内容总结：

视频介绍抗体基础、应用及其在科研中的关键作用，强调特异性与功能性验证的重要性。系统解读国际抗体验证工作组提出的五种验证策略，包括基因策略、正交策略、独立抗体策略、标签蛋白策略和IP-MS。详述基因敲除/敲低与IP质谱流程、对照设置、富集分析及互作与翻译后修饰的识别。最后讲解产品页面筛选、验证标记与外部文献支持，帮助合理选择与使用抗体。

演讲者：江倩 博士 赛默飞技术支持专家

类型: 技术讲座

难度: 中级

目标受众: 生命科学研究人员、分子生物学实验人员、抗体研发与应用用户

[00:00-09:59] 抗体基础方法: 一抗二抗和应用及注意事项

[10:00-16:59] 验证策略方法: 五种策略概述及使用说明

[17:00-24:59] 基因策略操作: 敲除和敲低检测及注意事项

[25:00-33:59] IP质谱流程: 对照设置和富集分析及注意事项

[34:00-38:00] 应用验证操作: Western和筛选方法及页面使用

学习目标：

  1. 掌握一抗与二抗的作用和差异
  2. 理解线性与构象表位的应用场景
  3. 学习五种特异性验证策略的核心思路
  4. 掌握基因敲除/敲低的验证步骤和判读
  5. 理解IP-MS流程与对照设置及富集分析
  6. 学习抗体功能验证与产品筛选方法

基础概念：

  1. 一抗（Primary antibody）: 直接识别靶蛋白特异性表位的抗体，用于结合目标蛋白。
  2. 二抗（Secondary antibody）: 与一抗特异结合并携带标记，用于信号放大与检测。
  3. 单克隆抗体: 识别单一表位的抗体，来源于特定克隆的杂交瘤细胞。
  4. 多克隆抗体: 血清中针对同一抗原多个表位的抗体混合物。
  5. 抗原表位（线性/构象）: 抗体识别的短序列或结构位点，决定结合特异性。
  6. 正交策略: 用非抗体定量方法与抗体结果比对以验证特异性。
  7. 独立抗体策略: 使用针对不同表位的两支抗体比对定量结果。
  8. 免疫沉淀质谱（IP-MS）: 通过IP富集结合蛋白并用质谱鉴定，判定靶与互作及非特异。
  9. CRISPR敲除/RNAi敲低: 在基因水平消除或降低靶基因表达以验证抗体识别。