内容总结：

  1. 神经退行性疾病的概述
  2. 神经退行性疾病蛋白质研究思路与方法
  3. 蛋白实验常见问题和解决方案

演讲者：徐静 博士——赛默飞生命科学产品技术应用专家

类型: 技术讲座

难度: 中级

目标受众: 生命科学研究人员、神经科学方向研究生、实验技术人员

[00:00-10:00] 疾病概述流程: 大脑数据及疾病概述和蛋白折叠

[10:00-20:00] 阿尔茨机制方法: Aβ与Tau生成及细胞阶段和治疗

[20:00-30:00] 蛋白定量方法: ELISA和Luminex检测及样品准备

[30:00-40:00] Western优化流程: 背景和非特异及弱信号处理

[40:00-45:00] 免疫荧光方法: 切片制备及背景与信号优化

学习目标：

  1. 掌握阿尔茨海默病中Aβ与Tau的生成机制
  2. 理解蛋白样品保存的温度、浓度及添加剂注意事项
  3. 学习ELISA与Luminex的原理、优缺点和应用场景
  4. 掌握质谱蛋白质组的样品制备与自下而上流程
  5. 理解Western blot与免疫荧光常见问题及优化方法

基础概念：

  1. 蛋白错误折叠: 天然蛋白构象异常并形成粘性寡聚体与纤维，诱发毒性聚集。
  2. Aβ（淀粉样蛋白β）: 由APP经β-与γ-位点水解产生，易聚集成斑块。
  3. Tau高磷酸化: 微管相关蛋白过度磷酸化后脱离微管并形成神经纤维缠结。
  4. 自噬体-溶酶体途径: 包裹大蛋白复合物或细胞器并降解清除错误折叠蛋白。
  5. ELISA双抗夹心法: 以捕获抗体与检测抗体夹心抗原并用底物读出定量。
  6. Luminex多重检测: 荧光编码微球承载不同捕获抗体，实现多指标同时定量。
  7. 质谱蛋白质组学: 自下而上经酶解肽段分离鉴定与定量的分析流程。
  8. 小胶质细胞激活: Aβ聚合物诱发炎症反应并上调促炎因子，损伤神经元。