SuperScript™ VILO™ cDNA 合成试剂盒
SuperScript™ VILO™ cDNA 合成试剂盒
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SuperScript™ VILO™ cDNA 合成试剂盒

SuperScript VILO cDNA 合成试剂盒用于生成两步法 RT-qPCR 应用所需的第一链 cDNA。该试剂盒以 2 管的形式提供,包括含有了解更多信息
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SuperScript VILO cDNA 合成试剂盒用于生成两步法 RT-qPCR 应用所需的第一链 cDNA。该试剂盒以 2 管的形式提供,包括含有 VILO 反应混合物的单管和含有酶混合物的单管。该酶混合物之中含有一种 SuperScript III 反转录酶 (RT),这是一种经过基因工程改造的 MMLV RT,具有更低的 RNase H 活性、更高的热稳定性,可实现高效的 cDNA 合成。该试剂盒可用于从不同起始量的 RNA 合成 cDNA。

注:为在两步法 RT-qPCR 中实现更出色的第一链 cDNA 合成性能,我们推荐使用 SuperScript IV VILO 预混液含 ezDNase 酶的 SuperScript IV VILO 预混液。该预混液为便利的单管预混液规格,其中包含了 cDNA 合成反应所需的所有组分。凭借高持续合成能力、热稳定的 SuperScript IV RT 及进一步优化的缓冲液,其将可靠的 VILO 技术提升至全新维度。该预混液支持在更短的时间内以更高的温度高效地进行 cDNA 合成,即便纯度欠佳或模板有限的情况下,也能够获得出色的 cDNA 得率和灵敏度。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
最终产品类型第一链 cDNA
产品规格试剂盒
反应次数250 次反应
最佳反应温度42°C
数量250 次反应
反应形式预混液
试剂类型反转录
逆转录酶SuperScript III
核糖核酸酶 H 活性减少
运输条件干冰
尺寸(最终产品)长达 10 kb
原始材料RNA
技术反转录
检测方法qPCR
适用于(应用)实时 PCR (qPCR)
高 GC PCR 扩增效果
反应速度60 min。
Unit SizeEach
内容与储存

• 5X VILO 反应混合物
• 10X SuperScript III 酶混合物

在 –30°C 至 –5°C 条件下储存。

常见问题解答 (FAQ)

SuperScript III反转录酶和SuperScript VILO试剂盒之中的反转录酶有何区别?

SuperScript VILO cDNA合成试剂盒含有SuperScript III反转录酶和辅助蛋白的混合物,其中后者可以提高反转录反应的效率,进而提高得率。由于存在辅助蛋白,SuperScript VILO中的反转录在42°C条件下活化。

PCR反应要加入多少第一链cDNA反应产物?

尽管实际体积取决于用于第一链合成反应的RNA起始量和靶标基因的丰度,但我们建议使用10%的第一链cDNA反应产物进行PCR反应。

How long can I store the cDNA from my reverse transcription step?

You can store your cDNA at 2-6 degrees C for up to 24 hours. For long-term storage, store the cDNA at -15 to -25 degrees C and add EDTA to a final concentration of 1 mM to prevent degradation.

What is the difference between SuperScript III RT and the RT in the SuperScript VILO kit?

The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript

The SuperScript VILO cDNA Synthesis Kit (Cat. No. 11754050) contains a mix of SuperScript III RT and helper proteins which help to increase the efficiency of the reverse transcription reaction and thus improve yield. The RT in the SuperScript VILO kit is active at 42 degrees C due to the helper proteins.

How much of the first-strand cDNA reaction should I load for PCR?

While the volume is dependent on the starting amount of RNA used for the first-strand synthesis and the abundance of the target gene, we'd recommend starting with 10% of the first-strand reaction for your PCR reaction.