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帮助您解决mRNA疫苗研发难点

 

相比传统疫苗,mRNA疫苗通过体外转录合成,在开发和生产周期上有着明显的优势,成为对抗大规模爆发性传染病的新希望。同时,mRNA疫苗在肿瘤免疫领域有着广阔的应用前景:迄今为止,已被广泛尝试应用于包括前列腺癌、急性骨髓白血病、转移黑色素瘤、肺癌等多种类型肿瘤的治疗研究。

高效的mRNA疫苗需要:

  1. 最佳的mRNA稳定性和细胞摄取;
  2. 靶细胞如抗原提呈细胞(APCs)的细胞质传递和mRNA表达;
  3. 能够诱导人体所需保护性的适应性免疫应答。

针对mRNA疫苗研发,赛默飞提供从靶点筛选与发现、mRNA的生产、纯化、高效递送到分析方法建立的完整解决方案,帮助客户应对研发路径上的各项关键技术挑战,提升 mRNA 疫苗的有效性与安全性。

我们在mRNA疫苗研发中提供的工具和产品

 
  • 靶点筛选与发现
  • mRNA的生产
  • mRNA的纯化
  • mRNA的递送
  • 分析方法建立
 
Step1 靶点筛选与发现
 
 

mRNA疫苗开发的第一步是靶点抗原的筛选与发现。选择特异性的靶点对于mRNA疫苗开发至关重要。为筛选出合适的靶点,需对组织材料进行基因组分析和蛋白组分析,利用基因深度测序技术及蛋白质质谱分析技术来预测、识别和选择合适靶点。赛默飞可提供一系列创新型研究工具,覆盖核酸提取、反转录、PCR、二代测序文库制备、蛋白质质谱分析等,助您快速高效的进行靶点的筛选和发现。 

  • 基因组分析
  • 蛋白组分析

Applied Biosystems VeritiPro PCR仪全新上市

Applied Biosystems™ VeritiPro™ PCR仪在Veriti PCR仪的基础上进行全面升级,满足您现代化的实验需求。

  • VeriFlex技术 - 6区独立温度控制,梯度优化更精准
  • 更快的变温速率 - 6℃/s
  • 更静音 - 实验环境更舒适
  • 支持云功能和远程控制 - 随时随地监控您的仪器

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Invitrogen Platinum II Taq 热启动DNA聚合酶

Invitrogen™ Platinum™ Taq热启动DNA聚合酶上市二十多年来,已经被上千篇的文献引用。作为Platinum Taq热启动酶的升级版,新一代的Platinum II Taq热启动DNA聚合酶使用60°C通用的引物退火温度, 15 s/kb的快速扩增,同时耐受常见抑制剂能力增强,让PCR扩增变得更快、更简单。

  • 60℃通用引物退火温度——所有不同PCR反应均可使用同一种退火温度
  • Platinum热启动技术—确保超高特异性、灵敏度和产量;可在室温下配制反应体系
  • 性能强劲—15 s/kb的快速扩增,目的片段长达5kb,耐受常见抑制剂,稳健扩增高GC模板
  • 减少移液步骤——可提供含或不含上样染液的预混液

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Invitrogen SuperFi II 高保真DNA聚合酶

Invitrogen Platinum SuperFi II DNA 聚合酶是一种含热启动的校正DNA 聚合酶,可为您的 PCR 扩增提供卓越的保真度和特异性。凭借> 300xTaq的高保真度和可使用60°C 通用引物退火温度的独特缓冲液,Platinum SuperFi II DNA 聚合酶可为诸如分子克隆、测序和定点突变等需要高度扩增精确性的 PCR 实验应用提供高效性和便利性。

  • 卓越的准确度—>300xTaq超高保真度
  • 60℃通用退火温度—无需计算及优化退火温度,不同PCR反应可以同时进行扩增
  • 高效扩增困难样本——如高GC含量、长片段、纯度不佳的样本
  • 兼容自动化——Platinum抗体热启动技术,确保高特异性扩增

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Invitrogen SuperScript反转录酶

超过50000次的文献引用,Invitrogen™ SuperScript™系列反转录酶是第一链cDNA合成领域最值得信赖和最广泛使用的产品。从SuperScript II、SuperScript III到最新的SuperScript IV,一直引领着反转录领域的创新。

