内容总结：

  1. 尿蛋白质组学在医学研究中进展
  2. 蛋白质组学在医学研究中的适用范围、方法流程和策略思路
  3. Orbitrap超高分辨质谱技术在转化医学中的应用

演讲者：北京师范大学教授 高友鹤、赛默飞质谱-蛋白质组学与生物制药市场经理 贾伟

类型: 技术讲座

难度: 中级

目标受众: 生命科学研究人员、临床医生、检验科与质谱工程技术人员

[00:00-09:59] 标志物定义方法: 定义讲解和判断注意事项

[10:00-19:59] 尿液来源比较方法: 尿与血对比和变异说明

[20:00-29:59] 尿液保存操作: 干膜保存流程及注意事项

[30:00-39:59] 质谱分类方法: 分辨率讲解和Orbitrap原理

[40:00-49:59] 组学流程操作: 样品处理和数据库搜索流程

[50:00-60:00] 修饰分析方法: 糖基化和磷酸化分析及验证

学习目标：

  1. 掌握生物标志物的定义及核心判定要点
  2. 理解血液与尿液在信息量与稳态上的差异
  3. 学习尿液样本干膜保存的流程及注意事项
  4. 掌握质谱分辨率与Orbitrap工作原理
  5. 理解Bottom-up蛋白质组学的完整分析流程
  6. 学习差异蛋白定量、相互作用蛋白与修饰分析方法
  7. 掌握蛋白质组学与基因组学结合用于抗体开发的流程

基础概念：

  1. 生物标志物: 可测得的与生理或病理生理相关的变化，用于反映疾病状态。
  2. 尿液标志物: 来源于尿液的分子指标，因血液稳态与肾排泄而富含病理相关变化。
  3. 内环境稳定: 血液与组织液维持稳定的生理机制，使血中变化相对受限。
  4. Orbitrap质谱: 高分辨率质谱技术，基于离子在电场中旋转产生感应信号进行质量测定。
  5. Bottom-up蛋白质组学: 蛋白经酶解为肽段后进行LC-MS/MS分析，并通过数据库搜索鉴定蛋白。
  6. 免疫共沉淀: 用特异抗体富集目标蛋白及其相互作用蛋白，再经质谱鉴定。
  7. AFP-L3核心岩藻糖化: 甲胎蛋白的特定糖型（核心岩藻糖化），为肝癌更特异的标志物形式。
  8. 稳定同位素标记: 用同位素标签区分样品肽段信号，实现相对定量比较。