蛋白酶 K,重组
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蛋白酶 K,重组

真菌白色侧齿霉菌中的蛋白酶 K 是一种非特异性丝氨酸蛋白酶,适用于蛋白的常规酶切。蛋白酶 K 可在以下条件下保持活性:• 在较宽 pH 值范围内–在 6.5了解更多信息
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真菌白色侧齿霉菌中的蛋白酶 K 是一种非特异性丝氨酸蛋白酶,适用于蛋白的常规酶切。

蛋白酶 K 可在以下条件下保持活性:

• 在较宽 pH 值范围内–在 6.5 至 9.5 之间活性较佳
• 在变性条件下–例如存在 SDS 或尿素
• 在存在金属螯合剂的情况下—例如 EDTA
• 在相对较高的温度下–最佳酶切温度为 65°C

应用
在制备 DNA 和 RNA 过程中去除内源性核酸酶;制备用于原位杂交的组织切片。

性能和质量测试
脱氧核糖核酸内切酶和脱氧核糖核酸外切酶测定;检测液体剂型是否缺乏 RNase 活性。

单位定义
一个 mAnson 单位描述为在 37°C 下以血红蛋白为底物在 1 分钟内释放 1 µmole 福林阳性氨基酸的酶量。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
产品类型蛋白酶 K
数量1 g
运输条件经批准可在室温下或置于湿冰上运输
最大浓度>40 U/mg
形式粉末
Unit SizeEach
内容与储存
一管蛋白酶 K
储存在冰箱 (2–8°C) 中。

常见问题解答 (FAQ)

蛋白酶K应该如何储存?

建议将其储存在4°C。

How do you recommend storing proteinase K?

We recommend storing it at 4°C.

How do I isolate DNA from single bacterial colonies before PCR?

Scrape a single colony from the surface of an agar plate and transfer to 12 µL of SCL solution [10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 1 mM EDTA, 50 µg/mL proteinase K] and incubate for 15 min at 55 degrees C. Inactivate proteinase K for 15 min at 80 degrees C and add 20 µL of deionized water. Centrifuge at 12,000 x g for 3 min. Transfer the supernatant to a new tube.

What are the recommended conditions for proteinase K treatment when isolating RNA or DNA samples?

Concentration: Generally proteinase K is used in the concentration range of 50 to 500 µg/mL at 65 degrees C in the presence of SDS (0.5-1%).

Temperature optimum: 65 degrees C; 12X more active at 65 degrees C than at 25 degrees C.

pH: Proteinase K is stable over a wide pH range (4.0 to 12.5), with optimal activity at pH 6.5 to 9.5. It is most stable at pH 8.
Inactivation: Heat inactivate Proteinase K at 80 degrees C for 15 min. Phenol extraction is the recommended method to ensure complete inactivation.

Inhibited by: PMSF (0.1 to 1.0 mM of PMSF is usually sufficient for inhibition of Proteinase K)

Not inhibited by: Proteinase K is not inactivated by metal ions, chelating agents (e.g., EDTA), sulfhydryl reagents or by trypsin or chymotrypsin inhibitors. Activity can be stimulated by addition of denaturing agents (SDS and urea).