  • SuperScript IV Reverse Transcriptase——10分钟完成反转录,耐受反应抑制剂
  • SuperScript IV First-Strand System——试剂盒包含RT反应所需的所有组分
  • SuperScript IV VILO Master Mix——方便的一管式预混液,专为RT-qPCR而优化
  • SuperScript IV CellsDirect cDNA Synthesis Kit——直接从细胞中进行cDNA合成,无需RNA分离纯化

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Invitrogen Collibri 文库制备试剂盒

Invitrogen Collibri NGS文库制备系列产品旨在助力快速高效的制备NGS测序文库,适用于Illumina高通量测序平台。系列产品覆盖全基因组测序、RNA测序、文库定量和文库扩增。

  • Collibri DNA Library Prep Kit——对于测序困难区域(如bad promoters、high GC)的覆盖度优于同类产品,即使针对FFPE样本
  • Collibri Stranded RNA Library Prep Kit——独特建库流程可最大程度保留样本的复杂度,可高效检测non-coding RNA
  • Collibri 3′mRNA Library Prep Kit——仅对mRNA 3’末端短序列进行测序,大幅降低全基因组表达分析成本

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Invitrogen dNTPs & NTPs

我们提供多种形式、配方和体积的高质量核苷酸,四种核苷酸可单独提供,也可以适当浓度的核苷酸混合液形式提供,并提供不同浓度和规格的包装。

  • 化学合成
  • pH 7.5
  • 经HPLC验证,其纯度大于99%
  • 在–20°C下保存限期长达2年
  • 无DNase、RNase 以及qPCR,PCR和反转录抑制剂的污染
  • 无人类和E. coli DNA

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Invitrogen PureLink无内毒素质粒纯化试剂盒

Invitrogen PureLink无内毒素质粒纯化试剂盒制备用于敏感细胞系高级转染的无内毒素质粒DNA,可节省长达90分钟的时间。试剂盒结合强化树脂与真空辅助工作流程,可将纯化时间大幅缩短至90分钟以内,约为标准无内毒素方案所需时间的一半。 

  • 节省大量时间——纯化无内毒素质粒DNA只需90分钟
  • 高产量——用大提、超大量提取和宏量提取试剂盒分离,产量分别高达1.5 mg、5 mg和15 mg
  • 高品质、高级转染级、无内毒素质粒——质粒的内毒素含量低于0.1 EU/μg,非常适合对灵敏度要求高的应用

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Applied Biosystems PCR耗材

Applied Biosystems™ PCR耗材均在10, 000级洁净车间工厂生产,确保无DNAase和RNAase和人源DNA,独立包装,具有良好的批间一致性,为快速高效的PCR扩增提供精确和均一的温度。这些耗材经严格验证,与Applied Biosystems™ 荧光定量PCR仪和测序仪完美兼容,如7300、7500系列、QuantStudio系列、 StepOne系列、ViiA7和3130等。

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Applied Biosystems ProFlex PCR 系统

Applied Biosystems™ ProFlex™ PCR系统秉承Applied Biosystems™所具备的可靠性能,采用了灵活的配置和控制功能,可适应您现在和未来的工作方式。可更换式加热模块能够实现最高通量或同时运行多项独立实验。ProFlex PCR系统支持云功能,您可以使用Thermo Fisher Connect,从任何移动设备或台式电脑上自由设计和安全上传您的程序、监视运行并检查仪器的可用性。

  • 允许多位用户使用—同时运行三个不同的实验
  • 灵活的模块配置—可更换五种不同加热模块,以优化和调整通量
  • 支持云功能—随时随地访问您的仪器

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Qubit 荧光计——微量核酸精准定量

Invitrogen™ Qubit™ 荧光计用于快速、特异性地定量 DNA 或 RNA,专为珍贵样品和重要应用设计。最新款Qubit Flex 荧光计可同时测8份样品更高效,大大节约数据采集时间至少50%;经典的 Qubit 4荧光计有助于快速可靠测量 RNA 完整性和质量(RNA IQ)

  • 基于荧光染料法,可选择性特异性只结合DNA、RNA或蛋白质
  • 比紫外吸光度法更特异灵敏,可检测低至10 pg/μl 的DNA
  • 节省珍贵样品:仅使用低至 1 μL样品

