我在使用Thermo Scientific Power Stainer对凝胶进行染色时,发现聚丙烯酰胺背景中存在与蛋白质不相关的非特异性斑点或污点。你们能否帮我排除故障?
以下是可能原因和解决方案:
- 凝胶洗涤不充分。小型凝胶至少水洗1次,共5分钟;中型凝胶至少洗涤2次,每次5分钟。当同时对2块小型凝胶染色时,每块小型凝胶应水洗2 x 5 分钟。
- 染色/脱色时间不足。将染色/脱色时间延长30秒至1分钟。或者,延长凝胶在水中的脱色时间。
- 凝胶和凝胶垫之间有气泡。安装染色装置时,使用滚筒或移液管赶走凝胶与凝胶垫之间的所有气泡。
- 凝胶洗涤不充分。小型凝胶至少水洗1次,共5分钟;中型凝胶至少洗涤2次,每次5分钟。当同时对2块小型凝胶染色时,每块小型凝胶应水洗2 x 5 分钟。
- 染色/脱色时间不足。将染色/脱色时间延长30秒至1分钟。或者,延长凝胶在水中的脱色时间。
- 凝胶和凝胶垫之间有气泡。安装染色装置时,使用滚筒或移液管赶走凝胶与凝胶垫之间的所有气泡。