用于多片段 DNA 无缝组装的 Gibson Assembly 解决方案，帮助快速完成试剂盒选择、同源臂设计和 DNA 片段准备。

本文要点：

  • Gibson Assembly 是一种无缝/无痕克隆方法，可高效组装多个 DNA 片段。
  • GeneArt Gibson Assembly 可支持高达 95% 的克隆效率。
  • HiFi 适合高达 6 个片段、500 bp–32 kb 的组装；EX 适合高达 15 个片段、100 bp–100 kb 的复杂组装。
  • HiFi 反应时间可从 15 分钟起；EX 反应时间为 80 分钟。
  • 页面同时提供同源区域长度建议、DNA 片段获取方式和订购入口。
GeneArt Gibson Assembly组装克隆

Gibson Assembly组装克隆是一种简便而强大的无缝克隆或无痕克隆方法，已被科学界广泛使用，并且不论其长度或末端的兼容性，都能以高效、无缝克隆的方法组装多个DNA片段。

当与 GeneArt DNA Strings 片段或GeneArt基因合成配合使用时，GeneArt Gibson Assembly是组装大型且困难构建体时的最佳选择。

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Gibson 组装基础知识

产品推荐

  • 简便 – 可实现多达15个DNA片段通过同源重组构建完美的无缝克隆
  • 高效 – 高达 95%以上的克隆效率有助于节省时间和资源，加速科学研究
  • 可靠 – 数以千计的文献中都引用了Gibson Assembly无缝克隆方法
  • 多功能 – 可用于从头构建整个基因组
  • 灵活 – GeneArt Gibson Assembly可配备感受态细胞或以预混液形式提供，提供最大的灵活性

应用

  • 分子克隆和鸟枪法克隆
  • 蛋白表达
  • 定点突变
  • 小基因组组装1

GeneArt Gibson Assembly无缝克隆技术的优势

GeneArt Gibson assembly EX克隆试剂盒非常适合组装多个片段。 

当组装更多的插入片段时，GeneArt Gibson Assembly EX试剂盒可提供高转化效率。

图 2.当组装更多的插入片段时，GeneArt Gibson Assembly EX克隆试剂盒可提供高转化效率。在pcDNA 3.4载体中分别组装0.5 kb的6、8或10个片段，使用Invitrogen™ One Shot™ TOP10感受态细胞进行转化。

GeneArt Gibson Assembly HiFi克隆试剂盒可提供非常经济高效的方式来组装少量片段。对于较大规模的组装克隆，可使用GeneArt Gibson EX预混液和试剂盒。

GeneArt Gibson Assembly HiFi克隆试剂盒不管针对单片段还是多片段均可提供高克隆效率。

图 1.GeneArt Gibson Assembly HiFi克隆试剂盒不管针对单片段还是多片段均可提供高克隆效率。使用 TOP10 感受态细胞在 pCDNA 3.4 载体中分别组装1kb的 1、2 和 4个片段。GeneArt Gibson Assembly HiFi 试剂盒是构建大型组装体最经济省时的方法，特别是与 GeneArt Strings DNA 片段或经 100%序列验证的 GeneArt 基因合成结合使用时。

GeneArt Gibson Assembly HiFi和EX产品都可提供预混液形式，或可提供包含具有高转化效率的化学感受态和电感受态细胞的完整试剂盒。

当组装更多的插入片段时，GeneArt Gibson Assembly EX试剂盒可提供高转化效率。

图 3.GeneArt Gibson Assembly EX克隆试剂盒为高克隆效率提供了高转化效率的选择。分别使用 Invitrogen TOP10 化学感受态细胞和 ElectroMAX DH10B 电感受态细胞在 pUC19L 中组装 5 个 2kb的插入片段。

高效率

GeneArt Gibson assembly EX克隆试剂盒非常适合组装多个片段。 

当组装更多的插入片段时，GeneArt Gibson Assembly EX试剂盒可提供高转化效率。

图 2.当组装更多的插入片段时，GeneArt Gibson Assembly EX克隆试剂盒可提供高转化效率。在pcDNA 3.4载体中分别组装0.5 kb的6、8或10个片段，使用Invitrogen™ One Shot™ TOP10感受态细胞进行转化。

专为大型组装克隆而设计

GeneArt Gibson Assembly HiFi克隆试剂盒可提供非常经济高效的方式来组装少量片段。对于较大规模的组装克隆，可使用GeneArt Gibson EX预混液和试剂盒。

GeneArt Gibson Assembly HiFi克隆试剂盒不管针对单片段还是多片段均可提供高克隆效率。

图 1.GeneArt Gibson Assembly HiFi克隆试剂盒不管针对单片段还是多片段均可提供高克隆效率。使用 TOP10 感受态细胞在 pCDNA 3.4 载体中分别组装1kb的 1、2 和 4个片段。GeneArt Gibson Assembly HiFi 试剂盒是构建大型组装体最经济省时的方法，特别是与 GeneArt Strings DNA 片段或经 100%序列验证的 GeneArt 基因合成结合使用时。

