内容总结：

讲座系统介绍磁棒转移的磁珠纯化原理，比较乙醇沉淀、玻璃粉、硅胶膜与磁珠方法的优缺点。详细讲解KingFisher Flex与Duo Prime型号、磁头配置、温控与软件程序，展示高通量自动化提取的时间与回收率。覆盖病毒核酸、全血、转基因植物、FFPE、土壤与藻类样本，以及小RNA、蛋白pull-down、Protein A/G免疫沉淀与ChIP流程。深入说明cfDNA特征与NIPT优势，并以BRCA与EGFR案例阐述精准医疗及ctDNA液体活检的应用。

演讲者：周桃英 博士——赛默飞样品制备与分析应用专家

类型: 技术讲座

难度: 中级

目标受众: 生命科学研究人员、分子生物学技术人员、临床实验室技师

[00:00-09:59] 纯化方法介绍: 传统方法对比及磁棒法流程和注意事项

[10:00-16:59] 仪器型号和程序操作: 磁头更换和温控模块及软件

[17:00-24:59] 样本提取方法: FFPE和土壤及藻类流程和注意事项

[25:00-32:59] 蛋白流程操作: 免疫沉淀和ChIP流程及注意事项

[33:00-40:59] cfDNA和液体活检: NIPT方法和ctDNA监测及注意事项

学习目标：

  1. 掌握磁棒法的操作流程和关键步骤
  2. 理解不同核酸纯化方法的优缺点与适用场景
  3. 学习KingFisher仪器型号、磁头与温控配置
  4. 掌握病毒核酸、全血、FFPE、土壤与藻类的提取要点
  5. 理解cfDNA特征与NIPT流程及优势
  6. 学习Protein A/G免疫沉淀、pull-down与ChIP方法

基础概念：

  1. 磁棒法: 用磁棒转移磁珠进行吸附、清洗和洗脱的自动化纯化流程。
  2. KingFisher Flex: 支持96与24深孔磁头的自动化磁棒纯化仪，适配加热与高通量。
  3. KingFisher Duo Prime: 双板位磁棒纯化仪，含加热制冷模块与彩屏，适合中等通量。
  4. cfDNA: 循环游离DNA，血浆中的无细胞DNA，片段多为约166bp。
  5. NIPT: 无创产前检测，基于母体血浆cfDNA进行染色体异常筛查。
  6. Protein A/G: 与抗体Fc结合的蛋白，用于免疫沉淀与抗体纯化。
  7. 链霉亲和素-生物素: 高亲和体系，用于核酸或蛋白的pull-down分离。
  8. 二氧化钛富集: 利用TiO2对磷酸化肽的特异吸附进行富集纯化。