内容总结：

  1. 总结干细胞及很多原代细胞常见的一些三维培养方法特别是NUNC Sphera超低吸附表面对于三维细胞培养的支持作用。
  2. 介绍一切简单易行的细胞检测技术在三维培养中的应用。

演讲者：陈钺 博士——赛默飞资深产品专家

类型: 技术讲座

难度: 中级

目标受众: 生命科学研究人员、细胞培养技术人员、药物筛选和干细胞研究团队

[00:00-09:59] 细胞培养流程: 概念介绍及注意事项

[10:00-18:59] 3D与2D方法: 条件差异及方法

[19:00-27:59] 肿瘤与干细胞方法: 微环境和差异及注意事项

[28:00-36:59] 3D体系方法: 支架和无支架流程

[37:00-45:59] 超低吸附方法: 板型和建球流程

[46:00-55:59] 荧光检测方法: 增殖及活死和ROS

学习目标：

  1. 掌握三维细胞培养与二维培养的核心差异及动因
  2. 理解PS表面处理、培养基选择与CO2缓冲的要点
  3. 掌握支架型与非支架型三维体系的优缺点和应用场景
  4. 学习使用超低吸附U型底96孔实现一致建球的方法
  5. 掌握三维体系下增殖、活死与ROS的荧光检测思路

基础概念：

  1. 三维细胞培养: 在非贴壁或支架环境下形成球状或结构化细胞团，模拟体内微环境。
  2. 超低吸附表面: 通过表面封闭降低蛋白与细胞吸附，促进细胞自聚形成单一球体。
  3. 悬滴法: 将细胞悬滴倒置培养，利用重力使细胞在滴底聚集成球。
  4. 水凝胶支架: 以胶原或基质胶等材料形成三维基质供细胞生长。
  5. 胚样体（EB）: 多能干细胞在三维条件下形成的球体，可向三胚层分化。
  6. LD50: 半数致死剂量，用于评估药物对细胞的毒性强度。
  7. 5% CO2-碳酸氢钠缓冲: 通过培养基NaHCO3与CO2配比维持pH稳定的体系。