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对正常和疾病状态下的 RNA 表达进行实时反转录 PCR 分析是研究工作流程中的一项基本技术。永生化细胞和原代细胞常被用于研究疾病和潜在的药物靶点。然而,传统的 RNA 样本纯化往往是工作流程中的一个重大瓶颈,这增加了分析所需的时间和自动化复杂性。TaqMan CellstoCT 技术是一种与实时 PCR 分析相结合而设计的工作流程,它无需传统的纯化步骤,同时保持与纯化 RNA 相当的性能。深入了解 RTqPCR 无提取样本制备的最新进展,让您能够简化实验室流程并加快基因表达工作流程。了解细胞培养裂解物的无提取 RTqPCR 基因表达分析如何能够为细胞培养研究中的传统提取方法提供一种方便高效的替代方案。
为了提高进行基因组研究的实验室的生产力,鼓励采用自动化技术和快速工作流程。在这里,我们讨论了直接从细胞裂解物进行逆转录定量 PCR(RTqPCR)的基因表达分析,无需使用标准核酸分离技术纯化 RNA。我们探讨了在细胞裂解过程中去除基因组 DNA 的好处,以及避免灭活步骤的新型化学改进方法,从而减少工作流程中的操作点和塑料废弃物。当与液体处理系统配合使用时,所提出的工作流程能够在基因表达工作流程中实现更高的通量和快速的结果,同时所需的手动操作步骤最少。通过对全自动工作流程中来自细胞裂解物的不同基因靶点进行案例研究分析,并将其与现有的手动工作流程建议进行比较,来探索这些方法。