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生物标志物

生物标志物在改善疫苗开发过程中起着至关重要的作用。通过识别病原体,进行基因组和蛋白质组的分析,进而用于指导疫苗的开发。赛默飞可以为蛋白质组生物标志物研究,提供快速,准确的支持方案,能够极大提高筛选疫苗靶标的通量。

  • 强大 - 利用TMT技术,能对多达16个样品进行相对定量分析,样品来源广泛,细胞、组织或生物体液均可
  • 全面 - 提供全流程样品处理方案,质谱蛋白样品制备,高丰度蛋白去除,肽段制备和定量等多种工具
  • 快速 - 更高通量和更优化的组合设计,可以极大缩短生物标志物鉴定和分析的时间

质谱奖励计划手册  了解更多  蛋白质质谱分析样品制备流程

 
Step2 mRNA的生产
 
 

选择合适靶点后,需要小规模或批量合成靶点mRNA,同时需要对mRNA进行修饰以增强mRNA稳定性及其蛋白翻译能力。随着mRNA疗法的加速发展,常规的、研究级的体外转录试剂已不能完全满足需求,需要按照更高质量标准专门设计和生产的原材料。除了可提供常规研究级的体外转录试剂,赛默飞还可提供专用于mRNA疗法的TheraPure试剂,其具有超高纯度且不含动物源成分,适用于工业级规模化生产。

  • 体外转录试剂盒
  • OEM原材料解决方案

mMESSAGE mMACHINE™ T7 ULTRA Transcription Kit AM1345

  • 含T7启动子的模板DNA,单次反应合成20~30μg的0.3~5kb加帽加尾的RNA
  • 专利ARCA帽子,更高的活性,同时提供加尾试剂
  • 加帽加尾增强RNA稳定性,有利于提升下游蛋白产量
  • 每次反应可产生20-30μg的RNA
  • 显微注射实验、体外翻译或转染的理想之选

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mMESSAGE mMACHINE™ T7 Transcription Kit AM1344

  • 高产量的加帽RNA - 每次T7或T3反应可产生高达 39 μg 的加帽RNA
  • 额外的便利性 - 提供加帽核苷酸类似物混合液
  • 简单的反应样式
  • 合成的转录产物是显注射实验、体外翻译或转染的理想之选

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MEGAscript™ T7 Transcription Kit AM1334

  • 纯粹合成RNA单链,不加头或尾(客户根据自己的需求加帽、加尾)
  • 产量是传统体外转录试剂盒的10倍以上( 产量:100 µg RNA/反应 )

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Invitrogen TheraPure mRNA合成试剂

TheraPure表明我们的mRNA合成试剂具有超高纯度,其经高分辨检测并按严格控制的纯度标准进行生产。我们的TheraPure产品线为mRNA合成提供独特的完整解决方案,覆盖体外转录、转录后修饰及模板降解等流程。

  • 无动物源(AOF)和无氨苄青霉素(AF)酶 - 我们的生产过程消除了朊病毒带来的潜在致病风险。从发酵到酶配制整个生产过程中,动物源组分均被AOF组分取代。
  • 高纯度NTP和修饰核苷酸 - 我们提供的核苷酸按照严格的纯化过程进行生产,三磷酸盐纯度大于99%(通过定量HPLC测定)。严格的纯化过程消除了单磷酸盐、二磷酸盐以及大分子(如DNase和蛋白酶)的交叉污染。同时核苷酸还可进行多种修饰以增强特殊性能,如增加核酸酶抗性、提高翻译效率和降低免疫原性等。

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Step3 mRNA的纯化
 
 

通过体外转录获取mRNA包括多个纯化步骤。传统的酚氯仿或离心柱法纯化容量有限,且不适合用于自动化。基于磁珠的纯化技术更为灵活,体系可扩展且适合用于自动化。基于Invitrogen Dynabeads MyOne Carboxylic acid 和特有结合缓冲液的纯化方法可实现更高的mRNA回收率。

  • 小规模纯化
  • 大规模纯化

MEGAclear™ Transcription Clean-Up Kit AM1908

  • 可以快速有效地从游离核苷酸、酶和缓冲液组分中分离高纯度RNA
  • 适用于转染和显微注射等下游应用
  • 过柱法纯化RNA,不含未整合的NTPs、酶和缓冲液成分
  • 高回收率,样品含量从1ng到500μg都可使用
  • 简单快速,30分钟内完成RNA纯化。

