Sf9与Sf21细胞应是贴壁较弱的细胞。不过,某些Sf9和Sf21细胞能够非常紧密地贴附于培养容器。我们尝试使用过胰酶,胶原酶,透明质酸酶,TrypLE Express和的TrypLE Select,均未能成功传代细胞。几次传代之内细胞还可能会解离,但之后就无法有效解离了。
最佳的方法是在T-培养瓶中培养细胞。盖紧瓶盖,并以瓶盖朝上的方向抓住培养瓶,在台面上以中等力量敲击瓶底2-3次,将会有60%-80%的细胞解离下来,但不会达到100%,这样就有足够的细胞解离下来用于传代。如果在台面敲击培养瓶过于猛烈或次数太多,细胞活力将受到很大影响。
在可能条件下,我们推荐您以悬浮条件培养您的细胞。如果需要的话悬浮培养的细胞可随时直接传代至贴壁培养的条件。悬浮培养的细胞也能够达到更高的细胞密度,因为细胞生长不受限于表面积。