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Invitrogen™ eBioscience™ 流式配色工具
本文要点：
- 该工具可用于在线设计多色流式细胞术 panel。
- 可根据流式仪配置、蛋白表达丰度和荧光亮度推荐抗体组合。
- 有助于减少荧光补偿和通道重叠。
- 支持查看光谱、选择克隆号，并保存为 Excel 或 PDF。
- 适合需要快速完成流式 panel 设计的研究人员。
流式细胞分析试剂和仪器的进步，使得研究人员能够开展日益复杂的多色实验多色流式细胞术，其中最大的一项挑战就是选择合适的荧光染料和抗体组合，最大限度减少对补偿和重叠调整的需求，同时保证数据质量和准确度不受影响。首先了解多色方案的基本原理之后，使用Invitrogen™ eBioscience™ 流式配色工具可以帮助您快速简单的找到您实验中需要的流式抗体组合。
流式细胞术多色方案设计基本原理
- 流式仪器的配置（激光和滤光片）
- 低丰度抗原搭配明亮染料，对高表达抗原搭配弱的荧光染料
- 不同细胞亚群使用不同通道的荧光染料,避免荧光补偿
- 多色方案应包含细胞活性染料，避免死细胞导致假阳性数据
了解更多流式技术及配色方案，请点击视频 - 给细胞化个妆-流式荧光染料介绍及多色配色方案
流式配色工具5步解锁多色方案
Step 1. 从下拉选单选择流式仪及带通滤片
Step 2. 选择蛋白指标
- 先选择目标样本物种
- 最主要是图示第3个位置的抗体指标Antibody you need, 点击+Add antigens后加入蛋白指标，指标右边还可以根据蛋白表达量低/中/高,调整Low/Medium/High作为后续匹配荧光染料强度使用。
- 其它如果有实验室已使用中的抗体或是荧光蛋白跟细胞功能染料等可以一起加入panel设计,对应下图选择列表Antibody you already have and plan to use in your panel, Fluorescent proteins及 Non-antibody reagents.
Step 3. 根据前一步加入的蛋白指标表达丰度,工具会显示出可以提供的各种通道荧光抗体推荐阵列, 下方阵列表格里左上角的黑色三角标是根据步骤2您输入的蛋白表达丰度跟荧光染料强弱搭配原则推荐使用的通道。
点选其中一个通道，可以看到该通道里可以选用的不同荧光染料，及该染料的亮度Low-High，方便您逐一挑选合适的组合。
选定好通道跟抗体后，您可以从上方荧光光谱图确认整个panel荧光溢漏的情况
Step 4. 根据上一步选定的荧光组合,显示荧光通道可以选择的不同克隆号抗体货号，包含内部测试数据，已文献发表数量，价格包装等，点击链接看更详细的抗体介绍，建议用量及现货库存等信息
Step 5. 保存配色完成的方案,可储存成Excel或PDF档案请销售进行订购，如有赛默飞线上订购账号可直接提交订购。方案保存后还可以调出重新调整成新方案。
Step 1. 从下拉选单选择流式仪及带通滤片
Step 2. 选择蛋白指标
- 先选择目标样本物种
- 最主要是图示第3个位置的抗体指标Antibody you need, 点击+Add antigens后加入蛋白指标，指标右边还可以根据蛋白表达量低/中/高,调整Low/Medium/High作为后续匹配荧光染料强度使用。
- 其它如果有实验室已使用中的抗体或是荧光蛋白跟细胞功能染料等可以一起加入panel设计,对应下图选择列表Antibody you already have and plan to use in your panel, Fluorescent proteins及 Non-antibody reagents.
Step 3. 根据前一步加入的蛋白指标表达丰度,工具会显示出可以提供的各种通道荧光抗体推荐阵列, 下方阵列表格里左上角的黑色三角标是根据步骤2您输入的蛋白表达丰度跟荧光染料强弱搭配原则推荐使用的通道。
点选其中一个通道，可以看到该通道里可以选用的不同荧光染料，及该染料的亮度Low-High，方便您逐一挑选合适的组合。
选定好通道跟抗体后，您可以从上方荧光光谱图确认整个panel荧光溢漏的情况
Step 4. 根据上一步选定的荧光组合,显示荧光通道可以选择的不同克隆号抗体货号，包含内部测试数据，已文献发表数量，价格包装等，点击链接看更详细的抗体介绍，建议用量及现货库存等信息
Step 5. 保存配色完成的方案,可储存成Excel或PDF档案请销售进行订购，如有赛默飞线上订购账号可直接提交订购。方案保存后还可以调出重新调整成新方案。
常见问题 FAQ:
流式配色工具适合做什么？
流式配色工具可用于在线设计多色流式细胞术 panel，帮助研究人员根据实验需求、仪器配置和荧光特性选择更合适的抗体与染料组合。
多色流式 panel 设计时为什么要关注荧光重叠和补偿？
在多色流式实验中，不同荧光染料之间可能存在光谱重叠。合理设计 panel 有助于减少补偿复杂度，降低通道间干扰，并提升数据质量和结果可解释性。
如何根据抗原表达量选择荧光染料？
在设计多色 panel 时，通常需要结合目标抗原的表达量和荧光染料的亮度进行匹配。合适的搭配有助于提高目标信号的分辨能力，并优化整体 panel 表现。
流式配色工具是否可以结合流式仪配置使用？
可以。该工具支持结合流式仪配置、滤光片设置和荧光光谱信息进行 panel 设计，帮助用户选择更适合现有仪器条件的荧光组合。
设计完成后是否可以保存配色方案？
可以。完成 panel 设计后，用户可保存设计结果，并用于后续查看、整理或导出。
该工具适合哪些用户使用？
该工具适合需要进行多色流式细胞术实验设计的研究人员，尤其适用于需要快速评估荧光组合、优化 panel 配色和减少补偿问题的用户。
配色工具使用教学视频