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Invitrogen™ Dynabeads™ MyOne™ Carboxylic Acid

  • 是体外诊断分析中理想的固体载体
  • 捕获特定的 DNA/RNA 序列、蛋白质或任何其它待测物
  • 磁性迁移率高, 沉降速率低, 更高载量:1.6 mg RNA/ mgbeads

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Invitrogen™ DynaMag™-50 磁力架

  • 经过优化,特别为Dynabeads 设计
  • 具备有效分离所需的强大磁力
  • 结合了灵活巧妙的人类工程学设计
  • 各种尺寸磁力架的设计可搭配任何种类的 Dynabeads 应用于任何起始样本

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Step4 mRNA的递送
 
 

mRNA自身稳定性差,直接进入体内会被降解,因此,高效的mRNA递送是疫苗药效的保证。递送方式主要包括:1. 利用载体将mRNA注入体内,常用载体包括包括脂质体和DC细胞;2. 直接将mRNA注入体内,可以通过体内转染试剂直接将mRNA注入体内;3. 通过物理递送方法直接穿透细胞膜,将mRNA注入细胞内。

  • 体外递送

Lipofectamine MessengerMAX

专用于mRNA递送的转染试剂,转染效率可达DNA试剂的5倍。

  • 引人注目的性能 - 即使在神经元和原代细胞中,也能获得60%以上的转染效率;
  • 快速 - 基于mRNA的转染,可实现更快速的蛋白表达,无基因组整合风险;
  • 专用于mRNA递送

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Neon转染系统 - 卓越的电穿孔性能

Neon转染系统是新一代电穿孔技术,可将核酸(DNA和siRNA)或蛋白质高效(效率约为80%)输送至几乎任意一种动物细胞中。研究表明,该系统能够对多种难以转染的细胞进行转染,例如原代细胞、干细胞和造血系统来源的细胞等。

  • 高效 - 在多种细胞类型中活得超过80%的转染效率,包括难转染的细胞,如原代细胞和干细胞;
  • 灵活 - 每次可轻松转染2*10^4-6*10^6个细胞;
  • 简单 - 通用的试剂盒适用于所有细胞类型;
  • 易用 - 只需三步操作;
  • 多功能 - 开饭的系统,可轻松调整电击强度、电击时长和电击次数

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Step5 分析方法建立
 
 

mRNA疫苗和其他疫苗一样,安全性和有效性是其开发是否成功的关键指标。疫苗进入体内后的吸收分布,引起的免疫原性和毒性,以及疫苗的功能性等,均是检验安全性和有效性的重要方法。

  • 免疫原性分析
  • 功能分析(宿主免疫反应)
  • 毒性分析

ELISA 检测系统,Varioskan LUX检测平台

Thermo Scientific™ Varioskan LUX™ 多功能酶标仪作为通用检测平台,可进行包括光吸收、荧光、化学发光、时间分辨荧光、HTRF、 FRET、Alpha 等多种方式检测。即可与Invitrogen 即用型高敏ELISA 试剂盒配合使用,也可与定制组装的特定免疫检测反应试剂搭配。赛默飞也提供定制的高质量耗材,ELISA 底物,封闭液和抗体,以灵活制备所需检测。

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ProQuantum高灵敏免疫检测试剂

ProQuantum 检测利用基于邻位连接测定(PLA™)技术,为分析物提供了抗体-抗原结合特异性以及 qPCR 信号检测和扩增功能,实现了高灵敏度检测。与传统方法相比,ProQuantum 仅需5ul的样品即可检测低水平蛋白。

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Invitrogen 高级验证抗体

超过10万种抗体,涵括冠状病毒,干细胞,癌症,神经生物,表观遗传等多种研究领域.应用于WB,IHC/ICC,IP/COIP及流式不同应用,推荐使用经过Invitrogen高级验证的高品质抗体,结合全新Alexa Fluor Plus高信噪比荧光二抗获取最佳图像。

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多重蛋白及基因分析平台

利用Luminex平台技术,磁珠结合抗体或探针,即可实现单孔使用少量的样品检测65细胞因子或是80种基因的表达,ProcartaPlex多因子及QuantiGene Plex多基因试剂盒,使用更少的样品分析更多的生物标记物。

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流式细胞术整体解决方案(Attune NxT流式细胞仪 + 免疫细胞分析)

