Pierce™ 质谱兼容型银染试剂盒
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Pierce™ 质谱兼容型银染试剂盒
Thermo Scientific™

Pierce™ 质谱兼容型银染试剂盒

Pierce 质谱兼容型银染试剂盒是一套完整的试剂盒,用于对聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质进行快速超灵敏的银染,并对需要进行质谱分析的凝胶块进行高效脱色。该试剂盒使初学者和有经验的使用者均可以通过使用 1D 和 2D 规格的高、低和梯度百分比凝胶实现一致且可靠的染色。优化的染色方法可确保极度灵敏的染色,同时尽量减少蛋白质与凝胶基质的共价交联,抑制蛋白质的回收。脱色试剂有助于从染色后蛋白条带中完全去除银离子,并尽可能地回收蛋白,以用于后续的质谱分析了解更多信息
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Pierce 质谱兼容型银染试剂盒是一套完整的试剂盒,用于对聚丙烯酰胺凝胶中的蛋白质进行快速超灵敏的银染,并对需要进行质谱分析的凝胶块进行高效脱色。该试剂盒使初学者和有经验的使用者均可以通过使用 1D 和 2D 规格的高、低和梯度百分比凝胶实现一致且可靠的染色。优化的染色方法可确保极度灵敏的染色,同时尽量减少蛋白质与凝胶基质的共价交联,抑制蛋白质的回收。脱色试剂有助于从染色后蛋白条带中完全去除银离子,并尽可能地回收蛋白,以用于后续的质谱分析。

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特点:
灵敏度—在固定后 30 分钟内即可检测到每个斑点中不到 0.25 ng 的蛋白质
MS 兼容—试剂和方案经过优化,从染色后 1D 或 2D 凝胶 (SDS-PAGE) 中提取肽,质谱分析性能卓越。
灵活的染色方案—凝胶固定可选择 15 到 30 分钟或过夜,对染色性能没有任何影响;染色可进行 1 到 30 分钟(通常是 2 到 3 分钟)。
兼容性—甚至可以对难以染色的碱性蛋白,如溶菌酶 (pI 10) 和糜蛋白酶原A (pI 9.2),进行有效银染,其分别可在 0.2 ng 和 0.5 ng 含量下检测到
全套试剂盒—包括在质谱分析时,在凝胶蛋白水解和肽回收之前染色和脱色所需的所有试剂

普通银染方法通常使用戊二醛或甲醛,但这样可导致部分蛋白相互之间以及蛋白与凝胶基质之间发生共价交联。发生这种交联时,将很难从凝胶中提取或洗脱蛋白质。Pierce 银染在染料和显影剂工作液中使用甲醛。但是,该试剂盒用于质谱分析的程序经过优化,可在没有大幅降低灵敏度的情况下,尽可能地提高多肽回收率。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
检测定位凝胶内检测
检测方法比色法
产品线Pierce™
产品类型银染
数量1 L
靶标分子蛋白质
标签或染料
Unit SizeEach

常见问题解答 (FAQ)

我使用用于质谱分析的Thermo Scientific银染染色剂染色后,得到的背景非常高。这是为什么?

以下是可能原因和解决方案:

- 染色后的凝胶过度显色: 缩短显色时间。
- 洗涤步骤缺漏或水质较差: 不要跳过和减少洗涤步骤,应使用超纯水洗涤。
- 所用设备被污染: 使用超纯水将设备冲洗干净。
- 制胶所用化学品不纯或预制胶已过期: 使用分析级化学品或使用未过期的预制胶。
- 终止液不能有效终止凝胶显色: 制备新的5%乙酸,并在凝胶孵育的最初几分钟里更换2次。

我使用用于质谱分析的Thermo Scientific银染染色剂染色后,条带很微弱或完全看不见。我该怎么办?

以下是可能原因和解决方案:

- 显色时间不足:凝胶显色时间>5分钟,或加入新配制的显色工作液。
- 样品中的蛋白质含量极低或无蛋白: 检测原始样品中的蛋白浓度。
- 溶液配制不恰当或遗漏了某些步骤: 检查溶液配制方法,并遵循操作步骤。
- 显色步骤前,水洗过度: 为完全去除之前使用的溶液,应洗涤凝胶3次,每次10分钟;从步骤2开始,再次染色。使用显色剂孵育前,不要过度洗涤。

进行质谱分析时,应如何处理经过质谱分析用Thermo Scientific银染染料染色的凝胶?

使用质谱分析用Thermo Scientific银染染料染色后,有多种方法可回收和处理蛋白质以用于质谱分析。对于胶内胰蛋白酶消化,无论是否进行还原和烷基化,均可使用Thermo Scientific胶内胰蛋白酶消化试剂盒(货号89871)。应考虑遵循质谱分析中核心设备的建议。

质谱分析用Thermo Scientific银染染料的灵敏度是多少?

质谱分析用Thermo Scientific银染染料具有次纳克级别的灵敏度,可在固定后30分钟内检测到蛋白含量低至0.25 ng的条带。

用于质谱分析的Thermo Scientific银染染料应如何保存?保质期是多久?

质谱分析用Thermo Scientific银染染料可在室温下稳定保存1年。