灵活

GeneArt Gibson Assembly HiFi和EX产品都可提供预混液形式，或可提供包含具有高转化效率的化学感受态和电感受态细胞的完整试剂盒。

当组装更多的插入片段时，GeneArt Gibson Assembly EX试剂盒可提供高转化效率。

图 3.GeneArt Gibson Assembly EX克隆试剂盒为高克隆效率提供了高转化效率的选择。分别使用 Invitrogen TOP10 化学感受态细胞和 ElectroMAX DH10B 电感受态细胞在 pUC19L 中组装 5 个 2kb的插入片段。

我应该选择哪种 GeneArt Gibson组装克隆技术？

  • 优先选择 HiFi：当您需要更快完成常规多片段组装，且组装规模在较少片段范围内时。
  • 优先选择 EX：当您需要处理更多 DNA 片段、更大组装长度，或更复杂的组装项目时。
 GeneArt Gibson Assembly HiFi 预混液和试剂盒GeneArt Gibson Assembly EX 预混液和试剂盒
实验流程步骤数单管，一步单管，两步  
克隆效率 高达 95%高达 95%
片段长度500 bp 至 32 kb100 bp 至 100 kb
反应时间（秒）从 15 分钟起80 分钟
片段数高达 6 个高达 15 个
产品形式可提供预混液形式，或包含化学感受态或电感受态细胞的完整试剂盒可提供预混液形式，或包含化学感受态或电感受态细胞的完整试剂盒
非常适合简单组装使用大片段的复杂组装和项目  

GeneArt Gibson Assembly组装克隆技术依靠同源重组来组装具有末端同源性的相邻 DNA 片段。同源片段末端区域的最佳长度取决于组装反应中片段的数量和长度。下表列出了末端同源性的建议长度。

片段数片段长度同源区域长度
1-2≤ 8 kb20-40 bp
8-32 kb25-40 bp
3-5≤ 8 kb40 bp
8-32 kb40-100 bp
6+100 bp 至 100 kb50–100bp

获取DNA 片段的可选方法

  • PCR 扩增
  • GeneArt Strings / High-Q Strings
  • GeneArt 基因合成
PCR 扩增GeneArt Strings 和 High Q Strings DNA 片段GeneArt基因合成
通过PCR扩增获得具有载体同源性的PCR片段，或者将PCR片段与引物进行拼接，之后用于Gibson Assembly组装克隆。当与Platinum SuperFi II 聚合酶配合使用时，可获得无与伦比的保真度。

了解更多有关 PCR 产品的信息		GeneArt Strings DNA片段是定制的、未克隆的双链线性DNA片段，其使用与GeneArt基因合成相同的高质量控制，通过合成寡核苷酸组装而成。Invitrogen™ GeneArt™ High-Q Strings™ DNA片段具有市场领先的准确性，其错误率小于1 bp /10,000 bp。

立即订购		GeneArt基因合成克隆经过 100%序列验证。只需从我们的标准克隆载体（pMX）中截取DNA片段，即可开始构建完全无误的组装体。借助我们的SuperSPEED基因合成服务，您甚至可以更快地获得100%无错误的片段。

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订购信息

GeneArt Gibson Assembly HiFi试剂盒

GeneArt Gibson Assembly EX试剂盒

常见问题 FAQ

Gibson Assembly 是什么？
Gibson Assembly 是一种无缝/无痕克隆方法，可在单一反应中高效组装多个 DNA 片段。

GeneArt Gibson Assembly 可以组装多少个 DNA 片段？
根据页面信息，GeneArt Gibson Assembly HiFi 可支持高达 6 个片段组装，EX 可支持高达 15 个片段组装。

GeneArt Gibson Assembly HiFi 和 EX 有什么区别？
HiFi 适用于高达 6 个片段、500 bp–32 kb 的组装，反应时间可从 15 分钟起；EX 适用于高达 15 个片段、100 bp–100 kb 的更复杂组装，反应时间为 80 分钟。

什么时候应该选择 HiFi，什么时候应该选择 EX？
当实验需要更快完成常规多片段组装时，可优先选择 HiFi；当需要处理更多片段或更复杂的大型组装项目时，可优先选择 EX。

Gibson Assembly 需要多长的同源臂？
页面建议根据组装片段数和片段长度设计同源区域。较少片段组装通常可采用较短同源臂，而更多片段或更大片段组装通常需要更长的同源区域。

Gibson Assembly 可以用于多大片段的组装？
根据页面信息，HiFi 支持的总组装长度可达 32 kb，EX 支持的总组装长度可达 100 kb。

用于 Gibson Assembly 的 DNA 片段可以通过哪些方式获得？
页面列出了 PCR 扩增、GeneArt Strings / High-Q Strings 以及 GeneArt 基因合成等 DNA 片段获取方式。

相关资源

支持

1Enzymatic assembly of DNA molecules up to several hundred kilobases.Gibson et. al., Nat Methods.2009 May; 6(5):343-5

Gibson Assembly® 是 SGI-DNA, Inc 的注册商标，已得到授权和许可。
NEBuilder® 是 New England Biolabs, Inc.的注册商标。
In-Fusion® 是 Takara Bio USA, Inc. 的注册商标。

仅供科研使用，不可用于诊断目的。