流式细胞术可用于对于药物可能引起的免疫反应及细胞功能变化进行检测分析。我们专为实现高效能结果、节约实验室时间而设计,以此为细胞及其功能分析提供全方位解决方案。

Invitrogen Attune NxT流式细胞仪具有以下技术优势:

  • 高效—上样速度比传统流式细胞仪快10 倍
  • 灵活—5种激光器,多达16个通道可供选择
  • 创新—采用抗堵设计,可检测普通流式细胞仪难以处理的样品
  • 简化—全血样品制备免洗免裂解,缩短样本处理时间

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Invitrogen eBioscience 流式抗体试剂

  • eFluor 抗固定液染料
  • Super Bright 超亮紫光染料
  • 流式辅助试剂
  • 适用于所有流式细胞仪

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EVOS 3D数字共聚焦成像分析系统

EVOS显微成像系统,去除了传统显微镜的复杂操作,同时又不影响其高成像品质。它将倒置显微镜工作站的各方面功能融合为一体,只需打开一个按钮,几分钟之内便可熟练掌握。无论你采集的图像用于出版、教学还是研究,这些仪器均可助您更轻松、智能、快捷地实现。妙的是,EVOS系列专为成像全面解决方案而设计——从最初的细胞培养观察(细胞活性和形态)到复杂的功能性分析(如时间延时拍摄、图像分割/拼接等)。

  • 智能化设计
  • 无目镜安全防护
  • 孔板快速扫描
  • 无缝大图拼接
  • 易学易维护

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Invitrogen Molecular Probes荧光标记检测试剂

Invitrogen Molecular Probes荧光标记及检测产品是全球公认的,获得出版级高质量荧光图像所需的必要关键工具之一,被誉为“荧光标记及检测专家”。该品牌下的拥有很多试剂和成像精炼成分都可获得生物相关 、信息丰富的图像。在使用功能探针、标记和复染剂后,往往需要加入其他工具来获得出色的细胞图像。

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ViewRNA ISH Cell Assays

ViewRNA ISH Cell Assays 试剂盒,利用bDNA专利信号放大技术,实现单细胞水平可同时检测4种RNA,灵敏度可达单拷贝数级别,根据研究需要定制探针,回答更多细胞内RNA分布情况。

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蛋白制备

高质量的蛋白样品制备,是下游蛋白分析与检测的起点。赛默飞提供种类齐全的优化工具,可高效进行蛋白质的提取和组分分离,并广泛抑制多种蛋白酶和磷酸酶活性。便利的小装置以及高性能亲和树脂、磁珠可为蛋白质和抗体的纯化,富集和除杂等下游应用实现产量最大化。

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Western Blot 流程

赛默飞 iWestern 流程旨在提升实验效率、提高数据重现性和结果可靠性,致力于以最少的手动操作时间实现卓越的免疫印迹结果。借助我们的iWestern 工作流程,您在实验室中的生活将会变得更轻松、更省时,让您腾出时间专注于最重要的事情 - 数据分析,并对研究进行深入思考。

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CellInsight 高内涵毒性检测分析平台

CellInsight™ 高内涵系列,可灵活搭载Onstage Incubator活细胞工作站和全自动上样机械臂,实现快速完成全自动高通量多孔板超高质量的图像扫描,为抗体药物研发、病毒疫苗开发检测等相关细胞分析研究带来全新的完整解决方案,特别是基于细胞毒性分析应用可基于其超多参数的获取和多维分析,为毒性分析带来更具评价价值的高质量数据基础。CellInsight™系统还提供了更多灵活的组合及不同配置,可根据实际应用需求完成快速扫描及高效分析多参数图像数据。

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高通量 Invitrogen 细胞活性/毒性分析试剂

Invitrogen™ Molecular Probes™ 荧光标记试剂专注荧光领域40多年,可提供多样化的检测方法,用于细胞活性与活力、细胞毒性等功能分析,以荧光或比色法为基础,具有高灵敏度和便捷性,且已在多种仪器平台上验证,如显微镜、流式细胞仪、酶标仪以及高内涵筛选仪器等。

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网络研讨会

加速进程,疫苗研发难点—研发策略、临床探索及原料选择

直播时间:11月17日(周二)
20:00-21:30

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稳健前行,疫苗研发关键—安全性及免疫效力评价

直播时间:11月24日(周二)
20:00-21:00

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