蛋白质相反，另一类蛋白因其细胞内定位特性，在血液中难以检测，却在特定组织或细胞中高表达。例如，转录因子TP53主要定位于细胞核内，而雌激素受体ESR1作为膜结合蛋白，特异性表达于子宫内膜、乳腺等激素应答组织。这两类蛋白在血液中的检出率极低，但在相应的组织或细胞裂解物中可被稳定检测。这一分布差异不仅反映了蛋白质功能与其亚细胞定位、组织表达模式之间的紧密关联，也为生物标志物研究提供了重要启示：在试验设计时，应依据目标蛋白的生物学特性，合理选择不同类型的样本，以提高标志物检出的有效性和准确性。

5,400种蛋白质在血液和细胞组织裂解液中的检出范围
（TP53和ESR1；请注意，下图与上图的横坐标蛋白编号并非一一对应）

“稀缺”的价值

条件性观测蛋白的临床潜力

在蛋白质组学研究中，低检出率蛋白可能被视为“无关信号”而忽略。然而，基于Olink技术的一系列研究表明，这类条件性观测蛋白恰恰具备重要的生物标志物潜力。符合“稀缺价值”理论：若某一蛋白在健康人群中难以捕捉，却在特定疾病队列中高频出现，则其很可能标志着关键病理过程，具备显著的标志物价值。癌症早诊有效“工具”

CEACAM5（癌胚抗原相关细胞粘附分子5）在6,800份泛人群血浆样本中检出率仅为1.3%，但在特定的结直肠癌研究队列中，检出率显著提升至78.4%。这一跨越不同人群的显著差异，不仅印证了CEACAM5在区分结直肠癌患者与健康个体方面的鉴别能力，也凸显了其作为潜在诊断标志物的早期应用价值。

疾病分层精准“利器”

L1RE1（LINE-1反转录转座子元件ORF1蛋白）在广泛人群血浆样本中的检出率仅为8.5%，但在III-IV期恶性卵巢癌患者中的检出率为77.7%（在良性肿瘤队列中为9.6%）。瑞典乌普萨拉大学免疫学、遗传学和病理学系Ulf Gyllensten教授团队利用Olink Explore HT技术，在未经治疗的卵巢癌队列中验证了L1RE1等蛋白在区分良恶性卵巢癌方面的能力。该研究首次提出L1RE1可作为鉴别晚期卵巢癌与良性肿瘤的潜在生物标志物，此前L1RE1尚未被报道与癌症相关。

以真实的生物学视角，加速标志物发现

Olink Explore平台检测结果的可靠性及其所带来的深刻生物学洞察，已获得全球学术界与大型队列研究的广泛验证，包括截止到2025年10月份已发表的3,200余篇同行评议论文，以及UK Biobank制药蛋白组学（UKB-PPP）和再生元遗传学中心等多项权威项目的认可。

此外，发表于《Science Advances》与《Nature》等顶刊的重要研究均已表明，尽管Olink在蛋白检测数量上并非最高，其数据却能揭示更多具有生物学意义的表型关联。这源于Olink研发端对于蛋白标志物库的“精挑细选”与“严格验证”：通过精准聚焦与系统验证，确保所选蛋白覆盖关键生物学通路，同时具备高度的准确性与临床应用潜力。

展望未来

Olink希望通过Explore平台，不仅提供一种前沿的高通量蛋白组学技术，更推动一种研究范式的转变。我们理解到，蛋白质组学的价值边界不在于检测蛋白的数量，而在于能否从海量数据中识别真正驱动生物学过程的关键信号。正如KTH皇家理工学院转化蛋白质组学教授、HUPO（人类血浆蛋白质组项目）主席Jochen Schwenk教授所言：