Bac-to-Bac™ 载体试剂盒

Bac-to-Bac™ 载体试剂盒包含一个 pFastBac™ 1 载体以及一个表达对照载体，作为 Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达系统的一部分使用（货号：10359-016），可有效生成用于昆虫细胞表达检测的重组杆状病毒。Bac-to-Bac™ 系统依赖于通过大肠杆菌位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组杆状病毒生成（图1）。该系统具有以下特性：

•节省时间的表达杆状病毒质粒。凭借 Bac-to-Bac™，pFastBac™ 载体表达盒与 DH10Bac™ 大肠杆菌感受态细胞（不包含在该载体试剂盒内）中的亲本杆状病毒质粒重组，以形成表达杆状病毒质粒。然后，杆状病毒质粒转染到昆虫细胞中以生成重组杆状病毒颗粒。
•简单的菌落筛选。DH10Bac™ 大肠杆菌中的亲本杆状病毒质粒包含一个 lacZα 基因片段。lacZα 基因在将表达盒转位为杆状病毒质粒的过程中被破坏，以实现重组体的蓝白斑筛选。这使得识别重组菌落变得容易。
Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达系统设计用于快速、小规模生成重组杆状病毒。该试剂盒提供的 pFastBac™ 1 载体可提供强多角体蛋白启动子以用于蛋白表达，以及大型多克隆位点以简化克隆。