宝宝的肠道舒不舒服，往往决定了一罐奶粉“好不好消化”。在众多配方成分中，低聚半乳糖（GOS）因其益生元作用，被视为让奶粉更接近母乳的重要一环。

但真正的营养价值，不能只写在配方表上——低聚半乳糖的作用，必须建立在“准确定量”的科学基础之上。

低聚半乳糖是一种以半乳糖或葡萄糖分子为基体连接1~7个半乳糖基的功能性低聚糖[1]，2007年，中华人民共和国原卫生部第12号公告首次批准GOS为食品添加剂新品种，使用范围为婴儿配方食品、较大婴儿和幼儿配方食品。2008年第20号公告批准GOS为新资源食品，使用范围扩增至乳制品、饮料、焙烤食品及糖果[2]。

奶粉中低聚半乳糖的检测方法有离子色谱法、高效液相串联质谱法等多种方法，GB 5009.289-2023方案作为近两年新发布的国标方法检测灵敏度高、结果准确，目前为乳制品行业配方奶粉中低聚半乳糖含量测定的主要方法之一。本文采用Vanquish液相色谱仪参照GB 5009.289-2023测定婴幼儿配方奶粉中低聚半乳糖的含量。

图1 婴幼儿配方奶粉
图1 婴幼儿配方奶粉

强大的仪器硬件与软件，互联互通！

Thermo Fisher Vanquish高效液相色谱仪，基座:Vanquish System Base，泵：Vanquish Core Quaternary Pump（VC-P21-A），自动进样器：Split Sampler CT（VC-A12-A），柱温箱：Vanquish Column Compartment C（VC-C10-A），检测器：Vanquish Fluorescence Detector C with Dual-PMT（VC-D51-A），色谱软件：变色龙Chromeleon 7.3。

图2 赛默飞Vanquish液相产品
图2 赛默飞Vanquish液相产品

优化分析条件，使分离度更优！

色谱柱：Accucore 150 amide Hilic (150 mm×4.6 mm，2.6μm)，流动相：A：50mmol/L甲酸铵溶液（pH=4.4±0.1），B：乙腈，梯度程序见表1。流速0.7mL/min，进样体积10µL，柱温30 °C；荧光检测器激发波长355nm，发射波长430nm。

表1 梯度洗脱条件

表1 梯度洗脱条件

对照品溶液和供试品分别按GB 5009.289-2023衍生处理后进样分析，液相色谱测定结果见图3-4。

呈现完美结果

方法线性

将配制好的工作曲线对照品溶液，衍生后注入高效液相色谱仪进行分析，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，考察方法的线性。结果显示，在3.00到500.00µg/mL浓度范围内一次线性良好。

表2 线性相关测定结果

表2 线性相关测定结果

含量测定结果

精密称取某奶粉样品1.0g两份，按照GB 5009.289-2023试样处理方法，制备供试品溶液，上机测定。采用变色龙软件峰组计算功能，将相同聚合度的低聚半乳糖归为一组，统一用对应该聚合度的对照溶液工作曲线进行计算，低聚半乳糖含量见表3。

表3 样品测定结果

表3 样品测定结果

结语

  1. 试验开始前，需采用液相色谱-质谱法对衍生后的低聚麦芽糖进行分析，监测LC-MS/MS仪器中不同聚合度糖的保留时间段，并根据LC-MS/MS与HPLC仪器间的死时间差确定HPLC测定的不同聚合度糖保留时间段；
  2. 试样测试前需通过GB 5009.289-2023中附录A方法的其他低聚还原性物质鉴别测试，如试样中其他低聚还原性物质总含量大于定量限，则本文方法不适用该试样的测定分析；
  3. 变色龙软件峰组计算功能可以实现多组分的归组积分、命名、结果计算和报告输出，操作简便，适用于该品种和《GB 5009.35-2023 食品安全国家标准 食品中合成着色剂的测定》等有类似需要进行色谱峰峰面积加和计算含量要求的品种。
  4. 赛默飞Accucore 150 Amide HILIC色谱柱分析婴幼儿配方奶粉中低聚半乳糖，混标和样品中待测物质均能实现有效分离，满足标准检测要求。