不能。我们不建议使用胶体蓝(G-250)染色试剂盒对膜进行染色,因为这会产生很高的背景。更好的染色方法包括:
1.Invitrogen可逆性膜蛋白质染料(货号IB7710):可对硝化纤维素膜和PVDF膜上的蛋白质进行完整的可逆性染色。该产品的灵敏度高于丽春红S(在10分钟内检测到蓝色条带上<10 ng的BSA),可在5分钟内实现可逆性染色。免疫印迹检测不受染色和清除染料过程的影响,在某些情况下可达到更高的灵敏度。
2.Coomassie(非胶体)染色:使用溶于50%甲醇的0.1% Coomassie Blue R-250染色5分钟,然后用50%甲醇和10%乙酸洗涤多次进行脱色。用水洗涤多次、风干并在-20℃下保存,最长可保存12个月。灵敏度约为50-100 ng。
3.SimplyBlue SafeStain染液。SimplyBlue SafeStain使用手册中有对干燥PVDF膜进行染色的实验方案,但不推荐将其用于湿润的PVDF膜或硝化纤维素膜,因为会产生较高的背景。
4.酰胺黑染液:与Coomassie相同,但灵敏度更低。请参见使用手册中的实验方案。
5.丽春红S染液:与Coomassie相同,但灵敏度更低。请参见使用手册中的实验方案。
6.紫外透照法:转印后,将膜放在滤纸上,在室温下干燥10分钟。在20%甲醇中润湿,在湿润状态下于白光前观察印迹;条带会比膜看起来更透明。如果条带随膜变干而消失,则再次润湿膜。