荧光循环

荧光循环

在本节中,您将了解荧光的循环性质和光漂白的破坏性。

什么是光漂白?

荧光基团可以反复经历荧光过程 - 理论上是无限期的。这非常有用,因为它意味着一个荧光基团分子可以多次生成信号。这种特性使荧光成为一种非常灵敏的显微样品可视化技术 - 即使只能检测少量染料。 

然而,实际上,在激发寿命期间,荧光基团的结构不稳定性使其容易降解。高强度照射会导致荧光基团结构改变,从而不再发出荧光—这被称为 光漂白。

光漂白过程

光漂白过程。(A) 荧光重复循环发生。(B) 分子在结构上不稳定  ,并在激发状态期间开始脱落破碎。(C) 分子荧光能力丧失

光漂白对实验的影响

当荧光样品 (如带有封闭组织的玻片) 发生光漂白时,即使提供所需的光能量,荧光基团也不再被促进为激发状态。  

细胞中荧光素和 Texas Red 染料的光漂白

细胞中荧光素和 Texas Red 染料的光漂白。使用荧光素和 Texas Red  染料对细胞骨架进行染色,然后使用 488 或 594 nm 激光激发,所需时间如下:A) 0 秒 B) 5 秒 C) 15 秒。荧光素在 15 秒后几乎完全被破坏

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仅供科研使用,不可用于诊断目的。