外泌体-人 CD9 分离试剂(来自细胞培养物)
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外泌体-人 CD9 分离试剂(来自细胞培养物)

外泌体-人 CD9 分离试剂(来自细胞培养物)能够从富集的细胞培养基分离 CD9-阳性细胞外囊泡(ECV),如外泌体。分离后,可以采用诸如 Western了解更多信息
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外泌体-人 CD9 分离试剂(来自细胞培养物)能够从富集的细胞培养基分离 CD9-阳性细胞外囊泡(ECV),如外泌体。分离后,可以采用诸如 Western 印迹、qPCR 或下一代测序等方法进一步研究外泌体/ECV 的特定亚群。

•更大程度地缩短特异性外泌体分离的手动操作时间

• 获得高纯度的外泌体子集

• 协议易于扩展

• 兼容大多数下游分析

近期研究表明,外泌体/ECV 群体由几个子集组成,可能具有不同的功能。采用基于免疫亲和力的 Dynabeads™ 磁性分离技术,可以选择性地分离和研究这些子集。必须首先富集外泌体的细胞培养基。这可以使用 Total Exosome Isolation Reagent(来自细胞培养基)或传统的超速离心快速高效地完成。富集后,通过结合磁珠表面分离特异性外泌体。

Dynabeads™ 磁珠因其灵敏度、重现性和稳定性而闻名。Dynabeads™ 磁性分离技术还因磁珠的颜色而有助于您在操作过程中“看到”样品。当将样品管放入磁力架时,微珠结合外泌体会被拉至样品管的侧面,便于轻松分离和更换缓冲液。此外,可以根据您的样品大小或下游应用轻松扩展样品和微珠体积。

注:务必充分混合以确保磁珠不会沉淀在样品管中。我们推荐使用可提供倾斜和旋转的混合器,以实现理想混合效果。
仅供研究使用。不可用于诊断程序。
规格
产品线Dynabeads™
数量2 mL
样品类型细胞培养
产品类型分离试剂
Unit SizeEach
内容与储存
储存在冰箱 (2–8°C) 中。

常见问题解答 (FAQ)

你们能否提供一些应用Dynabeads磁珠分离外泌小体的参考文献或相关引用?

可以。请参见此海报(https://tools.thermofisher.com/content/sfs/posters/Exosome-poster-ISEV-2013-Boston.pdf)。

此外,这里还有一些相关引用:
•Blood 91:2573 (1998)
•Science 289:444 (2000)
•J Physiol 537:537 (2001)
•Mol Cell Proteomics 12:587 (2013)
•Biol Reprod 81:717 (2009)

凭借不同的膜表面标志物分离出的外泌小体之间会存在差异么?

是的,基于不同的膜表面标志物所分离外泌小体中的蛋白表达谱之间会有明显差异。这一结论由Tauro等(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23230278)的研究证实,该研究团队基于EpCAM或A33这两种膜表面标志物,从人癌细胞系的条件培养基中分离出两群明显不同的外泌小体。蛋白组学研究结果显示这两群外泌小体是独特的。

我希望使用Dynabeads磁珠来分离外泌小体,你们推荐何种产品?

我们拥有多款外泌小体分离试剂盒,包括外泌小体—人源CD63(货号10606D),外泌小体—人源CD9(货号10614D),外泌小体—人源CD81(货号10616D)和外泌小体—人源EpCAM,适用于凭借这些常用的外泌小体膜表面抗原来实现外泌小体分离操作。如果您希望使用您的自备抗体通过其他特异性膜表面标志物来分离外泌小体,您也可使用我们的Dynabeads外泌小体免疫沉淀(ProteinA,货号10610D),Dynabeads外泌小体免疫沉淀(ProteinG,货号10612D)或用于分离/检测的外泌小体—链霉亲和素产品(货号10608D)。此外,用户也可选用抗小鼠IgG的Dynabeads磁珠(货号11031或11033)和识别特定膜表面标志物的小鼠单抗来实现外泌小体分离操作。

如何鉴定外泌小体?

一般通过流式细胞仪(使用CD9、CD63、TSG101和Alix等膜表面标志物)来鉴定外泌小体,通过EM来研究其形态和尺寸,或凭借LC-MS/MS来实现更为详细的蛋白分析。

分离外泌小体的常用膜表面标志物有哪些?

这些标志物要基于外泌小体的细胞来源进行选择。最常用于外泌小体分离和鉴定的膜表面标志物为CD9、CD63、CD81或TSG101。下表列举了一些最近用于鉴定或分离外泌小体的参考文献和膜表面标志物:

膜表面标志物

参考文献
Alix, CD63, EpiCam, HSP70, TSG101
Mol Cell Proteomics 12:587 (2013)

CD9, CD63
Hum Mol Genet 21:R125 (2012)

CD63, MHC II
J Biol Chem 278:52347 (2003)

CD9, CD81, Lamp1, TSG101
Cancer Res 67:7458 (2007)

CD63
Nature Cell Biol 9:654 (2007)

Alix, CD37, CD53, CD63, CD81, CD82, TSG101
J Cell Biol 200:373 (2013)

CD59, CD63, CD133, TSG101
FASEB J 23:1858 (2009)