AccuPrime™ 高 GC 含量 DNA 聚合酶
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AccuPrime™ 高 GC 含量 DNA 聚合酶

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AccuPrime™ 高 GC 含量 DNA 聚合酶旨在为难以扩增的模板(例如 GC 含量为>65% 的模板)进行高产量、高特异性的扩增。该试剂盒为扩增基因组 DNA 靶标(缓冲液 A )或非高 GC 含量 cDNA、质粒和 λ 靶标(缓冲液 B)提供了多种缓冲液选择。使用 AccuPrime™ 高 GC 含量 DNA 聚合酶的优势:

产量—对长度高达5kb 的靶标具有高产量
特异性—AccuPrime™ 辅助蛋白可提高 PCR 特异性
灵敏度—灵敏度低至5ng 模板 DNA

具有特异性的稳健扩增
AccuPrime™ 缓冲液含有可增强 PCR 过程中引物-模板杂交的热稳定性蛋白,提高了反应的特异性。来自古细菌 Pyrolobus fumarius 的聚合酶,其本身的合成能力比 Taq DNA 聚合酶提高了五倍,甚至在95°C 下放置4小时后仍保持活性。

单位定义
一单位 AccuPrime™ 高 GC 含量 DNA 聚合酶是在74°C 下30分钟内将10nmole dNTP 加入酸不溶性材料中所需的酶量。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
保真度(相对于 Taq)2 X
热启动内置热启动
反应次数200 次反应
突出端平末端
聚合酶AccuPrime 高 GC 含量 DNA 聚合酶
数量200 次反应
反应形式分离组分
运输条件湿冰或干冰
尺寸(最终产品)5 kb或更小
容量100 μL
适用于(应用)Hot-start PCR
高 GC PCR 扩增效果
反应速度标准
Unit SizeEach
内容与储存
• 1 x 100 μL AccuPrime 高 GC 含量 DNA 聚合酶 (2U/μL)
• 1 x 1 mL 5X AccuPrime 高 GC 含量缓冲液 A
• 1 x 1 mL 5X AccuPrime 高 GC 含量缓冲液 B
• 1 x 1 mL 50 mM MgSO4

在 -20°C 下储存。

常见问题解答 (FAQ)

当我用凝胶电泳检测时,我的寡核苷酸似乎没有显示出正确长度。这是为什么?

寡核苷酸应该在含有7M尿素的聚丙烯酰胺凝胶上检测,并且应该与50%的甲酰胺溶液一起上样以避免压缩和形成二级结构。长度相同但是组成不同的寡核苷酸可以产生不同的电泳结果。dC的迁移最快,其次是dA、dT,最慢的是dG。带有核糖核酸的寡核苷酸容易产生模糊的电泳条带,并且通常存在二级结构问题。

我所使用的引物刚开始时可以用来做PCR的,但是随着时间的推移它失效了。这是什么情况?

在进行PCR之前应将引物按单次使用的量分装。将分装的引物在94度下加热1分钟。在加入PCR反应体系前快速在冰上冷却引物。有些引物可能会自己退火或者自己蜷缩起来。

在我定制的寡核苷酸管中没有看到沉淀。我是否应该要求换货?

引物的干燥方法会使其附在管壁上形成一个薄层而不是附在底部,因此并不是总能看到沉淀,这种情况下产品仍可以正常使用。

在我的寡核苷酸管子底部有球状的沉淀。这是什么?我的寡核苷酸还能再用吗?

如果寡核苷酸受热过度,它看上去就像一个“球”状沉淀附在管子的底部。这应该不会影响到寡核苷酸的质量,并且该寡核苷酸应该是易溶于水的。

我的冻干寡核苷酸是绿色的。还能再用吗?

如果寡核苷酸看上去是绿色的,最有可能是墨水落入离心管中。该寡核苷酸应仍然是具有功能的。您可通过乙醇沉淀法去除该颜色。