核糖核酸酶 H (RNase H) 是一种核糖核酸内切酶，可特异性降解 RNA-DNA 杂交体中的 RNA 链，生成 5´ 磷酸封端的寡核糖核苷酸和单链 DNA。

应用
在第二链 cDNA 合成过程中去除 mRNA。在 Oligo(dT) 存在的情况下从 mRNA 去除 poly(A) 序列。寡脱氧核苷酸介导的 RNA 切割。

来源
从在质粒上表达大肠杆菌 RNase H 基因的大肠杆菌中纯化获得。

性能和质量检测
核糖核酸酶、非特异性脱氧核糖核酸内切酶、3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶。

单位定义
一个单位的酶量可于 37°C 下在 20 min 内将 ³H 标记 poly(A)poly(dT) 中的 1 nmol RNA 水解为酸溶性物质。

单位反应条件
20 mM Tris-HCl（pH 值 7.5）、0.1M KCl、10 mM MgCl₂、0.1 mM DTT、5% (w/v) 蔗糖、0.5 nmol ³H 标记 poly(A)poly(dT) 和 50 µL 酶，37°C 下 20 min。